松花粉的主要活性成分及其功能的研究進展

朱巧莎，侯占群，段盛林，牟德華，*

（1.河北科技大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，河北石家莊050018；2.中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院有限公司，北京100020）

松花粉[1]在醫(yī)學(xué)中又名松花，松屬植物的單性花，是我國傳統(tǒng)食藥兼用的花粉品種[2]，并于2014年列入國家中藥材標準[3]。研究表明，松花粉富含不飽和脂肪酸、植物甾醇、類黃酮、松花粉多糖、輔酶等活性物質(zhì)，具有良好的開發(fā)價值[4-7]。目前針對松花粉的研究主要集中于活性成分的結(jié)構(gòu)與功能以及相關(guān)功能食品的開發(fā)，對于具體活性成分的構(gòu)效關(guān)系研究還存在局限性。對近年來松花粉的主要活性成分黃酮、植物甾醇以及多糖的提取、成分組成和功能性特點的相關(guān)研究進行綜述。鑒于松花粉功效較多，國內(nèi)外眾多專家學(xué)者對松花粉中黃酮、多糖、甾醇的關(guān)鍵功效進行深入研究。

1 松花粉中的黃酮類物質(zhì)及其功能

1.1 松花粉中黃酮類物質(zhì)的提取和組成成分

常用的植物黃酮提取方法主要有[8]：溶劑回流提取、超聲波提取、酶法提取、超臨界提取等。郭麗梅等[9]用醇提法對油松花粉中的黃酮進行提取，分析得到黃酮的提取量為1.9 mg/g。李燕梅[10]利用乙醇浸泡松花粉，得到的黃酮量為2.9 mg/g。邵圣娟等[11]采用聚乙二醇-硫酸銨雙水相體系對松花粉中的總黃酮進行萃取，其萃取率可以達到98.93%。此外，研究者又對松花粉的物質(zhì)組成進行了分析。王暉等的研究表明[12]，松花粉中的黃酮類物質(zhì)組成主要包括蘆丁，柚皮素、二氫山奈酚、二氫槲皮素等。劉嘉寶等[13]利用薄層層析法鑒定出云南松花粉黃酮類化合物中主要有黃酮和黃酮醇類，其次是二氫黃酮醇類，另外還有少量黃烷醇類的花青素。

1.2 松花粉中黃酮功效

1.2.1 松花粉中黃酮類物質(zhì)抗氧化的作用

松花粉中黃酮類物質(zhì)抗氧化活性主要通過清除自由基來實現(xiàn)。王丹丹[14]研究發(fā)現(xiàn)，少量的松花粉黃酮提取物有很強的清除羥基自由基的作用。其機理是通過降低細胞氧化水平，阻斷脂質(zhì)過氧化反應(yīng)來發(fā)揮抗氧化作用。Wang 等[15]報道了松花粉中蘆丁通過劑量依賴性減少Aβ42 誘導(dǎo)的氧化損傷人神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y）胞內(nèi)活性氧自由基丙二醛的含量，來降低Aβ42 的細胞毒性?；鼐У萚16]研究發(fā)現(xiàn)松花粉中黃酮類化合物有很好的體外抗氧化作用。其機理為抑制Fenton 反應(yīng)和Fe2+誘發(fā)卵黃低密度脂蛋白多不飽和脂肪酸過氧化，進而減少羥基自由基烷氧基和烷過氧基含量。董素哲等[17]研究證明松花粉具有清除DPPH 自由基和羥基自由基的能力，得到松花粉中主要抗氧化物質(zhì)為黃酮和甾醇。

1.2.2 松花粉中黃酮類物質(zhì)抗疲勞的作用

胡水保等[18]以瑪咖松花粉為試驗原料來研究松花粉黃酮抗運動型疲勞的作用。其機理為黃酮通過增加肝糖原儲備，同時加速乳酸的清除速率來抵抗運動性疲勞。李守漢等[19]研究表明，松花粉能明顯增加Wistar大鼠的負重游泳的時間，具有抗疲勞的功效。劉協(xié)等[20]研究表明，松花粉黃酮能增加昆明種小鼠體內(nèi)肝糖原的含量，具有很好的抗疲勞作用。

1.2.3 松花粉中黃酮類物質(zhì)的其他作用

松花粉中黃酮類物質(zhì)還具有保肝護肝的作用，謝惠萍等[21]將松花粉配制成受試物，灌胃受試物的大鼠肝組織損傷低于對照組。得出結(jié)論，松花粉能有效減少酒精性肝損傷。朱良等[22]研究表明松花粉總黃酮對四氯化碳致小鼠急性肝損傷具有保護作用。另外，黃酮類物質(zhì)不僅有保護肝臟的作用，還有抗癌抑癌的功效[23]。

2 松花粉中的多糖類物質(zhì)及其功能

2.1 松花粉中多糖類物質(zhì)提取及組成分析

應(yīng)用于松花粉多糖提取的主要為水提法。李艷艷等[24]利用蒽酮-硫酸比色法測定松花粉中粗多糖的含量為4.11%。袁桂香等[25]采用超聲破壁技術(shù)對馬尾松松花粉多糖進行提取，并用苯酚－硫酸法檢測多糖含量為11.25 mg/g。Li 上Shanshan 等[26]利用熱水來提取蜂花粉多糖，用二乙氨基乙基纖維素凝膠CL-6B 進行分級分離，最后得到多糖的基本組成為鼠李糖（11.5%），半乳糖醛酸（12.0 %），半乳糖（41.2 %）和阿拉伯糖（29.7%）。Yang Xiaoping 等[27]對干花粉進行溫差破壞，用硫酸-苯酚法和碘-碘化鉀反應(yīng)法、硫酸咔唑法和雙縮脲試驗法等一系列方法檢測，最后得到多糖組成為中性糖（56.90%）和糖醛酸（8.09%），以及蛋白質(zhì)（10.24%）。中性單糖組成：葡萄糖，半乳糖，甘露糖，阿拉伯糖和木糖，摩爾比為1.0∶1.45∶0.44∶3.22∶0.03。

2.2 松花粉中多糖的功效

2.2.1 松花粉多糖對肝臟的保護作用

Chu Hui-Li 等[28]研究了馬尾松花粉多糖硫酸酯對HepG2 細胞的增殖和成長周期的影響。結(jié)果表明松花粉多糖可誘導(dǎo)HepG2 細胞處于阻滯期，其作用機制是CDK1 和CyclinB 的下調(diào)以及p53 和p21 表達的上調(diào)，從而抑制肝癌細胞的增殖。TaoCong 等[29]研究了馬尾松花粉水提物對肝纖維化大鼠模型的抗纖維化作用。松花粉多糖提取物能有效抑制CCl4 誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠模型的纖維化過程。高振[30]研究了馬尾松花粉中硫酸酯化多糖對肝癌細胞[Ca2+]i 水平的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)80%乙醇提取的松花粉多糖和酸解法得到的松花粉多糖對HepG2 細胞的增殖都有抑制作用，且與劑量和時間成依賴關(guān)系。

2.2.2 松花粉多糖免疫增強作用

Guo Fanxia 等[31]對泰山松花粉多糖的免疫功效進行研究，結(jié)果顯示，多糖提取液提高了雛雞的成活率和質(zhì)量，顯著改善了體液免疫和細胞免疫。BingLi 等[32]同樣研究了泰山松花粉的免疫功效，發(fā)現(xiàn)松花粉多糖明顯提高了免疫器官體重指數(shù)，淋巴細胞轉(zhuǎn)化率等免疫參數(shù)的水平。Geng Yue 等[33]研究了松花粉硫化多糖對小鼠巨噬細胞的免疫調(diào)節(jié)作用，發(fā)現(xiàn)松花粉硫酸多糖在RAW264.7 巨噬細胞中具有很好的免疫激活作用。其作用機理為松花粉硫化多糖與巨噬細胞上的TLR4 抑制劑結(jié)合，這激活了鈣離子釋放通道。鈣離子濃度的增加活化了巨噬細胞，從而提高了小鼠的免疫力。

2.2.3 松花粉多糖降血糖的作用

劉月冉等[34]以馬尾松花粉為試驗原料，研究其酯化多糖對胰島細胞中胰島素分泌的影響，發(fā)現(xiàn)松花粉酯化多糖在無葡萄糖的作用下單獨使用可顯著促進MINI 細胞分泌胰島素，具有降血糖的功效。馮濰[35]研究發(fā)現(xiàn)，松花粉硫酸酯化多糖能夠顯著降低鏈佐星誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血糖水平。

3 松花粉中的植物甾醇及其功能

植物甾醇廣泛存在于各種植物花粉。近年來，松花粉甾醇的提取和功效成為國內(nèi)外科學(xué)工作者的重點研究對象。

3.1 松花粉中植物甾醇的提取和組成成分研究

高愛新等[36]采用超臨界CO2萃取技術(shù)來提取松花粉中植物甾醇，最后得到植物甾醇含量為8.6%。Wu Xiao-Qin 等[37]分別選用馬尾松、油松、云南松為試驗原料，比較了70%乙醇提取物中3 種主要次生代謝產(chǎn)物（類黃酮，酚酸和甾醇）的含量，3 種松花粉中甾醇的含量相似，含量在2.5 mg/g～3.0 mg/g 之間。L Huang 等[38]建立了松花粉超臨界提取物中甾醇成分的簡便可行的提取分析方法，并確定了松花粉超臨界萃取物中甾醇類的主要成分是β-谷甾醇。孫陽恩等[39]采用Liebermann-Burchard 比色法測定馬尾松花粉中總甾醇含量為1.680 mg/g，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）鑒定出8 種植物甾醇成分，分別為：環(huán)阿屯醇、Δ5-菜油甾醇、Δ7-菜油甾醇、β-谷甾醇、Δ5-燕麥甾醇、禾本甾醇、豆甾醇和24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷醇。

3.2 松花粉中甾醇功效

3.2.1 松花粉甾醇對抑制前列腺增生的作用

植物甾醇是松花粉的主要活性物質(zhì)之一。朱寶安等[40]研究了總甾醇對SD 大鼠前列腺良性增生的影響，最后得出結(jié)論，松花粉甾醇能夠抑制前列腺的增生。Wang Ruwei 等[41]研究發(fā)現(xiàn)富含植物甾醇花粉提取物對良性前列腺增生有良好的改善作用。彭修娟等[42]對昆明種小鼠注射丙酸睪酮，建立前列腺增生小鼠模型，發(fā)現(xiàn)秦嶺松花粉對模型組前列腺增生有抑制作用。

3.2.2 松花粉甾醇對心血管的保護作用

谷甾醇是松花粉甾醇的主要成分之一，KlausFassbender 等[43]對適度升高人體的植物甾醇水平與降低心血管風(fēng)險的相關(guān)性進行研究，結(jié)果表明，谷甾醇的濃度與冠心病風(fēng)險降低顯著相關(guān)。各種花粉，堅果，全谷物和豆類植物是植物甾醇的良好來源。JyotikaD－h(huán)ankhar[44]研究發(fā)現(xiàn)，各種植物甾醇有利于降低心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險并促進身體健康。García-Llatas G 等研究顯示[45]植物甾醇能有效降低血漿膽固醇水平。其機理是由于他們與膽固醇的結(jié)構(gòu)相似，因此能夠減少小腸對膽固醇的吸收。從而降低心血管疾病的發(fā)生率。

3.2.3 松花粉甾醇輕身減肥的作用

劉杰爾[46]證實了松花粉提取物中含有一定量的植物甾醇，松花粉甾醇參與了受試小鼠的血脂調(diào)控，抑制脂酶活性，達到減肥的功效。許繼民[47]研究發(fā)現(xiàn)與空白對照組相比，松花粉甾醇組對前脂肪細胞增殖有顯著抑制作用，12.8 μg/mL 的馬尾松花粉甾醇組抑制效果最好，抑制率達到75%。

3.2.4 松花粉甾醇的其他作用

MirasmorenoB 等[48]研究發(fā)現(xiàn)，植物甾醇具有抗癌作用。其作用機理為植物甾醇能夠抑制血管生成參與腫瘤細胞生長和發(fā)展的相關(guān)化合物。Misawa 等[49]研究得出植物甾醇有抗糖尿病的功效。KarimC.ElKasmi 等[50]研究了植物甾醇對肝功能的影響，植物甾醇的缺乏或減少是嬰兒接受肝臟保護的機制之一，可見過量的甾醇反而會成為肝臟的負擔(dān)。李麗的研究[51]表征了馬尾松花粉的化學(xué)成分，包括β-谷甾醇等16 種成分，并證實了松花粉甾醇對SD 大鼠的胃黏膜有保護作用。董素哲等[17，52]研究表明松花粉具有一定的抗氧化活性，其有效部位為黃酮和甾醇。并通過多元分析發(fā)現(xiàn)清除DPPH 自由基與清除羥基自由基和總黃酮與總甾醇的含量確實存在關(guān)聯(lián)。

4 松花粉中其他活性成分及其功能

松花粉中還含有豐富的生物活性肽、核酸、膽堿等活性成分[12]。宣自華等[53]研究松花粉對非酒精性脂肪肝大鼠的影響，得出結(jié)論，松花粉能夠治療非酒精性脂肪肝。YanhongLuo 等[54]研究了松花粉對砷中毒小鼠大腦皮質(zhì)中細胞凋亡相關(guān)蛋白的影響。結(jié)果表明，松花粉能夠降低Bax，Bcl-2 蛋白的表達而增加p53 蛋白表達，起到抑制細胞凋亡的作用。

5 結(jié)語

近年來，松花粉因其具有很好的功能特性，已經(jīng)引起研究人員的廣泛關(guān)注。根據(jù)文獻調(diào)研，發(fā)現(xiàn)松花粉中的主要活性成分是植物甾醇、黃酮和多糖。該文針對這3 種主要活性物質(zhì)的提取、成分組成、結(jié)構(gòu)特點等進行概述，并分別對其功能性進行了總結(jié)。現(xiàn)在市面上的松花粉產(chǎn)品主要是功能性飲料和片劑，沒有得到充分的應(yīng)用。松花粉需進一步的研究和開發(fā)，可應(yīng)用于藥材，特醫(yī)食品等領(lǐng)域，這將增加松花粉的經(jīng)濟價值，具有很好的前景。