絨毛蛋白及核苷酸還原亞單位M1在不同胃黏膜病變組織中表達(dá)研究

趙 帥 華

(濮陽(yáng)市安陽(yáng)地區(qū)醫(yī)院病理科 濮陽(yáng) 455000)

胃癌在消化道惡性腫瘤中最為常見(jiàn)，而胃癌主要由不同胃黏膜病變而逐步形成，這些病變包括慢性胃炎、萎縮性胃炎、腸上皮化生及胃黏膜上皮內(nèi)瘤變等。有調(diào)查研究顯示，早期胃癌患者經(jīng)過(guò)規(guī)范治療后，其5年生存率高于90%[1]，而早期胃癌診斷較為困難，因此提高早期胃癌的檢出率對(duì)于改善胃癌患者的預(yù)后有著重要的意義。絨毛蛋白屬于鈣離子調(diào)節(jié)性肌動(dòng)蛋白的結(jié)合蛋白，在結(jié)腸、小腸及近端腎曲小管微絨毛刷狀緣的形成中有著重要作用，而在消化道腫瘤組織中也存在特異性表達(dá)，而核苷酸還原亞單位M1(RRM1)屬于一種抑癌基因，能夠?qū)2期檢測(cè)點(diǎn)功能產(chǎn)生激發(fā)作用，從而能夠?qū)κ軗p的DNA產(chǎn)生修復(fù)及凋亡作用，能夠?qū)?xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移產(chǎn)生抑制效果，并能成為早期診斷部分腫瘤疾病的重要指標(biāo)之一[2]。本文研究中，為進(jìn)一步明確絨毛蛋白及RRM1在不同胃黏膜病變中的表達(dá)情況，選擇我院210例不同胃黏膜病變組織標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2015年9月～2017年5月病例資料完整的210例胃黏膜活檢標(biāo)本，其中慢性胃炎35例，腸上皮化生36例，低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變31例，高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變20例，胃癌88例。胃癌類(lèi)型：印戒細(xì)胞癌28例，管狀腺癌27例，混合性癌33例。

1.2 方法

全部標(biāo)本予以常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片及脫蠟后進(jìn)行絨毛蛋白及RRM1檢測(cè)，采用SP法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，DAB顯色，采用蘇木精復(fù)染、脫水、透明及封片，具體操作參照試劑盒說(shuō)明書(shū)，全部標(biāo)本免疫組織化學(xué)染色中設(shè)立陽(yáng)性及陰性對(duì)照。絨毛蛋白濃縮型鼠抗人單克隆抗體、實(shí)驗(yàn)用兔抗人RRM1多克隆抗體及SP通用型免疫組織化學(xué)試劑盒均由福州邁新生物技術(shù)公司提供。絨毛蛋白及RRM1定位于細(xì)胞漿的黃棕色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，針對(duì)著色情況和陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行積分，每例標(biāo)本均隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野(×400)，確定其每個(gè)視野的陽(yáng)性率，并計(jì)算出平均數(shù)。著色情況計(jì)分：0分：無(wú)染色；1分：黃色；2分：棕色；3分：深棕色。陽(yáng)性細(xì)胞百分比計(jì)分：0分：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞；1分：陽(yáng)性細(xì)胞不高于30%；2分：陽(yáng)性細(xì)胞高于30%，但不高于70%；3分：陽(yáng)性細(xì)胞在70%以上。將上述兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)相加，陰性為0～2分，陽(yáng)性為3～6分[3～4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，其中計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 絨毛蛋白與RRM1在不同胃黏膜標(biāo)本表達(dá)情況

由表1可見(jiàn)，腸上皮化生組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的絨毛蛋白陽(yáng)性率顯著高于慢性胃炎組(P<0.05)；低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的絨毛蛋白陽(yáng)性率顯著低于腸上皮化生組(P<0.05)；低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的RRM1陽(yáng)性率顯著高于慢性胃炎組及腸上皮化生組(P<0.05)；慢性胃炎組標(biāo)本中的RRM1陽(yáng)性率顯著高于腸上皮化生組(P<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 絨毛蛋白與RRM1在不同胃黏膜標(biāo)本陽(yáng)性表達(dá)情況[例(%)]

組別標(biāo)本數(shù)絨毛蛋白陽(yáng)性RRM1陽(yáng)性慢性胃炎組3512(34.3)b23(65.7)b腸上皮化生組3632(88.9)a12(33.3)a低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組3121(67.7)ab25(80.6)ab高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組2014(70.0)ab17(85.0)ab胃癌組8858(65.9)ab79(89.8)ab

注：a與慢性胃炎組比較，P<0.05；b與腸上皮化生組比較，P<0.05。

2.2 絨毛蛋白、RRM1表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

由表2可見(jiàn)，絨毛蛋白、RRM1在高中分化胃癌陽(yáng)性表達(dá)顯著高于低分化胃癌，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而絨毛蛋白、RRM1的陽(yáng)性表達(dá)情況與性別、年齡、腫瘤大小、浸潤(rùn)程度、腫瘤分期及淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表2 絨毛蛋白、RRM1陽(yáng)性表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系[例(%)]

病理特征例數(shù)絨毛蛋白陽(yáng)性P值RRM1陽(yáng)性P值性別男5333(62.3)女3525(71.4)>0.0549(92.5)30(85.7)>0.05年齡<60歲3020(66.7)≥60歲5838(65.5)>0.0527(90.0)52(89.7)>0.05腫瘤大小<4cm4932(65.3)≥4cm3926(66.7)>0.0543(87.8)36(92.3)>0.05浸潤(rùn)程度T1^T22213(59.1)T3^T46845(66.2)>0.0518(81.8)61(89.7)>0.05分化程度高中分化4339(90.7)低分化4519(42.2)<0.0542(97.7)37(82.2)<0.05腫瘤分期Ⅰ^Ⅱ期3522(62.9)Ⅲ^Ⅳ期5336(67.9)>0.0530(85.7)49(92.5)>0.05淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是5032(64.0)否3826(68.4)>0.0545(90.0)34(89.5)>0.05

3 討論

目前，細(xì)胞骨架在細(xì)胞生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得到廣泛地應(yīng)用，較多研究表明其與多種疾病存在重要聯(lián)系[4～5]。絨毛蛋白屬于單體形式的酸性多肽，由2.5萬(wàn)個(gè)堿基構(gòu)成，位于2號(hào)染色體中，分子質(zhì)量為95kDa，主要在小腸絨毛細(xì)胞的刷狀緣及外分泌腺部分進(jìn)行表達(dá)。絨毛蛋白不僅具有抗凋亡作用，同時(shí)作為重要的細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白，在對(duì)腸上皮表型的維持上具有一定的作用。本文研究結(jié)果顯示，腸上皮化生組、低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的絨毛蛋白陽(yáng)性率顯著高于慢性胃炎組(P<0.05)，說(shuō)明絨毛蛋白在從腸上皮化生至癌變的過(guò)程中其基因出現(xiàn)了變化，從而表現(xiàn)為下調(diào)表達(dá)的形式，說(shuō)明在癌變過(guò)程中，其上皮的異常增殖及分化狀態(tài)下降，從而使正常的絨毛蛋白表達(dá)受到抑制。且本文結(jié)果中，低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的絨毛蛋白陽(yáng)性率顯著低于腸上皮化生組(P<0.05)，說(shuō)明隨著胃黏膜的變化，其上皮細(xì)胞的極性處于紊亂狀態(tài)，并減少了能夠維持微絲結(jié)構(gòu)的成分表達(dá)下降，從而使病程加速。而RRM1分子量為85kDa，有19個(gè)外顯子，處于染色體11p15.5區(qū)域，有文獻(xiàn)報(bào)道，RRM1與惡性腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移存在密切的關(guān)系[6]。本文研究結(jié)果顯示，低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組、胃癌組標(biāo)本的RRM1陽(yáng)性率顯著高于慢性胃炎組及腸上皮化生組(P<0.05)，慢性胃炎組標(biāo)本中的RRM1陽(yáng)性率顯著高于腸上皮化生組(P<0.05)，說(shuō)明RRM1在胃黏膜癌變的發(fā)生發(fā)展中具有一定的作用。

同時(shí)，本文結(jié)果還顯示，絨毛蛋白、RRM1在高中分化胃癌陽(yáng)性表達(dá)顯著高于低分化胃癌，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而絨毛蛋白、RRM1的陽(yáng)性表達(dá)情況與性別、年齡、腫瘤大小、浸潤(rùn)程度、腫瘤分期及淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移無(wú)顯著性差異(P>0.05)。說(shuō)明絨毛蛋白及RRM1是一種很好的區(qū)分腫瘤分化的標(biāo)志物，能夠?qū)δ[瘤的分化進(jìn)行有效的預(yù)測(cè)。

綜上所述，絨毛蛋白及RRM1的表達(dá)與胃癌的發(fā)病發(fā)展及預(yù)后存在一定關(guān)系，早期檢測(cè)能夠有效對(duì)胃癌進(jìn)行診斷、病情評(píng)估及采取合理的治療方案，從而改善患者的預(yù)后。