骨髓增殖性腫瘤病人外周血中細(xì)胞因子水平的表達及其意義

徐海濤,姚福生

骨髓增殖性腫瘤(MPN) 中最常見的4種亞型分別是慢性粒細(xì)胞白血病(CML)、真性紅細(xì)胞增多癥(PV) 、原發(fā)性血小板增多癥(ET) 和原發(fā)性骨髓纖維化(PMF)。細(xì)胞因子是一類可溶性蛋白質(zhì)，在許多生物過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[1]。已有研究表明，一些異常細(xì)胞因子的產(chǎn)生以及部分細(xì)胞因子水平的失調(diào)，參與許多疾病包括腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[2]。國外有一些研究發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞因子水平在MPN 病人中同樣出現(xiàn)失調(diào)[3-4]。但國內(nèi)MPN病人細(xì)胞因子水平情況報道較少。本文擬對MPN病人外周血細(xì)胞因子水平進行檢測，并對其在MPN發(fā)病機制中的作用進行初步探討。

1 資料與方法

1.1一般資料收集2013年5月至2017年2月安慶市立醫(yī)院血液科收治的68例骨髓增殖性腫瘤(MPN)病人作為研究對象，其中男性37例，女性31例，年齡(51±6)歲，年齡范圍為14～79歲。按照世界衛(wèi)生組織的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，其中PMF組11 例，PV組22例，ET組16例，CML組19例；另選擇同期院內(nèi)體檢健康職工20例為對照組，其中男性11例，女性9例，年齡(47±5)歲，年齡范圍為27～76歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并感染的病人；(2)免疫缺陷或免疫抑制的病人。本研究獲安慶市立醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，病人或近親屬對研究方案均簽署知情同意書。

1.2標(biāo)本采集收集病人和健康體檢者空腹靜脈血4 mL，檢測細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-2R、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及IL-10等。

1.3細(xì)胞因子水平的檢測細(xì)胞因子IL-1β、IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α及IL-10均采用免疫熒光法進行檢測，試劑由美國luminex公司提供。由安慶市立醫(yī)院免疫實驗室于采血當(dāng)日進行檢測。

2 結(jié)果

2.1外周血細(xì)胞因子水平的比較PMF組中，IL-2R、IL-6、IL-8及IL-10平均值較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.001、0.021、0.031、0.026)；PV組中，IL-2R及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.012、0.046)，其余細(xì)胞因子差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；ET組中，IL-2R及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.026、0.017)，其余細(xì)胞因子差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；CML組中，IL-2R、IL-6及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.031、0.026、0.019)，其余細(xì)胞因子差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與ET和PV相比，PMF病人表現(xiàn)出更高的IL-2R、IL-6和IL-10濃度。與ET和PV相比，CML病人IL-6的濃度也更高。與CML相比，PMF病人表現(xiàn)出更高濃度的IL-2R，具體數(shù)據(jù)見表1。

2.2MPN各亞組間IL水平與臨床特征的關(guān)系檢測了MPN各亞組間年齡、性別、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板計數(shù)(PLT)、乳酸脫氫酶(LDH)、脾大、紅細(xì)胞輸注次數(shù)、JAK2V617突變與不同IL水平之間的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MPN各亞組間年齡、性別、脾大、LDH與不同IL水平間均無相關(guān)性；PV組IL-2R與HGB呈正相關(guān)；ET組IL2-R與WBC、PLT均呈正相關(guān)；PMF組IL-2R與WBC、紅細(xì)胞輸注次數(shù)及JAK2V617突變均呈正相關(guān)。

3 討論

MPN是獲得性造血干細(xì)胞發(fā)生變化導(dǎo)致外周血細(xì)胞(包括紅細(xì)胞，白細(xì)胞或血小板)產(chǎn)生失調(diào)的血液病[6]。現(xiàn)已證實JAK2V617F基因突變是MPN發(fā)病的一個主要機制[7]。Janus激酶/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子(JAK/STAT)信號通路的活化與MPN發(fā)生密切相關(guān)，而JAK/STAT信號通路是細(xì)胞因子信號通路的主要介導(dǎo)者[8]，因此，細(xì)胞因子與MPN同樣密切相關(guān)。但國內(nèi)相關(guān)研究報道較少。雖然細(xì)胞因子水平有顯著的異質(zhì)性，但本研究表明：MPN病人中，IL-2R及IL-8水平較對照組明顯升高。此外，不同MPN各亞組間細(xì)胞因子水平也明顯不同：與ET組和PV組相比，PMF組病人表現(xiàn)出更高的IL-2R、IL-6和IL-10濃度，CML病人IL-6的濃度也更高。IL-2R與MPN各亞組的臨床特征相關(guān)：PV組IL-2R與HGB呈正相關(guān)，ET組IL-2R與WBC、PLT均呈正相關(guān)，PMF組IL-2R與WBC、紅細(xì)胞輸注次數(shù)及JAK2V617突變均呈正相關(guān)。

表1 初診MPN病人與對照組外周血細(xì)胞因子濃度比較

注：兩兩比較為LSD-t檢驗，a、b、c、d分別為和對照組、PMF組、PV組、ET組比較，P<0.05

Tefferi等[4]對127例PMF的外周血細(xì)胞因子進行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：IL-2R、IL-6、IL-8及IL-10的濃度較健康對照組明顯升高，這與我們的研究一致，但IL-1β及TNF-α的濃度較對照組也顯著升高。同時，他們研究還發(fā)現(xiàn)，IL-2R及IL-8與較短的生存期相關(guān)。并且IL-8 與PMF的全身癥狀有關(guān)，IL-12和IL-2R濃度的升高提示需要輸注紅細(xì)胞，IL-8與IL-2R水平的升高與白細(xì)胞增多密切相關(guān)。Pourcelot等[3]對17例PV和21例ET的細(xì)胞因子進行檢測發(fā)現(xiàn)，除IL-1β外，IL-4、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α的濃度均明顯升高；PV組與ET組相比，ET組IL-8明顯升高，IL-6、IL-10及TNF-α兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。Pardanani等[9]對PMF病人的外周血細(xì)胞因子及相關(guān)臨床特征進行研究，結(jié)果表明 IL-2R及IL-8與較短的生存周期及白血病轉(zhuǎn)化有關(guān)，而且IL-8 可能通過新生血管形成促使腫瘤微環(huán)境的形成。

國外已有研究證實，JAK2V617突變幾乎在所有的PV以及55%～65%ET或PMF中都有表達。 在JAK2V617F的已知下游效應(yīng)物中，STAT5轉(zhuǎn)錄因子在MPN的發(fā)病中起關(guān)鍵作用。當(dāng)STAT5轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)出現(xiàn)失調(diào)時，MPN就處于疾病活化狀態(tài)。與STAT5在MPN病理生理學(xué)中的重要作用一致，JAK2V617F表達無法在STAT 5a/b缺陷小鼠中產(chǎn)生疾病[10]。在JAK2V617表達的MPN小鼠模型中，STAT3的缺失，導(dǎo)致小鼠的臨床癥狀加重[11]，生存期縮短[12]。此外，STAT3通過激活JAK途徑，還激活I(lǐng)L-6及IL-10等細(xì)胞因子參與MPN的發(fā)生、發(fā)展[13]。

綜上所述，MPN病人中細(xì)胞因子的表達出現(xiàn)失調(diào)，不同MPN亞組間各種細(xì)胞因子的表達水平也不盡相同，但MPN各亞型的IL-2R及IL-8水平較對照組均明顯升高，并且細(xì)胞因子水平與MPN臨床特征存在一定的相關(guān)性，細(xì)胞因子介導(dǎo)的JAK/STAT信號通路的持續(xù)激活可能是導(dǎo)致MPN 發(fā)生、發(fā)展的重要因素。但由于我們的病例數(shù)較少，因此還需進一步研究。