芍藥苷抗抑郁的相關(guān)研究進(jìn)展＊

夏小雯，孫 亞，宋春紅，喬明琦

（山東中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥經(jīng)典理論教育部重點實驗室 濟南 250355）

1963年Shibatas從芍藥根中分離得到了芍藥苷[1]，開啟了對于芍藥苷的藥理作用研究。芍藥苷的分子量為480.45，分子式是C23H28O11，是芍藥總苷的主要組成成分。目前普遍認(rèn)為芍藥苷具有神經(jīng)保護(hù)、抗炎抗?jié)儭⑶鍩嶂汞d利尿、擴張血管、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜等藥理作用。近年來實驗發(fā)現(xiàn)芍藥苷對于抑郁癥動物及細(xì)胞模型療效顯著，它能夠抑制神經(jīng)元損傷，調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，增強單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。更有研究人員發(fā)現(xiàn)芍藥苷有雌激素樣作用，能夠改善抑郁樣情緒，是未來治療抑郁癥非常有潛力的新藥[2,3]。本文從中醫(yī)的疏肝解郁和西醫(yī)的抗抑郁作用兩個方面對芍藥苷的藥理作用進(jìn)行論述。

1 芍藥苷在中醫(yī)肝郁血虛所致抑郁癥中的作用研究

《神農(nóng)本草經(jīng)》中對于芍藥的記載：“主邪氣腹痛，除血痹……益氣”[4]，《本草求真》中李杲對于芍藥的評價說：“芍藥能益陰滋濕……非因通利也”[5]。可見我國古人很早就已經(jīng)利用芍藥來治療肝郁氣滯、情緒不遂之人。芍藥為肝脾兩經(jīng)血分藥，性味微甘，微苦，微酸，微寒?？嗾邽a，酸善收，甘能補能緩，故芍藥的作用在于柔肝瀉木，補脾、和營、斂陰、緩?fù)?。芍藥在逍遙散和四逆散以及柴胡疏肝散中均作為臣藥發(fā)揮疏肝解郁、養(yǎng)血柔肝的重要作用。古代醫(yī)書中記載，芍藥能夠治療肝郁血虛癥引起的：情緒低落、失眠多夢、健忘、活動性下降、食欲不振、五心煩熱等癥狀。芍藥苷作為芍藥的主要有效成分，現(xiàn)代中醫(yī)研究也證實了芍藥苷能夠通過調(diào)節(jié)NO/cGMP 信號通路上的多個靶點來治療大鼠的血虛肝郁癥[6]。中醫(yī)所講的肝藏象并非現(xiàn)代解剖學(xué)中的肝臟，它是一個整體而復(fù)雜的系統(tǒng)，肝郁血虛抑郁癥的失眠健忘等病癥的發(fā)生與腦密切相關(guān)。清代王清任在《醫(yī)林改錯》中提出過:“靈機、記性，不在心，在腦”[7]。精辟地論證了思維產(chǎn)生于腦而不在心?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究也發(fā)現(xiàn)芍藥苷能夠透過血腦屏障來治療抑郁癥，改善腦內(nèi)的神經(jīng)細(xì)胞及內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)。

2 芍藥苷在單胺類神經(jīng)遞質(zhì)失常、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子減少抑郁癥中的作用

芍藥苷能夠調(diào)節(jié)整個神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的活動，而不僅僅是神經(jīng)遞質(zhì)的增加和減少。目前有一大類抑郁癥的發(fā)病假說認(rèn)為抑郁癥的發(fā)生是由于神經(jīng)遞質(zhì)穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機制的損傷而導(dǎo)致的[8]。實驗證明芍藥苷對于此類抑郁癥也有很好的效果。利血平作為一種降壓藥其副作用較大，主要是因其通過影響交感神經(jīng)末梢中去甲腎上腺素攝取進(jìn)入囊泡而致使其被單胺氧化酶降解，耗盡去甲腎上腺素的儲存，妨礙交感神經(jīng)沖動的傳遞，因而使血管舒張、血壓下降、心率減慢，達(dá)到降壓效果[9]。但其對中樞神經(jīng)的鎮(zhèn)靜和抑制作用使腦內(nèi)五羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、多巴胺（Dopamine，DA）、去甲腎上腺素（Norepinephrine，NE）等的含量出現(xiàn)異常從而導(dǎo)致抑郁樣情緒發(fā)生[10]。有研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷能夠有效改善利血平誘導(dǎo)的抑郁癥的大、小鼠行為學(xué)指標(biāo)，提高前額葉中5-HT、NE 的含量[11]。下丘腦-垂體-腎上腺素（HPA）軸是一個直接作用和反饋互動的復(fù)雜集合，是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的重要部分，參與控制應(yīng)激反應(yīng)，并調(diào)節(jié)許多身體活動，與情緒精神類疾病的發(fā)生密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)[12]芍藥苷可以通過減少皮質(zhì)醇分泌、降低海馬神經(jīng)元損傷來治療HPA軸亢進(jìn)型的抑郁癥。崔廣智[13]等發(fā)現(xiàn)芍藥苷不僅能改善HPA軸亢進(jìn)所致抑郁癥小鼠的行為學(xué)指標(biāo)還可以改善皮質(zhì)酮導(dǎo)致PC12損傷的抑郁癥細(xì)胞模型，且芍藥苷與陽性對照藥氯米帕明有同等治療作用，其可能機制多是神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用和對HPA軸的影響。李艷霞[14]等通過放射免疫法（RIA）測定血漿促腎上腺皮質(zhì)激素（Adrenocorticotropic Hormone，ACTH）、血漿皮質(zhì)醇（Cortisol，CORT）含量及下丘腦CRHmRNA 表達(dá)，證明了芍藥苷抗抑郁的機制是通過調(diào)節(jié)HPA 軸功能來實現(xiàn)的。劉洋[15]等研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷預(yù)處理對皮質(zhì)酮損傷的大鼠皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用與芍藥苷調(diào)控神經(jīng)元凋亡相關(guān)基因Bcl-2，Bax，Caspase-3 mRNA的表達(dá)直接有關(guān)，同時可能與上調(diào)神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF基因表達(dá)有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，很多應(yīng)激性刺激都會導(dǎo)致海馬區(qū)神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)量減少[16]。BDNF 是人腦中廣泛存在并分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)營養(yǎng)因子，以海馬和大腦皮質(zhì)的含量最高。眾多研究顯示抑郁障礙患者外周血中BDNF mRNA水平降低；同時抗抑郁治療后體內(nèi)BDNF水平明顯升高；同時動物實驗也證明抑郁癥等患者大腦中BDNF 的表達(dá)下調(diào)[17-21]。王加充[22]等發(fā)現(xiàn)芍藥苷能夠提高大鼠腦組織中神經(jīng)生長因子和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達(dá)量，其認(rèn)為這是芍藥苷發(fā)揮抗抑郁的機制之一。同時，實驗研究也表明5-HT與BDNF可調(diào)節(jié)突觸的可塑性、神經(jīng)發(fā)生及神經(jīng)元的存活，具有營養(yǎng)神經(jīng)的作用，且這兩個信號相互調(diào)節(jié)，5-HT 可刺激BDNF 的表達(dá)，BDNF 可增強5-HT 神經(jīng)元的生長和存活[23]，這也為抗抑郁藥物的有效性提供了科學(xué)依據(jù)。

3 芍藥苷在神經(jīng)損傷的抑郁癥中的作用研究

芍藥苷能夠通過保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞作用來達(dá)到抗抑郁的療效。目前抗抑郁藥五羥色胺再攝取抑制劑（SSRIs）和單胺氧化抑制劑需數(shù)周才能發(fā)揮抗抑郁的作用，且此類藥物能夠引起神經(jīng)可塑性以及轉(zhuǎn)錄和翻譯水平等改變。有研究確定氟西汀能夠改變大鼠后代的脂肪代謝異常[24,25]。芍藥苷能夠逆轉(zhuǎn)實驗動物大腦中與神經(jīng)、情緒相關(guān)的細(xì)胞數(shù)量、體積的減小[26]，具有抑制細(xì)胞凋亡、抑制鈣超載、促進(jìn)神經(jīng)生長、改善生理指標(biāo)等作用。

3.1 芍藥苷治療細(xì)胞過度氧化凋亡引起的抑郁癥作用研究

芍藥苷可抑制活性氧（ROS）/蛋白激酶Cδ（PCKδ）/NF-κB 信號通路，從而抑制6-羥基多巴胺（6-OHDA）誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡，增加谷胱甘肽（GSH）抗氧化能力。芍藥苷的抗氧化作用能夠降低腦內(nèi)與情緒精神相關(guān)的腦區(qū)丙二醛（MDA）含量，提高該區(qū)域的超氧化物歧化酶（SOD）含量，從而保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)如大腦皮層、海馬、紋狀體等[27]。孫蓉[28]等發(fā)現(xiàn)芍藥苷能通過改善自由基濃度和線粒體跨膜電位來減少細(xì)胞凋亡量。Dong H[29]等研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷治療腦梗塞也是通過抗氧化抑制細(xì)胞凋亡來實現(xiàn)的。此外，有研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷對于NO含量及NOS活性有雙重調(diào)節(jié)作用。在缺血性腦損傷中，腦皮質(zhì)層NO含量及NOS活性都會降低，而不同濃度的芍藥苷對于大腦皮層中NO含量和NOS活性影響不同，發(fā)揮的保護(hù)作用的強弱也不相同[30]。李偉[31]等發(fā)現(xiàn)芍藥苷可調(diào)節(jié)大鼠肝郁血虛模型中Glu 含量以及NR2A、GluR1、mGluR5 mRNA 的表達(dá)量。最近的研究發(fā)現(xiàn)，芍藥苷能夠治療創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙（PTSD），產(chǎn)生抗抑郁藥類似的作用，而其作用通路是KEAP1-NRF2/HO-1，運用此途徑來抵消H2O2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)[32]。此外，芍藥苷還可以通過抑制活性氧介導(dǎo)的pkcδ/nf-κb 通路抑制6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞凋亡。藥苷對PC12 細(xì)胞凋亡的抑制可能通過抑制活性氧簇（ROS）/pkcδ/nf-κb信號通路部分介導(dǎo)[33]。這一證據(jù)支持芍藥苷在治療與氧化應(yīng)激（包括PD）相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病方面的藥理學(xué)潛力。

3.2 芍藥苷治療鈣超載抑郁癥作用研究

楊軍[34]發(fā)現(xiàn)鈣超載損傷模型中芍藥苷組乳酸脫氫酶滲漏、鈣離子濃度都明顯減少，細(xì)胞存活率顯著提高，并且芍藥苷濃度越高效果越好。此外，楊軍等還做了NG108-15 神經(jīng)細(xì)胞的相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)芍藥苷能夠可逆性的抑制L 型Ca2+通道。且抑制作用與濃度相關(guān)。當(dāng)加入30 μM 的芍藥苷于細(xì)胞中時，可以減少細(xì)胞自發(fā)放電的頻率，輕微抑制電壓依賴性的Na+電流和延遲整流K+電流。證明了芍藥苷能夠保護(hù)鈣離子超載的PC12 損傷，且這種保護(hù)可能是通過調(diào)節(jié)L 型Ca2+通道實現(xiàn)的。Mao[35]等研究表明，芍藥苷預(yù)處理后，抑制細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞內(nèi)活性氧和丙二醛，增強超氧化物歧化酶活性，激活谷氨酸拮抗劑，升高細(xì)胞活力。芍藥苷預(yù)處理也逆轉(zhuǎn)了細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度升高，通過抑制線粒體凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bad、Bcl-2、Bcl-xl以及caspase-3和caspase-9的表達(dá)來減少谷氨酸在PC12細(xì)胞中的作用[36]。此外，宋春紅[37]等實驗也證實了白芍提取物能抑制KCl激活的L型鈣通道引起的細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的增加，調(diào)控細(xì)胞內(nèi)Cav1.2，抑制其下游CaM/CaMKⅡ信號通路的活化發(fā)揮治療PMS肝氣郁證的作用。

3.3 芍藥苷促進(jìn)神經(jīng)生長、改善生理指標(biāo)發(fā)揮其抗抑郁作用研究

芍藥苷對大腦皮層的神經(jīng)元有保護(hù)作用，吳玉梅[38]等體外培養(yǎng)胎鼠大腦皮層神經(jīng)元，發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)時間的增長，神經(jīng)細(xì)胞逐漸死亡，而芍藥苷干預(yù)組則可顯著增加神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)量，降低死亡率。Huang K S[39]等在體內(nèi)實驗中，將充滿芍藥提取物的硅膠管用于大鼠坐骨神經(jīng)10mm的神經(jīng)缺損的搭橋，8周后與對照組相比，坐骨神經(jīng)的再生速度、平均面積、有髓鞘軸突和血管的數(shù)量、神經(jīng)傳導(dǎo)速度均明顯升高。孫蓉[40]等利用局部腦缺血再灌注的大鼠模型來進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)芍藥苷組大鼠的行為學(xué)指標(biāo)和腦內(nèi)組織的含水量、血流量、血腦屏障通透性都有很大改善，組織病理學(xué)也有向好的改變。說明芍藥苷對腦缺血造成的神經(jīng)損傷、腦水腫、血腦屏障、大腦局部血流量等具有保護(hù)作用。劉天易[41]等用腦內(nèi)動脈栓塞的腦缺血大鼠模型，檢測大鼠伸舌、水迷宮移動、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和腦梗死面積。用芍藥苷大鼠皮下注射7天（10 mg·kg-1），發(fā)現(xiàn)皮下注射芍藥苷可以有效改善神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、減少腦梗死面積。也有研究表明，芍藥苷可以逆轉(zhuǎn)腦缺血再灌注損傷中撕裂元激活蛋白酶（p38MAPK）和Jc-Jun 氨基末端激酶（NK）表達(dá)增加、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）表達(dá)降低[42]。最近研究發(fā)現(xiàn)芍藥苷是通過活化腺苷A1受體來起作用的，芍藥總苷中部分成分能夠促進(jìn)其穿過血腦屏障，作用于腦缺血的部位[43]。抑郁癥患者的大腦前額皮質(zhì)區(qū)和海馬區(qū)灰質(zhì)體積均會減小，膝下扣帶回以及皮質(zhì)下海馬區(qū)和杏仁核也常常出現(xiàn)異常[44-47]，因此推論芍藥苷可以通過改善各項生理指標(biāo)，促進(jìn)神經(jīng)生長來達(dá)到抗抑郁效果。

4 芍藥苷對于其他類型抑郁癥作用研究

芍藥苷除了可以抗氧化、調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、改善各項生理指標(biāo)及逆轉(zhuǎn)神經(jīng)細(xì)胞變小減少以外，還能調(diào)節(jié)免疫、細(xì)胞炎性反應(yīng)及海人藻酸（KA）損傷引起的抑郁癥。徐潔虹等[48]體外實驗發(fā)現(xiàn)芍藥苷能有效抑制BV2 細(xì)胞TNF-α和NO 的產(chǎn)生以及BV2 細(xì)胞異常增加的吞噬功能，并且在此過程中IL-10-STAT3 信號通路被激活；芍藥苷的抑制作用在使用STAT3 抑制劑JSI-124后顯著降低，TNF-α和NO的表達(dá)量增加、BV2細(xì)胞的吞噬功能增強。結(jié)果表明，芍藥苷能有效抑制BV2細(xì)胞炎癥作用和吞噬作用，這一過程中依賴IL-10-STAT3信號通路的激活。其保護(hù)神經(jīng)元從而抗抑郁的作用可能與其抑制小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)有關(guān)。王傲雪[49]等通過分離健康人外周血T 淋巴細(xì)胞，以抗人CD3單克隆抗體與抗人CD28 單克隆抗體共同誘導(dǎo)T 淋巴細(xì)胞活化，檢測芍藥苷對T 淋巴細(xì)胞增殖、凋亡、CD25、CD69、NF-kB 及其上清中細(xì)胞因子IFN-γ/IL-4的影響。結(jié)果證明了芍藥苷呈濃度依賴性抑制T淋巴細(xì)胞增殖。此外，有研究對于三個腦區(qū)--mPFC、海馬和杏仁核的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行了免疫組織化學(xué)評估，發(fā)現(xiàn)芍藥苷可以逆轉(zhuǎn)IFN-δ處理小鼠中小膠質(zhì)細(xì)胞密度增加。證明了芍藥苷在炎性因子引起的抑郁癥方面有治療潛力[50]。張立才[51]等通過檢測脊髓中caspase-3、caspase-8、caspase-9、TLR4、MyD88、NF-kB、AP-1、Nrf-2、ARE 的mRNA 表達(dá)量以及HO-1、SOD、GSH-PX 的含量，血清中IL-6、TNF-α、IL-12的含量，證實了芍藥苷能夠通過抑制TLR4炎癥通路、增強Nrf2抗氧化應(yīng)激通路來減輕大鼠脊髓損傷、抑制細(xì)胞凋亡。劉玲[52]等通過實驗證明芍藥苷可抑制Aβ 25-35所誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞毒性和凋亡，其保護(hù)作用是通過上調(diào)Akt 磷酸化水平，增加Bcl-2 蛋白表達(dá)、降低Bax蛋白表達(dá)、抑制caspase-3等的激活而實現(xiàn)的；抑制劑LY294002可減弱上述芍藥苷的保護(hù)作用。吳玉梅[53]等通過神經(jīng)元細(xì)胞實驗，采用相差顯微鏡和免疫組化的方法觀察，發(fā)現(xiàn)芍藥苷可以提高神經(jīng)細(xì)胞的存活率；海人藻酸（KA）可以使神經(jīng)元細(xì)胞死亡率升高，但提前加入芍藥苷培養(yǎng)4 天的細(xì)胞可以對抗KA 所致的損傷。以上均說明了芍藥苷具有抑制細(xì)胞凋亡的作用。芍藥苷能顯著減弱6-ohda 誘導(dǎo)的核因子κB（NF-κB）易位，而不影響Akt、Jnk、p38和erk1/2的磷酸化。

5 探討與展望

綜上所述，芍藥苷的抗抑郁效果可能是通過提高5-HT、DA、NE、BDNF 等水平，抑制細(xì)胞凋亡、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、抗氧化、調(diào)節(jié)HPA 軸和促進(jìn)免疫細(xì)胞增值等方面來實現(xiàn)的。但是目前芍藥苷抗抑郁是通過調(diào)節(jié)5-HT、BDNF 產(chǎn)物本身表達(dá)水平下降還是通過影響轉(zhuǎn)運過程與受體作用過程達(dá)到的抗抑郁，其作用機制還尚無統(tǒng)一的研究結(jié)果。芍藥苷雖在動物、細(xì)胞等實驗中有不錯的抗抑郁效果，但離臨床應(yīng)用還有一定的距離，還需不斷完善，不斷探索，也希望芍藥苷能早日應(yīng)用于臨床，為抑郁癥患者提供幫助。