關(guān)于紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查的應(yīng)用與結(jié)果

褚慶萍

[摘要] 目的 通過實(shí)際調(diào)查，探究紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查在臨床輸血中的作用，并且避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。方法 首先選取2016年5月—2017年5月該院接收的220例住院申請(qǐng)中需要進(jìn)行輸血的患者，采取微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行患者紅細(xì)胞不規(guī)則陽性抗體篩查和鑒定，最后進(jìn)行交叉配血處理，分析患者紅細(xì)胞陽性檢出情況以及對(duì)臨床輸血的影響。結(jié)果 通過對(duì)比輸血之后的各項(xiàng)身體指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)在這220例患者當(dāng)中，有8例患者的檢測(cè)結(jié)果為不規(guī)則抗體陽性，陽性檢出率為3.6%，進(jìn)行不規(guī)則抗體血型檢測(cè)之后，發(fā)現(xiàn)220患者中有7例患者為RH，MNSs系統(tǒng)為2例，抗A1患1例。通過將8例不規(guī)則抗陽性標(biāo)本進(jìn)行交叉配血，發(fā)現(xiàn)供血者沒有產(chǎn)生相應(yīng)的抗原紅細(xì)胞，同時(shí)大大降低了溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生概率。結(jié)論 通過實(shí)際調(diào)查分析，在臨床輸血時(shí)進(jìn)行必要的不規(guī)則抗體篩查，可以有效避免患者體內(nèi)的溶血性輸血反應(yīng)，提高患者的臨床輸血效果，保證了臨床用血的安全，值得臨床推廣。

[關(guān)鍵詞] 紅細(xì)胞;不規(guī)則抗體;溶血性輸血反應(yīng)

[中圖分類號(hào)] R446? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）12（a）-0190-03

[Abstract]Objective To explore the role of irregular red blood cell antibody screening in clinical blood transfusion and to avoid hemolytic transfusion reaction through actual investigation. Methods First of all， we selected 220 patients who needed blood transfusion in the hospital from May 2016 to May 2017. We used microcolumn gel technology to screen and identify the irregular antibodies of red blood cells. Finally， cross matching therapy was used to analyze the positive situation of red blood cells and the influence on clinical transfusion. Results By comparing various physical indicators after blood transfusion， it was found that 8 cases of the 220 patients were positive for irregular antibodies， the positive detection rate was 3.6%. After irregular antibody blood group testing， 7 cases of the 220 patients were found to be RH， 2 cases were found to be MNSs system and 1 cases was found to be anti-A1. By cross matching 8 cases irregular anti-positive samples， it was found that the donor did not produce corresponding antigen red blood cells， and the probability of hemolytic transfusion reaction was greatly reduced. Conclusion Through actual investigation and analysis， the necessary irregular antibody screening in clinical blood transfusion can effectively avoid the hemolytic transfusion reaction in patients， improve the clinical transfusion effect and ensure the safety of clinical blood transfusion， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Erythrocyte; Irregular antibody; Hemolytic transfusion reaction

不規(guī)則抗體會(huì)引起輸血不良反應(yīng)，新生兒溶血病、疑難配型等疾病史是我國目前不規(guī)則抗體輸血不良反應(yīng)的主要原因之一。對(duì)于有輸血史、妊娠史或者短期內(nèi)需要接受多次輸血的患者來講，不規(guī)則抗體的檢測(cè)可以有效避免患者輸血中各種不良反應(yīng)的發(fā)生，保證了臨床用血的安全，特別是對(duì)于具有輸血史和妊娠史的患者來說，具有更加重要的臨床意義[1]。不規(guī)則抗體指的是具有ABO血型系統(tǒng)以外的所有紅細(xì)胞血型抗體，抗體主要包括了紅細(xì)胞同種抗體以及患者自身的抗體，這種抗體可以導(dǎo)致患者血型鑒定以及交叉配血的困難，進(jìn)而引起溶血性輸血反應(yīng)或者是新生兒溶血病，這種反應(yīng)嚴(yán)重危害了人們的身體健康，因此，在進(jìn)行輸血之前，相關(guān)醫(yī)護(hù)人員一定要對(duì)患者進(jìn)行不規(guī)則抗體的篩查，尤其是對(duì)于具有輸血史和妊娠史的患者來說，檢查一定要做到全面、嚴(yán)格，確保不出現(xiàn)紕漏[2]。該文于2016年5月—2017年5月方便選取220例患者，通過選擇抗原陰性交叉配血相結(jié)合的方式進(jìn)行紅細(xì)胞注射，可以很大程度上地避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生，確保患者輸血的安全。還可以提高患者的滿意程度，優(yōu)化治療效果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取在該院選擇臨床申請(qǐng)輸血的220例患者，在這220例，患者當(dāng)中有男性90例，女性130例，患者的年齡在20～30歲之間，患者所有的血液樣本均采用EDTA-k2進(jìn)行抗凝處理。患者的臨床資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可進(jìn)行研究。該研究所選病例是經(jīng)過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬是知情同意。

1.2? 選用儀器及試劑

該次實(shí)驗(yàn)的儀器儀器為源博生科YBXK-2A全自動(dòng)血庫系統(tǒng)?？贵w篩查紅細(xì)胞和光譜細(xì)胞均由江蘇力博提供，并且所有參與實(shí)驗(yàn)的紅細(xì)胞和光譜細(xì)胞均在有效期內(nèi)，抗A及抗B單克隆抗體由江蘇力博公司生產(chǎn)，且在有效期內(nèi)。凝聚胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供?？贵w篩查細(xì)胞由博迅生物醫(yī)藥有限責(zé)任公同提供，抗體篩查細(xì)胞主要由3個(gè)細(xì)胞組成，包括8個(gè)血型系統(tǒng)的19個(gè)抗原互補(bǔ)[3]。

1.3? 檢測(cè)及鑒定方法

對(duì)于不規(guī)則抗體的篩選，應(yīng)在YBXK-2AIgG卡的3個(gè)微柱孔中加入適量的0.8%抗體篩選細(xì)胞。每一抗體的篩選值為50 μL。然后在這些試劑中加入25 UL實(shí)驗(yàn)者的血漿。YBXK-2AIgG在37℃的孵化器中15 min后進(jìn)行最終測(cè)定[4]。如果最后的紅細(xì)胞全部沉在凝膠柱底部那么則表示最終的篩查結(jié)果為陰性，如果紅細(xì)胞聚集在凝膠柱的頂部則判斷為反應(yīng)為陽性。對(duì)于陽性的標(biāo)本來說，要對(duì)其進(jìn)行抗體鑒定。經(jīng)過多年臨床實(shí)踐，通常采用多種方法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，該篇文章提出的凝聚胺法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、省時(shí)，在基層醫(yī)院也很容易開展，這種凝聚胺胺法是近年來國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用的一種不規(guī)則抗體篩選方法[5]。微柱凝膠法的基本原理是人工調(diào)節(jié)凝膠間隙的大小，使凝膠間隙只能讓患者的游離紅細(xì)胞通過，使游離紅細(xì)胞從聚集的紅細(xì)胞中分離出來。微柱凝膠試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏，結(jié)果穩(wěn)定可靠，易于判斷[6]。適用于常規(guī)的不規(guī)則抗體篩選。需要指出的是篩選譜細(xì)胞不能包含全部抗原，相應(yīng)的針對(duì)某些低頻抗原的抗體不能被檢測(cè)到。因此，陰性不規(guī)則抗體篩查并不意味著根本不存在不規(guī)則抗體。因此，即使不規(guī)則抗體篩查為陰性，也必須采用一種能夠快速檢測(cè)不完全抗體的方法進(jìn)行交叉配血，以確保輸血安全。不規(guī)則抗體鑒定方法：采用光譜細(xì)胞鑒定不規(guī)則抗體陽性標(biāo)本。試驗(yàn)結(jié)束后，通過將試驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照樣品的細(xì)胞光譜進(jìn)行比較，確定特異性[7]。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

該次研究數(shù)據(jù)統(tǒng)一采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行計(jì)算，計(jì)量資料如平均年齡、神經(jīng)功能評(píng)分、巴士指數(shù)評(píng)分等用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以t進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料如滿意程度、并發(fā)癥發(fā)生概率等以[n（%）]表示，以χ2進(jìn)行檢驗(yàn)，將不同的治療組資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。等級(jí)資料采用軼和檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

在這220例標(biāo)本當(dāng)中，有8例為不規(guī)則抗陽性，陽性率為3.6%，對(duì)著8例進(jìn)行不規(guī)則抗體的鑒定，發(fā)現(xiàn)220患者中有7例患者為RH，MNSs系統(tǒng)為2例，抗A1患者1例，通過將8例不規(guī)則抗陽性標(biāo)本進(jìn)行交叉配血，發(fā)現(xiàn)供血者沒有產(chǎn)生相應(yīng)的抗原紅細(xì)胞，降低了溶血性輸血的發(fā)生概率。見表1。

3? 討論

紅細(xì)胞不規(guī)則抗體是指除ABO血型、抗A和抗B外的所有紅細(xì)胞血型抗體，這些抗體包括紅細(xì)胞同源抗體和自身抗體。在實(shí)驗(yàn)時(shí)間20～25 min時(shí)間，當(dāng)抗體用量是50 U，抗原用量是50 μL，當(dāng)4～6 min內(nèi)時(shí)，抗體用量是100 U，則抗原用量是50μL，在45～60 min之間時(shí)，抗體用量是100 U，則抗原用量是50 μL，在實(shí)驗(yàn)30～45 min時(shí)間內(nèi)，抗體用量是100 U，抗原用量是50 μL。紅細(xì)胞不規(guī)則抗體在血型鑒定和交叉配血過程中會(huì)產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)，這一現(xiàn)象的發(fā)生不僅影響了醫(yī)院對(duì)患者的治療效果，同時(shí)也嚴(yán)重威脅到患者的健康，在220例中，有8例為不規(guī)則抗陽性，陽性率為0.8%。在陳德娟等人[7]研究的《24例紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的結(jié)果分析》中，10 736例受血者中共檢查出24例抗體陽性，陽性率為0.22%。著8例進(jìn)行不規(guī)則抗體的鑒定，發(fā)現(xiàn)220患者中有7例患者為RH，MNSs系統(tǒng)為2例，抗A1患者1例。

自身抗體一直是臨床輸血中的一大難題。這是由于自身抗體可掩蓋同種抗體，且對(duì)自身免疫性疾病的診斷有重要參考意義。嚴(yán)格意義上來講，自身抗體并不屬于不規(guī)則抗體，但自身抗體可影響交叉配血及其血型鑒定，極易產(chǎn)生不規(guī)則的抗體，且產(chǎn)婦不規(guī)則抗體可預(yù)測(cè)ABO系統(tǒng)外的新生兒溶血病。21例來自血液內(nèi)科，該科室的患者主要為血液疾病患者，需要長期及反復(fù)輸血，極易產(chǎn)生免疫性同體抗體或者形成自身抗體。因此，這就要求在輸血前應(yīng)進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查，對(duì)輸血量及輸血次數(shù)給予嚴(yán)格把握，最大限度減少不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，最終保證臨床輸血的安全性。

由于目前對(duì)紅細(xì)胞的正常存在并無一般的規(guī)律，所以在正常情況下，人血液中不會(huì)有不規(guī)則抗體，人體內(nèi)的不規(guī)則抗體通常是通過輸血或妊娠期接觸抗原紅細(xì)胞后產(chǎn)生的。根據(jù)人體的外部反應(yīng)機(jī)制，患者的緊急反應(yīng)是次要反應(yīng)的原則。當(dāng)患者的身體第一次接觸到外來抗原時(shí)，反應(yīng)會(huì)經(jīng)歷數(shù)天的潛伏期。當(dāng)特異性抗體出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)答會(huì)逐漸增加，大約兩周后達(dá)到峰值，經(jīng)過一段時(shí)間，這種應(yīng)答將逐漸衰落。如果在這個(gè)階段沒有給予抗原刺激，那么人體中的抗體將不會(huì)被測(cè)試出來。

不規(guī)則抗體作為ABO血型以外的抗體，目前臨床發(fā)病率不高。其主要原因可能與醫(yī)院的患者構(gòu)成有關(guān)。目前，輸血的主要原因外傷引起的，如創(chuàng)傷、血液病等的反復(fù)輸血患者較少。不規(guī)則抗體的發(fā)生通常與懷孕或輸血史有關(guān)，這可能是導(dǎo)致不規(guī)則抗體的發(fā)生率低的原因之一。然而，不規(guī)則抗體在臨床輸血治療中扮演著重要的角色，它是導(dǎo)致輸血配型不匹配或無效輸血的重要原因。目前，由于提高了血型檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和交叉配血的復(fù)檢，使得由于血型不合引起的輸血反應(yīng)大大減少。但當(dāng)患者體內(nèi)出現(xiàn)不規(guī)則抗體時(shí)，會(huì)使得血液配血工作更加困難，進(jìn)而導(dǎo)致患者的臨床出血時(shí)間延長，搶救時(shí)間延長，給檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)生帶來了諸多麻煩，其原因有二，①當(dāng)不規(guī)則抗體呈陽性時(shí)，當(dāng)獻(xiàn)血者的抗體不清楚時(shí)，匹配需要盲匹配。也就是說由于多個(gè)獻(xiàn)血者同時(shí)進(jìn)行交叉配血，在一定程度上增加了交叉配血的時(shí)間，延誤了輸血治療的時(shí)機(jī)，降低了患者的治療效果。②小型輸血科或血庫血容量不足，難以通過盲配的方式為患者選擇合適的血液，對(duì)患者的生命健康構(gòu)成了極大的威脅。因此，在輸血前檢測(cè)到不規(guī)則抗體尤為重要。通過對(duì)患者體內(nèi)不規(guī)則抗體的檢測(cè)，為可能需要輸血治療的患者準(zhǔn)備手術(shù)用血，尋找合適的血源，極大地減少了臨時(shí)申請(qǐng)輸血時(shí)不規(guī)則抗體引起的配血不合。

抗人球蛋白試驗(yàn)是檢測(cè)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的一種經(jīng)典方法。但由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間長，不宜進(jìn)行急癥試驗(yàn)，所以只能用于日常工作的篩選。凝聚胺法具有靈敏度高、價(jià)格低廉、操作快速、操作簡(jiǎn)單、方便等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)血型抗體的敏感性優(yōu)于傳統(tǒng)鹽水法。此外，微柱凝膠法干擾因素少，操作方法簡(jiǎn)單，操作方便，易于判斷，存儲(chǔ)時(shí)間長。微陣列的劑量更小，并且可以檢測(cè)出樣本的數(shù)量。治療效果好，但這種方法需要專門的離心機(jī)和培養(yǎng)箱。價(jià)格較高，成本較其他兩種方法高。

在該臨床研究中，不規(guī)則抗體檢出率為3.6%，陽性率不高。但一旦陽性抗體導(dǎo)入到相應(yīng)抗原的患者體內(nèi)，在各種反應(yīng)的刺激下，就會(huì)發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)。因此，當(dāng)不規(guī)則抗體呈陽性時(shí)，有必要證明樣本為不規(guī)則抗體。為了實(shí)現(xiàn)安全輸血的目標(biāo)，在輸注相應(yīng)的無抗原紅細(xì)胞之前，應(yīng)進(jìn)一步鑒定抗體并確定其特異性。在該次臨床試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，最容易產(chǎn)生不規(guī)則抗體的是Rh系統(tǒng)，因此在篩查時(shí)應(yīng)該密切關(guān)注這部分患者。

此外，孕婦在懷孕期間，抗體的產(chǎn)生與免疫成分的產(chǎn)生是分不開的。對(duì)于產(chǎn)科抗體陽性的孕婦，可以結(jié)合其實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)和患者的身體狀況，對(duì)患者進(jìn)行儲(chǔ)存式自體輸血[7]。這種方法不僅可以解決輸血問題，而且可以保護(hù)患者，在一定程度上保證了孕婦的安全性，同時(shí)也可以使家屬和孕婦醫(yī)生更加放心。通過實(shí)際調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在骨科、腫瘤科和血液科中不規(guī)則抗體的比例緊隨其后。這是因?yàn)檫@些部門的患者是特殊的，經(jīng)常需要多次輸血，所有抗體陽性的患者都要接受1次或1次以上輸血。因此，在臨床輸血治療中，醫(yī)生應(yīng)嚴(yán)格掌握輸血適應(yīng)證，盡量減少不合理的輸血，減少同源抗體的發(fā)生。Rh血型系統(tǒng)是目前最復(fù)雜的血型系統(tǒng)。其在臨床輸血中的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，可導(dǎo)致新生兒嚴(yán)重的輸血反應(yīng)或溶血性疾病。因此，在檢測(cè)過程中，應(yīng)事先對(duì)新生兒的母親進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測(cè)，在診斷新生兒溶血時(shí)，應(yīng)考慮到由不規(guī)則抗體引起溶血的可能性，以確保臨床醫(yī)生能夠及時(shí)制定診斷和治療計(jì)劃，并確保醫(yī)院能夠?yàn)閮和粨Q血液，常規(guī)抗體檢測(cè)在產(chǎn)科孕婦或產(chǎn)婦中具有重要意義，由于產(chǎn)科孕婦將在孕期接受孕期檢查，因此在孕期檢查的早期階段進(jìn)行抗體篩查是必要的。做好孕期異?？贵w陽性孕婦分娩前的準(zhǔn)備，最后，根據(jù)評(píng)價(jià)結(jié)果，應(yīng)事先進(jìn)行血液配制或選擇適當(dāng)?shù)淖泽w輸血方法，以最大限度地避免由于特殊情況造成的延誤治療。同時(shí)，新生兒生來就帶有臍帶血，為檢測(cè)新生兒溶血性疾病，應(yīng)該實(shí)現(xiàn)早期新生兒生命體征診斷。

臨床輸血前對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行常規(guī)篩查和鑒定，可明顯縮短重復(fù)交叉配血的時(shí)間和經(jīng)濟(jì)性，防止患者在急診配血中被發(fā)現(xiàn)，從而延誤了對(duì)患者的治療，提供了不相容的檢出率，避免漏檢，不僅保證了患者的生命安全用血的安全性。確?；颊叩玫郊皶r(shí)的血液治療。經(jīng)臨床研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞的不規(guī)則抗體篩選有助于早期發(fā)現(xiàn)和確定具有臨床意義的抗體，便于抗體陽性患者提前準(zhǔn)備配血，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。此外，不規(guī)則抗體篩選具有操作簡(jiǎn)便、快速、易行等優(yōu)點(diǎn)，值得臨床推廣應(yīng)用。

綜上所述，為了保證實(shí)驗(yàn)室臨床輸血的安全性，醫(yī)院應(yīng)該根據(jù)自身的實(shí)際情況，選擇合適的輸血方法，避免溶血性輸血反應(yīng)等嚴(yán)重事件的發(fā)生。

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（收稿日期：2019-09-05）