熊果酸調(diào)控細(xì)胞因子法治療炎癥疾病的臨床觀察※

陳維維 張小莉

（河南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046）

熊果酸 (ursolic acid，3-hydroxy-12-urs-12-en-28-oic acid，UA)的分子式為 C30H48O3，相對分子量為 456，是從眾多中草藥、食物和其他植物中提取的五環(huán)三萜類化合物［1-2］，療效廣泛、作用安全、毒副作用非常小。研究發(fā)現(xiàn)熊果酸有著廣泛的生物學(xué)活性和開發(fā)應(yīng)用前景，包括抗炎與抗氧化作用、抗癌、降血壓、降糖、鎮(zhèn)靜、保肝、免疫調(diào)節(jié)等作用［3-4］。近年來熊果酸開始廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和美容護(hù)膚領(lǐng)域，同時因?yàn)槠渫ㄟ^對炎癥因子的調(diào)控，有著良好的抗炎作用，有望成為各種炎癥反應(yīng)性疾病的治療新藥。細(xì)胞因子作為免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)者和炎癥反應(yīng)的中介者，在很多常見疾病中都扮演著重要的角色。本文將綜述熊果酸對典型細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制，更好地了解炎癥疾病的發(fā)生機(jī)制和發(fā)展方向，從整體上探討機(jī)體的免疫狀態(tài)，為熊果酸類抗炎新藥的研發(fā)提供理論指導(dǎo)。

1 IFN-γ

IFN-γ是主要由Th1細(xì)胞分泌的糖蛋白，在感染早期宿主的防御階段 NK細(xì)胞也可分泌少量 IFN-γ［5］。它是機(jī)體非常重要的免疫調(diào)節(jié)炎癥因子，也是唯一的Ⅱ型干擾素，主要參與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。IFN-γ可以激活抗原提呈細(xì)胞殺傷活性，增強(qiáng)中性粒細(xì)胞功能，從而產(chǎn)生促炎作用［6］。同時 IFN-γ具有高度的特異性，能激活巨噬細(xì)胞并促進(jìn)其活性，促進(jìn)多種細(xì)胞表達(dá)MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子，在抗胞內(nèi)病原體感染中發(fā)揮重大作用。

胡志芳等［7］通過分離培養(yǎng)人體外周血單個核細(xì)胞，加入熊果酸藥物干預(yù)后，用ELISA檢測細(xì)胞因子發(fā)現(xiàn)熊果酸對植物血凝素 (PHA)刺激的正常人外周血單個核細(xì)胞分泌的IFN-γ有抑制作用，并與濃度呈正相關(guān)，濃度越高，產(chǎn)生的抑制作用也越強(qiáng)。Chen等［8］實(shí)驗(yàn)研究表明含有熊果酸的茵梔黃注射液能夠有效抑制T細(xì)胞的增殖活化，同時在低濃度水平可以降低細(xì)胞因子IL-1、IL-6、TNF-α的表達(dá)量，與濃度高低呈正相關(guān)。董興高等［9］認(rèn)為熊果酸能夠通過抑制 p38MAPK的活化對IFN-γ和IL-2在轉(zhuǎn)錄和/或轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮抑制作用。生理?xiàng)l件下，關(guān)節(jié)滑液中一般能檢測到極少量的 IFN-γ，但是病理?xiàng)l件下，關(guān)節(jié)滑液及血清中IFN-γ的表達(dá)升高，炎癥反應(yīng)程度跟 IFN-γ 的表達(dá)量呈正相關(guān)［10］。同時有研究［11］發(fā)現(xiàn)IFN-γ基因的小鼠關(guān)節(jié)炎癥狀比正常小鼠恢復(fù)的要快。Ahmad等［12］研究發(fā)現(xiàn)熊果酸可以抑制小鼠外周血細(xì)胞因子TNF-α和IFN-γ的產(chǎn)生，有效改善小鼠關(guān)節(jié)炎。

2 TGF-β1

轉(zhuǎn) 化 生 長 因 子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是由骨細(xì)胞、T細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌的一種活性多肽，其生物學(xué)作用廣泛，包括抗炎、促纖維化、促炎作用，促進(jìn)細(xì)胞的生長分化，免疫調(diào)節(jié)，抑制淋巴細(xì)胞的分化以及某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生，促進(jìn)組織修復(fù)，同時在肝、肺、腎等臟器的纖維化病理過程中也發(fā)揮著重要作用［13］。有研究發(fā)現(xiàn)，Th2細(xì)胞在TGF-β1細(xì)胞因子作用下存活時間延長，釋放的炎癥因子也隨著增多，同時加劇炎癥反應(yīng)，在哮喘發(fā)病過程中導(dǎo)致氣道重塑［14］。

張揚(yáng)武等［15］實(shí)驗(yàn)體外培養(yǎng)肝星狀細(xì)胞-T6 (hepatic stellate cell-T6，HSC-T6)，用藥物干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，熊果酸通過上調(diào)過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ， PPAR-γ) 的表達(dá)， 下調(diào)TGF-β1的表達(dá)，從而抑制 HSC-T6細(xì)胞的增殖，降解細(xì)胞外基質(zhì) (extracellular matrix，ECM)的沉積，達(dá)到抗肝纖維化的目的。Murakami等［16］研究也證實(shí)熊果酸有抑制TGF-β1與受體結(jié)合、降低其mRNA及蛋白的表達(dá)的作用。在腎臟疾病方面，Yoshimura等［17］通過研究民間長期應(yīng)用治療腎臟疾病的中草藥，發(fā)現(xiàn)熊果酸能夠抑制小鼠成纖維細(xì)胞表達(dá)的TGF-β1與受體的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)其保護(hù)腎臟的作用。林志民等［18］采用熊果酸含藥血清干預(yù)，模擬藥物在體內(nèi)的過程，發(fā)現(xiàn)在基因水平下 TGF-β1的表達(dá)受熊果酸含藥血清量的大小的調(diào)控，劑量越大抑制作用越明顯，在此基礎(chǔ)上干預(yù)腎小球系膜細(xì)胞的增生，改善炎癥狀態(tài)下腎小球的損害。

3 IL-10

白細(xì)胞介素 (IL)-10是一種主要由 Th2細(xì)胞分泌的多功能抑制性調(diào)節(jié)因子，能夠發(fā)揮下調(diào)炎癥反應(yīng)、拮抗炎性介質(zhì)的作用。同時單核巨噬細(xì)胞、Th0細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞也能分泌少量的IL-10［19-20］。在機(jī)體自我免疫調(diào)節(jié)中，IL-10可以減少白細(xì)胞的黏附浸潤，促進(jìn)組織的修復(fù)再生［21］，主要是通過降低 TNF-α、IL-1β等炎性細(xì)胞因子的表達(dá)和減少趨化因子的產(chǎn)生實(shí)現(xiàn)的。

劉雁飛等［22］通過對角叉菜膠誘導(dǎo)的慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠進(jìn)行熊果酸藥物灌胃，摘眼球取血后分離血清，用 ELISA方法檢測血清中 IL-10的 TNF-α、IL-1β和 IL-10表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)熊果酸組 IL-10、TNF-α和 IL-1β的含量明顯低于模型組，說明熊果酸可能通過調(diào)控細(xì)胞因子來起到改善大鼠前列腺炎的癥狀的作用。另外研究發(fā)現(xiàn)［23］，熊果酸能夠上調(diào)腸系膜缺血再灌注損傷大鼠模型腸系膜組織中 IL-10的表達(dá)，抑制TNF-α等其他促炎細(xì)胞因子的表達(dá)，表明熊果酸通過調(diào)控細(xì)胞因子的表達(dá)來抑制氧化應(yīng)激損傷與炎癥反應(yīng)，對大鼠腸系膜缺血再灌注所引發(fā)的炎癥反應(yīng)具較為理想的緩解作用，改善腸組織病變。

4 IL-6

白細(xì)胞介素 (IL)-6是一類由巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和活化的T淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子，是機(jī)體感染后最早出現(xiàn)的炎性指標(biāo)，過度分泌的IL-6可刺激B淋巴細(xì)胞合成自身抗體，同時也會誘導(dǎo) IFN-γ、IL-4分泌的異常，增強(qiáng)它們的炎性作用［24-25］。IL-6能夠活化免疫細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，激活T細(xì)胞使細(xì)胞發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，并在細(xì)胞生成和防御調(diào)節(jié)等扮演著重要的角色，但是IL-6的過度表達(dá)會導(dǎo)致急性炎癥引發(fā)機(jī)體多種疾?。?6］。

在脂肪性肝炎發(fā)展過程中，TNF-α和IL-6是疾病發(fā)展的關(guān)鍵性細(xì)胞因子，在患者血清中表達(dá)增高，引起氧化應(yīng)激反應(yīng)和脂質(zhì)過氧化，最終導(dǎo)致肝臟炎癥、纖維化甚至壞死。曾璐等［27］通過預(yù)防給藥和治療給藥兩種方式作用于肝細(xì)胞脂肪變形模型，發(fā)現(xiàn)熊果酸能夠減少TNF-α和IL-6的分泌，同時顯著降低肝脂肪變性細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量和甘油三酯的含量，發(fā)揮良好的抗炎作用，有效抑制脂肪性肝炎的發(fā)展。也有實(shí)驗(yàn)通過體外培養(yǎng)脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)作用下的人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞，熊果酸藥物干預(yù)后檢測發(fā)現(xiàn)IL-6等炎性反應(yīng)因子在mRNA和蛋白水平均有所降低［28］，說明熊果酸能減輕LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞的損傷。

過去實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)心臟缺血再灌注損傷重要發(fā)病原因之一是促炎細(xì)胞因子 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 的高表達(dá)［29］，抑制相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)可以有效控制炎癥反應(yīng)和延緩心肌細(xì)胞的凋亡，改善心臟功能，降低心肌梗死的發(fā)生率。簡磊等［30］用鏈脲佐菌素腹腔注射誘導(dǎo)出糖尿病大鼠模型，在此基礎(chǔ)上結(jié)扎冠狀動脈左前降支構(gòu)建心臟缺血再灌注損傷模型，灌胃30 d后取材檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過熊果酸處理后的大鼠血清中 IL-6、IL-1β和 TNF-α的表達(dá)量減少，提示熊果酸對糖尿病大鼠模型前提下心肌缺血再灌注損傷誘發(fā)的炎癥反應(yīng)有一定的改善作用。

眾多動物及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究表明，熊果酸作為一種天然的安全、毒副作用小的中草藥成分，能夠有效調(diào)控促炎或抗炎細(xì)胞因子的表達(dá)。通過這一方式，熊果酸能夠充分發(fā)揮其獨(dú)特的藥理作用，達(dá)到預(yù)防和控制炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展的目的，對機(jī)體其他臟器組織如關(guān)節(jié)、心臟、肝臟和腎臟等疾病的發(fā)展甚至某些免疫性疾病起到一定的治療作用。熊果酸將成為預(yù)防和治療炎癥及炎癥誘發(fā)的其他相關(guān)疾病的一個重要靶點(diǎn)。