齊齊哈爾地區(qū)赤芍及蒼術(shù)仿野生栽培試驗(yàn)及質(zhì)量評(píng)價(jià)

張宏蓮 孫輯凱 李宏鈴 劉玉露

1.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院； 2.哈爾濱市第一?？漆t(yī)院

引言：赤芍是一種多年生草本植物，分布于俄羅斯、中國(guó)等地作為傳統(tǒng)常用中藥之一[1,2]。2015年版《中國(guó)藥典》規(guī)定赤芍來(lái)源于毛茛科植物芍藥（Paeonia lactiflora Pall.）或川赤芍（Paeonia veitchii Lynch.）的干燥根[3]，以內(nèi)蒙古多倫縣出產(chǎn)“多倫赤芍”為道地藥材，目前，野生芍藥的野生資源在逐漸減少。

蒼術(shù)是一種應(yīng)用十分廣泛的傳統(tǒng)中藥，北蒼術(shù)（Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.）是其來(lái)源之一，[3]主要產(chǎn)自內(nèi)蒙古自治區(qū)東北部、山西省以及東北三省，[4,5]隨著市場(chǎng)需求的增多，野生蒼術(shù)資源逐漸匱乏。仿野生種植是解決市場(chǎng)窘境的有效途徑，但是，仿野生品的質(zhì)量有待于借助實(shí)驗(yàn)手段予以評(píng)價(jià)。[4,5]

黑龍江省齊齊哈爾市毗鄰內(nèi)蒙古，氣候及環(huán)境與內(nèi)蒙古相近，具備赤芍人工種植及栽培的仿野生環(huán)境。本研究在仿野生環(huán)境條件下，對(duì)赤芍及蒼術(shù)進(jìn)行人工生產(chǎn)，研究適用于齊齊哈爾區(qū)域的仿野生栽培技術(shù)，并通過(guò)必要的成分分析進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，以期農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、增產(chǎn)、可持續(xù)發(fā)展提供技術(shù)支撐。

一、仿野生試驗(yàn)室（田）概括

室外仿野生環(huán)境為齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院藥用植物園，土壤為沙壤土。

二、材料與方法

（一）實(shí)驗(yàn)材料

儀器：Waters E2695高效液相色譜儀、MDF-492超低溫冰箱、高速多功能粉碎機(jī)、PALL水純化系統(tǒng)、ML203T/02十萬(wàn)級(jí)電子天平。

試劑和藥材：，甲醇（色譜級(jí)）、磷酸二氫鉀、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸，均為分析純。

實(shí)驗(yàn)樣品：栽培品經(jīng)鑒定為赤芍及蒼術(shù)；分別標(biāo)記為CS、CZ。

對(duì)照品：芍藥苷及蒼術(shù)素（中國(guó)食品藥品檢定研究院）。

（二）栽培品的移栽及采收

赤芍：于4～5月間，畦面順向開淺溝，溝深5～7cm，將室內(nèi)出芽的野生赤芍根芽移栽至室外仿野生試驗(yàn)田中，按株距30cm栽種，芽朝上，用少量土固定芽頭，再用腐熟餅肥或有機(jī)肥料施入溝內(nèi)，覆土后稍壓即可。于移栽后第三年的秋季采收栽培品，晾干后保存在-80℃條件下。

蒼術(shù)：于秋季9月移栽至林蔭地，剔除殘次的幼苗，畦中間高兩邊低，一端預(yù)留出移栽槽，寬約15～20cm，深度根據(jù)種苗根長(zhǎng)，頂芽向上擺在移栽槽中，株距約15～20cm，覆土約5cm，行距保持35～40cm。

（三）色譜條件

赤芍栽培品的檢測(cè)條件：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱（250×9.4mm，5μm）；以甲醇-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀溶液（50：50）為流動(dòng)相，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，進(jìn)樣量：10 μl。待檢樣品的制備：以甲醇為溶劑，制成0.50 mg·ml-1的芍藥苷對(duì)照液，備用；分別精密稱取赤芍栽培品粉末約0.5g，兩份，精密加甲醇25ml，浸泡4h后超聲音處理，放冷，補(bǔ)齊失重，搖勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液備用。

蒼術(shù)栽培品的檢測(cè)條件：Diamonsil C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μl）；流動(dòng)相甲醇：水=（79：21）等度洗脫；流量1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)340nm；進(jìn)樣量20μl。待檢樣品的制備：以甲醇為溶劑，制得20mg·ml-1的蒼術(shù)素對(duì)照液；取蒼術(shù)栽培品，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)三號(hào)篩，精密稱取0.2g，置具塞錐形瓶中，精密量取甲醇50ml加入錐形瓶，用封口膜密封后，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40KHz）1h，取出錐形瓶冷卻至室溫后，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足缺失的重量，搖勻后，經(jīng)0.45μm過(guò)濾膜后，取續(xù)濾液備用。

（四）數(shù)據(jù)處理

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（一）室外栽培品的性狀

三年生的赤芍栽培品植株高度約70cm，葉互生，葉片近革質(zhì)，有柄，長(zhǎng)約6cm，小葉為長(zhǎng)圓形、橢圓形，先端漸尖基部楔形，綠色，無(wú)毛；花，頂生，大形，花梗長(zhǎng)，無(wú)毛，生葉狀苞片，萼片3～5，倒卵形，綠色；花瓣粉紅色，倒卵形，雄蕊多數(shù)，花藥黃色，根紡錘狀或圓柱狀肥大，紅褐色，折斷面粉白色。

蒼術(shù)栽培品莖直立，單生或少數(shù)莖成簇生，基部葉花期脫落；中下部莖葉幾無(wú)柄，倒卵形，中部以上或僅上部莖葉不分裂，倒長(zhǎng)卵形，全部葉硬紙質(zhì)，兩面綠色，無(wú)毛，邊緣或裂片邊緣有針刺狀緣毛或者重刺齒。頭狀花序單生莖枝頂端，總苞鐘狀，苞葉針刺狀羽狀全裂或深裂。小花白色，瘦果，被稠密的順向貼伏的白色長(zhǎng)直毛，冠毛剛毛褐色或污白色。

（二）指標(biāo)成分的含量測(cè)定

經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)定，基線平穩(wěn)，三年生赤芍栽培品含有芍藥苷為6.5%，符合法定藥品要求。

經(jīng)過(guò)HPLC測(cè)定，基線平穩(wěn)，三年生蒼術(shù)栽培品含有蒼術(shù)素為0.68%，符合法定藥品要求。

結(jié)論：本研究在室外的仿野生環(huán)境條件下，栽培赤芍、蒼術(shù)，通過(guò)測(cè)定栽培品中的指標(biāo)成分，符合法定標(biāo)準(zhǔn)，表明齊齊哈爾地區(qū)栽培赤芍、蒼術(shù)具有一定的可行性，期待擴(kuò)大規(guī)模，進(jìn)一步規(guī)范仿野生栽培技術(shù)，以指導(dǎo)本區(qū)域農(nóng)民種植，實(shí)現(xiàn)保質(zhì)增產(chǎn)和創(chuàng)收。