麻醉劑MS-222對運(yùn)輸脅迫黃顙魚抗氧化系統(tǒng)的影響

劉陽 賈貴芳 楊飛

摘 要：為探討MS-222在魚類運(yùn)輸應(yīng)激研究中的應(yīng)用，以黃顙魚為對象，研究麻醉劑MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織抗氧化系統(tǒng)的影響。結(jié)果顯示：在運(yùn)輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理超氧化物歧化酶（SOD）活性均低于空白對照，丙二醛（MDA）活性總體呈先降低后穩(wěn)定的趨勢，過氧化氫酶（CAT）和還原型谷胱甘肽（GSH）活性均顯著高于空白對照。

關(guān)鍵詞：黃顙魚;運(yùn)輸應(yīng)激;MS-222;生理生化

中圖分類號 S942.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A文章編號 1007-7731（2021）05-0067-02

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）又名黃沙古、黃姑子、黃角丁等，隸屬于鯰形目（Siluriformes）鲿科（Bagridae）黃顙魚屬（Pelteobagrus），是一種常見的小型淡水經(jīng)濟(jì)魚類[1]。因其肉質(zhì)富含氨基酸，口味鮮美，營養(yǎng)價(jià)值高，無肌間刺，具有藥用價(jià)值和滋補(bǔ)作用，深受大眾的喜愛[2]。然而魚體死亡或受傷后會導(dǎo)致其營養(yǎng)價(jià)值大大降低。運(yùn)輸是水產(chǎn)品從漁場到餐桌的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，運(yùn)輸過程中的環(huán)境變化如氨氮升高、震蕩顛簸、空間狹小、溶解氧不足等因素，均會影響魚體應(yīng)激，影響商品魚的品質(zhì)及外觀，甚至引起死亡，從而導(dǎo)致漁民的經(jīng)濟(jì)損失[3]。

麻醉劑具有使機(jī)體局部失去知覺的作用，能夠麻痹、鎮(zhèn)定魚體，使其減少活動，目前在水產(chǎn)運(yùn)輸、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[4]。間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽簡稱MS-222，又名魚安定、魚安保等[5]，是一種在漁用上常用的麻醉劑，既安全，效果又理想，在全世界應(yīng)用廣泛[6]。MS-222常采用藥液浸泡的方式使用。目前，國內(nèi)外學(xué)者在MS-222對鱖魚[7]、尼羅羅非魚[8]、大黃魚[9]、真鯛[10]、半滑舌鰨[11]等的麻醉方面均有研究，但對黃顙魚的麻醉運(yùn)輸研究較少。本試驗(yàn)旨在探討MS-222對黃顙魚運(yùn)輸過程中的生理生化指標(biāo)的影響，以進(jìn)一步了解麻醉劑在黃顙魚運(yùn)輸應(yīng)激過程中的影響及作用機(jī)制，為調(diào)節(jié)運(yùn)輸應(yīng)激提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)黃顙魚購自貴州省銅仁市石阡縣黃顙魚養(yǎng)殖場，體長（16.30±0.25）cm，體重（92.80±0.10）g，用曝氣48h以上的自來水在溫度（20±2）℃、pH7.8±0.2的條件下于實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)，置于自然光照下，游動活潑，體色亮澤，無疾病，無畸形。

1.2 試驗(yàn)方法 采用常規(guī)運(yùn)輸辦法進(jìn)行試驗(yàn)。首先在漁用運(yùn)輸塑料袋中裝入8L曝氣水，每個(gè)運(yùn)輸袋隨機(jī)選取20尾放入其中，待魚體穩(wěn)定后加入MS-222。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)濃度處理和1個(gè)空白對照，MS-222的試驗(yàn)濃度分別7、14、21mg/L。每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。隨后充入氧氣并捆好口袋，將充好氧氣的運(yùn)輸袋整齊嚴(yán)實(shí)擺放在汽車后備箱中開始運(yùn)輸4h。于運(yùn)輸結(jié)束后的第0、2、4、8h每處理隨機(jī)取出3條試驗(yàn)魚，解剖，取其肝臟，在預(yù)冷的磷酸鹽緩沖溶液中漂洗后，濾紙擦干，準(zhǔn)確稱重，按1∶9（組織重量）加入預(yù)冷的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）（0.1mol/L，pH7.2），冰浴勻漿，將制備好的勻漿液放入冷凍離心機(jī)中冷凍離心15min（溫度4℃，轉(zhuǎn)速3000r/min），取上清液保存。樣品蛋白質(zhì)含量測定采用考馬斯亮藍(lán)法，嚴(yán)格按照試劑盒說明書（南京建成生物工程研究所）操作測定SOD、MDA、GSH、CAT。

1.3 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)處理采用Excel 2007和SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，用平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，并進(jìn)行t檢驗(yàn)和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織SOD酶活性的影響 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織SOD活性的影響如圖1所示。由圖1可知，在運(yùn)輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理SOD活性均低于空白對照。隨著運(yùn)輸后取樣時(shí)間的增加，不同濃度的處理SOD活性總體呈降低趨勢，且差異顯著。

2.2 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織MDA酶活性的影響 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織MDA活性的影響如圖2所示。由圖2可知，在運(yùn)輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理MDA活性顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運(yùn)輸后取樣時(shí)間的增加，不同濃度處理的MDA活性總體呈先降低后穩(wěn)定的趨勢，且差異顯著。

2.3 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織CAT酶活性的影響 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織CAT活性的影響如圖3所示。由圖3可知，在運(yùn)輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理CAT活性均顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運(yùn)輸后取樣時(shí)間的增加，不同濃度處理的CAT活性總體變化不大。在相同的取樣時(shí)間下，隨著MS-222處理濃度的增加，CAT活性總體表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，且差異顯著。

2.4 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織GSH酶活性的影響 MS-222對運(yùn)輸應(yīng)激下黃顙魚肝組織GSH活性的影響如圖4所示。由圖4可知，在運(yùn)輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理GSH活性均顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運(yùn)輸后取樣時(shí)間的增加，7、14、21mg/L的處理GSH活性總體呈下降趨勢，且差異顯著。

3 結(jié)論與討論

運(yùn)輸應(yīng)激會使魚體在此脅迫過程中產(chǎn)生自我防御體系，以抵抗外界環(huán)境帶來的各種刺激，該反應(yīng)屬于急性應(yīng)激，在穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)處于動態(tài)平衡。但有研究表明，運(yùn)輸會破換魚體的抗氧化酶活性，導(dǎo)致免疫力降低[12]，鯽魚經(jīng)過震蕩后測定其血清中的皮質(zhì)醇含量，結(jié)果顯著高于對照組，水平顯著高于正常組[13]。

SOD、MDA、GSH、CAT都是重要的抗氧化指標(biāo)，在魚類應(yīng)激中應(yīng)用廣泛。本試驗(yàn)通過利用麻醉劑MS-222降低黃顙魚活動力度，以降低運(yùn)輸過程中的損失。有學(xué)者[14]研究MS-222和丁香酚在大口黑鱸幼魚運(yùn)輸?shù)膽?yīng)用中發(fā)現(xiàn)麻醉劑可以顯著降低應(yīng)激反應(yīng)，緩解不適，減少機(jī)體消耗。高仁法等[5]通過MS-222對鸚鵡魚的麻醉效果研究也發(fā)現(xiàn)，MS-222可以有效降低血液生化水平，減少應(yīng)激損傷，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)中，不同濃度處理SOD活性均低于空白對照，應(yīng)激使魚體內(nèi)產(chǎn)生大量自由基，誘導(dǎo)產(chǎn)生大量SOD以清除自由基，但MS-222不同濃度處理可以降低應(yīng)激損傷;MDA活性總體呈先降低后穩(wěn)定的趨勢;CAT和GSH活性均顯著高于空白對照，表明運(yùn)輸脅迫使黃顙魚肝組織細(xì)胞受到損傷，但MS-222會降低損傷程度，這與劉奇奇等研究結(jié)果相似[15]。試驗(yàn)結(jié)果表明，MS-222會使運(yùn)輸后魚體的抗氧化酶活性降低，有效降低了應(yīng)激反應(yīng)，為魚類運(yùn)輸提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)支撐和發(fā)展方向。

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（責(zé)編：徐世紅）