復(fù)方金銀花注射液的制備及防治禽新城疫的試驗(yàn)研究

楊成祥，張芳生，孟令召，趙 蕾

（1.河南省中獸藥制劑工程技術(shù)研究中心，河南 鄭州 450008；2.河南省南陽市禽藥工程技術(shù)研究中心，河南 方城 473200；3.河南省河南納瑞森生物藥業(yè)有限公司，473200；）

新城疫（newcastle disease，ND）是由新城疫病毒引起禽的一種急性、熱性、敗血性和高度接觸性傳染病。以高熱、呼吸困難、下痢、神經(jīng)紊亂、黏膜和漿膜出血為特征，具有很高的發(fā)病率和病死率，是危害養(yǎng)禽業(yè)的一種主要傳染病，OIE將其列為A類疫病。

復(fù)方金銀花注射液是以金銀花、蒲公英、梔子和大青葉為原料，按照一定的比例合理配伍，并經(jīng)現(xiàn)代提取技術(shù)研發(fā)的一種防治禽瘟熱病的中藥復(fù)方水針制劑，該產(chǎn)品可用于防治畜禽多種瘟熱性疾病，如家禽的新城疫、禽流感及豬、牛、羊等家畜瘟熱病等。

1 復(fù)方金銀花注射液方解

1.1 金銀花 性甘、寒，歸肺、心、胃經(jīng)。功能與主治：清熱解毒，疏散風(fēng)熱。用于癰腫疔瘡，喉痹，丹毒，熱毒血痢，風(fēng)熱感冒，溫病發(fā)熱?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究，金銀花具有廣泛的抗多種原微生物、抗炎和解、抗內(nèi)毒素、興奮中樞神經(jīng)和加強(qiáng)免疫功能等作用。

1.2 蒲公英 性苦、甘、寒，歸肝、胃經(jīng)。功能與主治：清熱解毒，消腫散結(jié)，利尿通淋。用于疔瘡腫毒，乳癰，瘰疬，目赤，咽痛，肺癰，腸癰，濕熱黃疸，熱淋澀痛?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，蒲公英含有多種化學(xué)活性成分，具有較強(qiáng)的抗菌通乳、抗腫瘤、利膽等作用，此外本品尚有利尿健胃，輕瀉等作用。

1.3 梔 子 性苦、寒，歸心、肺、三焦經(jīng)。功能與主治：瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒；外用消腫止痛。用于熱病心煩，濕熱黃疸，淋證澀痛，血熱吐衄，目赤腫痛，火毒瘡瘍，外治扭挫傷痛。梔子果實(shí)及果皮中含有很多活性成分，對金黃色葡萄球菌、腦膜炎雙球菌、卡他球菌、鉤端螺旋體及血吸蟲成蟲等抗病原微生物有抑制和殺滅作用。

1.4 大青葉 性苦、寒，歸心、胃經(jīng)。功能與主治：清熱解毒，涼血消斑。用于溫病高熱，神昏，發(fā)斑發(fā)疹，痄腮，喉痹，丹毒，癰腫。大青葉具有廣譜而較強(qiáng)的抗菌抗病毒作用，對金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎雙球菌、卡他球菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、流感嗜血桿菌、白喉?xiàng)U菌及痢疾桿菌均有一定程度的抑制作用，對乙型腦炎病毒、腮腺炎病毒、流感病毒亦有抑制作用，對鉤端螺旋體也有殺滅作用。另外還具有較好的抗炎、解熱等作用。

2 復(fù)方金銀花注射液的制備

2.1 原料藥的預(yù)處理 將優(yōu)質(zhì)金銀花、蒲公英、梔子和大青葉分別除雜、晾干，粉碎成粒度為40～160目細(xì)粉備用。

2.2 按照配方稱取金銀花、蒲公英、梔子和大青葉，加水浸提3次，第一次浸提用12倍金銀花重量的水浸泡30～40min，文火煎煮40h，過濾，得第一濾液；第一次過濾藥渣加入10倍金銀花重量的水進(jìn)行第2次浸提，文火煎煮30h，過濾，得第2濾液；第2次過濾藥渣再加10倍金銀花重量的水進(jìn)行第3次浸提，文火煎煮30min，過濾，得第3濾液，合并第一濾液、第2濾液和第3濾液。

2.3 將步驟2合并后的濾液離心處理得上清液，將上清液進(jìn)行微濾、超濾，超濾后的濾液經(jīng)減壓濃縮至相對密度為1.2～1.36。

2.4 將步驟3減壓濃縮后藥液加蒸餾水定容至配制量，灌裝、滅菌即得成品。

3 復(fù)方金銀花注射液防治禽新城疫病臨床試驗(yàn)

3.1 試驗(yàn)材料

復(fù)方金銀花注射液；由河南省中獸藥制劑工程技術(shù)研究中心按上述制備工藝和步驟制得，批號：2018072001；利巴韋林：購自北京某醫(yī)藥化工有限公司，批號：2018061001。

3.2 試驗(yàn)雞場選擇與分組

試驗(yàn)安排在南陽方城縣某存欄5萬只規(guī)?；唐妨_曼褐殼蛋雞場處于326日齡產(chǎn)蛋高峰期的不同發(fā)病階段的三個(gè)圈舍，采病料、血樣經(jīng)AGP、HI試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)、病毒分離，結(jié)合臨床癥狀、病理剖檢確診為新城疫病毒感染性疾病。分別在3個(gè)圈舍分別各隨機(jī)檢出100只蛋雞并編組。甲組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50只，對照組50只；乙組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50，對照組50只；丙組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50只，對照組50只。

3個(gè)組供試蛋雞均為326日齡羅曼褐殼蛋雞。甲組羅曼褐殼蛋雞群為發(fā)病第3日齡，乙組羅曼褐殼蛋雞群尚未出現(xiàn)癥狀但已處于潛伏期，丙組羅曼褐殼蛋雞群為發(fā)病后第14日齡。

3.3 飼養(yǎng)管理

每個(gè)按正常的飼養(yǎng)管理辦法進(jìn)行飼養(yǎng)管理，各個(gè)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件相同，各試驗(yàn)組與其相應(yīng)的對照組管理辦法亦完全一樣。

3.4 試驗(yàn)方案

各對照組用160mg/L的利巴韋林飲水，試驗(yàn)組用復(fù)方金銀花注射液，試驗(yàn)甲組劑量為200mg/L，試驗(yàn)乙、丙組劑量為160mg/L，連用14d。每天觀察并記錄各組羅曼褐殼蛋雞的精神、采食、飲水、糞便、發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)等情況。在本試驗(yàn)中乙組羅曼褐殼蛋雞群在試驗(yàn)的第4天2組均開始發(fā)病，丙組羅曼褐殼蛋雞群的對照組在試驗(yàn)的第6天即初發(fā)后第20天復(fù)發(fā)新城疫。

4 結(jié)果與分析

表1 試驗(yàn)結(jié)果

由表1可以看出，試驗(yàn)開始時(shí)各試驗(yàn)組與對照組產(chǎn)蛋率水平相當(dāng)（P＞0.05），試驗(yàn)期中，各試驗(yàn)組在所有指標(biāo)上明顯優(yōu)于相應(yīng)的對照組，各試驗(yàn)組與相應(yīng)的對照組比較，在發(fā)病率上甲組表現(xiàn)相同，乙組表現(xiàn)顯著性差異（P＜0.05），丙個(gè)表現(xiàn)極顯著性差異（P＜0.01）；在死亡率上甲、乙兩個(gè)組表現(xiàn)差異不顯著（P＞0.05），丙組表現(xiàn)差異極顯著（P＜0.01）；在產(chǎn)蛋率下降幅度上甲、乙、丙3個(gè)組表現(xiàn)差異均極顯著 （P＜0.01）；在畸形蛋率上甲、乙、丙3個(gè)組表現(xiàn)差異均顯著 （P＜0.05）。

5 結(jié)論

通過本次防治試驗(yàn)的結(jié)果結(jié)合本病在當(dāng)?shù)氐牧餍刑攸c(diǎn)，可以得出下面幾點(diǎn)結(jié)論：

5.1 在瘟病發(fā)病的前、中、后三個(gè)階段應(yīng)用復(fù)方金銀花注射液防治，均可大大降低蛋雞的死亡率和產(chǎn)率下降的幅度，中藥復(fù)方金銀花注射液有明顯的抗病毒、抗炎癥作用，效果明顯優(yōu)于利巴韋林。

5.2 初次發(fā)病的耐過蛋雞群顯然對本病能獲得一定的免疫力，但因本病破壞蛋雞的免疫系統(tǒng)，不少蛋雞群常在初發(fā)20～30d后會有不同程度地復(fù)發(fā)本病，如果初發(fā)后使用復(fù)方金銀花注射液可有效防止本病的復(fù)發(fā)。

5.3 應(yīng)用防治畜禽瘟熱病的復(fù)方金銀花注射液防治本病在降低產(chǎn)率下降、殼質(zhì)量恢復(fù)方面明顯優(yōu)于利巴韋林。

5.4 中醫(yī)認(rèn)為金銀花具有“補(bǔ)中益氣，固表升陽，生肌，扶內(nèi)固本”的藥效。防治畜禽瘟熱病的中藥復(fù)方金銀花注射液是由中藥金銀花通過精致提練而成，主要成分為金銀花Ⅰ、金銀花Ⅱ等多種免疫增強(qiáng)物質(zhì)，再配以蒲公英、梔子和大青葉，互相支持，能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生大量白細(xì)胞干擾素和吞噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞；而且能強(qiáng)化體內(nèi)的體液免疫途徑，產(chǎn)生大量的免疫球白和補(bǔ)體，改善微循環(huán)，有效地調(diào)理和增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，提高機(jī)體免疫功能，對病毒產(chǎn)生干擾、吞噬、結(jié)合作用，多種途徑殺滅病毒和細(xì)菌，并有清熱解毒和調(diào)節(jié)機(jī)體代謝機(jī)能紊亂之功效，增強(qiáng)禽類抗病能力。

5.5 復(fù)方金銀花注射液對畜禽瘟熱疾病治療效果良好，而且中草藥能克服耐藥問題并符合無公害產(chǎn)品的生產(chǎn)要求。復(fù)方金銀花制劑可以開發(fā)為注射劑、口服液或粉劑，應(yīng)用方便；機(jī)械化生產(chǎn)，產(chǎn)量大，成本低，并且衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)也容易達(dá)到。

5.6 復(fù)方金銀花注射液具有廣譜抗病毒、抑制細(xì)菌、退熱消炎、提高細(xì)胞免疫功能的作用，散外邪，清內(nèi)火，驅(qū)瘟疫邪毒。一些臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，還具有強(qiáng)大的廣譜抗病毒作用，能夠有效地防治瘟熱毒癥侵害機(jī)體所致的畜禽流行性感冒、禽溫和型流感等熱毒癥。