西洋參總皂苷抗心律失常活性研究

楊溯 陳東

【摘要】本實(shí)驗(yàn)將利用CaCl2復(fù)制心律失常動(dòng)物模型，觀察西洋參總皂苷的抗心律失常的作用，動(dòng)物分組后，注射給藥后30min或者灌胃給藥后1h，采用注射泵將2.5%的氯化鈣以0.5 ml/min的速度從尾靜脈泵入，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，觀察其心律失常情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以發(fā)生心律失常時(shí)（以第一點(diǎn)表示）、心室顫動(dòng)時(shí)、心臟停搏時(shí)氯化鈣用量為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

【關(guān)鍵詞】西洋參總皂苷;氯化鈣;心律失常;模型組;給藥組

【中圖分類號(hào)】R541 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095.6681.2019.27..02

西洋參（Panax quinquefolius）是人參的一種，又稱廣東人參、花旗參。具有抗心律失常、抗心肌缺血、抗心肌氧化、強(qiáng)化心肌收縮能力等作用。西洋參中的皂甙可以有效增強(qiáng)中樞神經(jīng)，達(dá)到靜心凝神、消除疲勞、增強(qiáng)記憶力等作用，可適用于失眠、煩躁、記憶力衰退及老年癡呆等癥狀。經(jīng)常服用西洋參可以調(diào)節(jié)血壓，可有效降低暫時(shí)性和持久性血壓，有助于高血壓、心律失常、冠心病、急性心肌梗塞、腦血栓等疾病的恢復(fù)。[1]嚴(yán)重室性心律失常既是多種心臟病的臨床表現(xiàn)，也是致死的主要原因。[2]當(dāng)心肌細(xì)胞某種通道功能異常、數(shù)目上調(diào)或下調(diào)，可使動(dòng)作電位時(shí)程（APD）縮短或延長(zhǎng)，進(jìn)而誘發(fā)心律失常。氯化鈣誘發(fā)的大鼠和豚鼠心律失常模型，具有發(fā)生率高、穩(wěn)定和持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，是國(guó)際上研究抗心律失常新藥常用的模型[3]。因此，本實(shí)驗(yàn)擬采用了上述心律失常模型，初步研究西洋參總皂苷的抗心律失常活性。

1 實(shí)驗(yàn)方法和過程

1.1 西洋參總皂苷的提取制備

取西洋參藥材，用粉碎機(jī)粗打，取粗料10 kg，在小型多功能提取罐中，以70%乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇至無醇味，加水稀釋至10 L，用澄清板板框過濾，濾液上AB-8大孔吸附樹脂，取50%乙醇洗脫液，濃縮，除去乙醇，純水稀釋后，澄清板過濾，微孔濾膜過濾，冷凍干燥，得西洋參總皂苷，備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)，健康Wistar大鼠，70只，雌雄各半，體重160～180 g，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2002-0003。動(dòng)物飼養(yǎng)在河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)藥研究院藥理實(shí)驗(yàn)室，光照12小時(shí)/天，溫度20～23℃，相對(duì)濕度40～60%。大鼠籠養(yǎng)，7只/籠。大鼠飼料為全價(jià)顆粒飼料，由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（冀）2003-2-001，保持充足的飲水。適應(yīng)性飼養(yǎng)三天。

1.3 試劑、藥物與儀器

1.3.1 試劑和藥物

西洋參總皂苷，含量相當(dāng)于62.5 g生藥/瓶，使用時(shí)用生理鹽水溶解成需要濃度，4℃保存。

氯化鈣，分析純，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司，批號(hào)：050330。

鹽酸美西律片，石藥集團(tuán)中諾藥業(yè)（石家莊）有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H13021318，產(chǎn)品批號(hào)：06055001，規(guī)格：50 mg×100片，使用時(shí)用0.5%CMC-Na配制成所需濃度。

1.3.2 主要儀器

BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)信號(hào)采集系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司。

TS2-60注射泵，保定蘭格恒流泵有限公司。

1.4 劑量設(shè)置原則

劑量按高、低劑量組設(shè)置，通過文獻(xiàn)及《中國(guó)藥典》2010版初步擬定西洋參生藥臨床用量為10 g，所以，高、低劑量組分別給予4.5、1.5 g生藥/kg（相當(dāng)于擬臨床用量的27、9倍）;另設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組，共5組，每組14只。根據(jù)以上設(shè)置原則將動(dòng)物分組，見表1。

1.5 給藥濃度和劑量

西洋參總皂苷樣品，加生理鹽水138.9 mL溶解后得到高劑量樣品，濃度為0.4509 g生藥/mL;西洋參總皂苷樣品，加生理鹽水416.7 mL溶解后得到低劑量樣品，濃度為0.1503 g生藥/mL。以上樣品均按10 ml/kg的劑量腹腔注射給藥。美西律配成0.006 g/mL的濃度，按10 ml/kg的劑量灌胃給藥。

1.6 給藥方法

腹腔注射，每天上午8～9點(diǎn)進(jìn)行;空白對(duì)照組給同體積生理鹽水。

1.7 檢測(cè)指標(biāo)和方法

動(dòng)物注射給藥后30 min或者灌胃給藥后1 h，烏拉坦腹腔注射麻醉后，仰位固定，采用注射泵將2.5%的氯化鈣以0.5 ml/min的速度從尾靜脈泵入，記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，觀察其心律失常情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以發(fā)生心律失常時(shí)（以第一點(diǎn)表示）、心室顫動(dòng)時(shí)、心臟停搏時(shí)氯化鈣用量為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié) 果

給予氯化鈣以后，各組動(dòng)物均發(fā)生明顯的心律失常，最后均死亡;與模型組比較，給藥組動(dòng)物發(fā)生心律失常、心室顫動(dòng)、心臟停搏時(shí)氯化鈣用量均有不同程度的增加，其中陽性對(duì)照藥美西律可顯著增加發(fā)生心律失常時(shí)氯化鈣的用量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），西洋參總皂苷低劑量組可明顯增加動(dòng)物發(fā)生室顫及發(fā)生死亡時(shí)氯化鈣的用量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05），結(jié)果見表2/附圖1。

3 結(jié) 論

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，西洋參（Panax quinquefolium L）具有抗心律失常、抗心肌缺血和再灌損傷等的作用。西洋參總皂苷能夠?qū)垢鞣N模型動(dòng)物的心律失常，能使離體豚鼠心室乳頭肌快反應(yīng)動(dòng)作電位振幅及0相最大除極速率降低，動(dòng)作電位時(shí)程縮短，有效不應(yīng)期延長(zhǎng)，心肌收縮力降低，抑制BaCl2、高鉀誘發(fā)的乳頭肌慢反應(yīng)電位。[4]人參三醇皂苷（Rg1、Rg2、Re、Rh1）能使大鼠培養(yǎng)心肌細(xì)胞自發(fā)搏動(dòng)的群落減少，動(dòng)作電位的所有參數(shù)減小，動(dòng)作電位發(fā)放頻率加快，該作用能被鈣通道激動(dòng)劑腎上腺素抵消;人參二醇苷能對(duì)抗烏頭堿、氯化鋇、氯化鈣-腎上腺素及左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎誘發(fā)的心律失常，并能降低離體大鼠右心房的自律性[5]。

氯化鈣誘發(fā)心律失常的作用機(jī)制較復(fù)雜，不僅與鈣離子對(duì)心臟的直接作用有關(guān)，而且與腎上腺素能神經(jīng)對(duì)心臟的影響有關(guān)。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，西洋參總皂苷具有很好的抗心律失常作用，而且與美西律相比雖然在治療室早方面不見優(yōu)勢(shì)，但在控制隨后出現(xiàn)的室顫和減少心臟停搏方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。

綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們注意到，西洋參總皂苷低劑量組具有明顯抗心律失常的作用，而高劑量組的效果不明顯;一般而言，抗心律失常藥的凈效應(yīng)取決于有益的和有害的效應(yīng)間的平衡，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類藥物易致室上性心律失常，它們對(duì)竇房結(jié)和房室結(jié)的抑制作用較強(qiáng)，Ⅰ類藥較多誘發(fā)室性心律失常，自發(fā)性持續(xù)性室性心動(dòng)過速多見于IA、IC類藥物開始用藥或加量時(shí)，是用藥過大的一種毒性反應(yīng)[6];而西洋參總皂苷在抗心律失常方面卻不具有Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類藥誘發(fā)室性心律失常的風(fēng)險(xiǎn)，體現(xiàn)了天然藥物毒性較低的優(yōu)點(diǎn)。

氯化鈣雖然誘發(fā)心律失常的作用機(jī)制較復(fù)雜，但最主要的還是通過Ca2+通道使胞內(nèi)Ca2+增多而產(chǎn)生各種室性心律失常，因此，西洋參總皂苷所具有的抗心律失常作用可能主要與阻止Ca2+內(nèi)流有關(guān)。至于低劑量抗心律失常優(yōu)于高劑量的現(xiàn)象，有待于今后通過對(duì)各種不同模型的進(jìn)一步研究，闡明其確切的作用機(jī)理。

參考文獻(xiàn)

[1] 作者：汪宗俊.西洋參的功效[J]《上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志》2008年01期13-20頁(yè).

[2] 作者1，楊寶峰，2，單宏麗，抗心律失常藥物作用最佳靶點(diǎn)研究[J]《哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）》2009年第01期04-08頁(yè).

[3] 作者1，張麗暉，2，李學(xué)文，氯化鈣制作豚鼠心律失常的動(dòng)物模型[J]《山西醫(yī)藥雜志》2007年05期16-25頁(yè)·

[4] 作者：王尚農(nóng)，馬欣西洋參莖葉皂甙對(duì)豚鼠心室乳頭狀肌動(dòng)作電位和收縮力的影響[J]《西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)（中文版）》2010年02期 15-27頁(yè).

本文編輯：趙小龍