膀胱癌患者TK1、DKK-1與生存關(guān)系分析

周裔 杜磊 季洋

【摘要】 目的：觀察探討TK1、Dickkopf-1（DKK-1）對(duì)膀胱癌治療、預(yù)后效果的臨床應(yīng)用價(jià)值，并對(duì)其與患者生存關(guān)系進(jìn)行分析研究。方法：選擇2014年1月-2015年1月吉林省一汽總醫(yī)院泌尿外科收治的84例膀胱癌患者作為研究組，又選取同期84例健康志愿者作為對(duì)照組，對(duì)比兩組TK1、DKK-1水平，分析其與患者生存的關(guān)系。結(jié)果：研究組TK1、DKK-1水平均明顯高于對(duì)照組，研究組治療干預(yù)后TK1、DKK-1水平均明顯低于治療干預(yù)前的水平（P<0.05）;3年后患者的生存率為77.38%（65/84），成功生存者TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗者（P<0.05），TK1、DKK-1水平與患者生存情況均存在負(fù)相關(guān)性（r=-0.154、-0.146，P<0.01）。結(jié)論：TK1、DKK-1在膀胱癌患者治療前后水平差異顯著，且TK1、DKK-1水平與患者生存情況均存在相關(guān)性，TK1、DKK-1水平越低，患者預(yù)后情況越好，可將其作為預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 胸苷激酶1 DKK-1 膀胱癌 生存關(guān)系 預(yù)后效果

[Abstract] Objective： To observe the clinical value of TK1， DKK-1 in the treatment and prognosis of patients with bladder cancer， and the relationship between it and the survival of patients was analyzed and studied. Method： From January 2014 to January 2015， 84 patients with bladder cancer treated in the Department of Urology， Jilin FAW General Hospital were selected as the study group. 84 healthy volunteers in the same period were selected as the control group. The TK1， DKK-1 levels of two groups were compared and the relationship between them and the survival of the patients was analyzed. Result： The levels of TK1， DKK-1 in the study group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. The levels of TK1， DKK-1 in the study group after treatment intervention were significantly lower than those of before treatment intervention （P<0.05）. The survival rate of patients after 3 years was 77.38% （65/84）. The TK1， DKK-1 levels of patients with successful survival were significantly lower than those of patients with failure of survival （P<0.05）. There was a negative correlation between the level of TK1 and DKK-1 and the survival of patients （r=-0.154， -0.146， P<0.01）. Conclusion： There are significant differences in the level of TK1， DKK-1 before and after treatment， and the TK1 and DKK-1 levels are negatively correlated with patient survival， and the level of TK1 and DKK-1 are correlated with the survival of patients， it can be used as an index to predict the prognosis of patients.

[Key words] Thymidine kinase 1 DKK-1 Bladder cancer Survival relationship Prognostic effect

First-authors address： Jilin FAW General Hospital， Changchun 130000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.35.035

膀胱癌是近幾年泌尿科中較為常見(jiàn)的一種疾病，對(duì)患者生命安全的威脅極大。目前臨床對(duì)患者的治療大部分集中在手術(shù)治療，但部分患者在腫瘤組織切除后，會(huì)有一定的概率出現(xiàn)復(fù)發(fā)。且在臨床診斷工作中，其癥狀與部分泌尿疾病較為相似，因此需要有效的腫瘤標(biāo)志物幫助臨床對(duì)患者的病情進(jìn)行診斷以及監(jiān)控，可以及時(shí)對(duì)患者病情變化進(jìn)行了解，并借此提高患者的生存率[1]。胸苷激酶1（TK1）是一種細(xì)胞增殖的標(biāo)志物，參與DNA合成，細(xì)胞周期的G1晚期和S期時(shí)，胸苷激酶1表達(dá)水平上調(diào)。雖然沒(méi)有直接參與細(xì)胞增殖，但胸苷激酶1為適應(yīng)腫瘤細(xì)胞的快速增殖會(huì)表現(xiàn)出上調(diào)的趨勢(shì)。Dickkopf-1（DKK-1）是一種分泌性蛋白，能夠參與Wnt信號(hào)通路的調(diào)控，其活性能夠抑制Wnt/β-鏈蛋白，降低腫瘤細(xì)胞的存活率[2-4]。此次研究中心是對(duì)患者的TK1、DKK-1水平進(jìn)行檢測(cè)，并分析其與患者的預(yù)后、生存關(guān)系?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月-2015年1月吉林省一汽總醫(yī)院泌尿外科收治的84例膀胱癌患者作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：病理切片、影像檢查以及膀胱鏡檢查，確診為膀胱癌;未接受化療或其他治療干預(yù)。排出標(biāo)準(zhǔn)：其他惡性腫瘤;有精神疾病病史。選取同期84例健康志愿者作為對(duì)照組。該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法 研究組采用膀胱部分切除術(shù)聯(lián)合術(shù)后化療。兩組均采集空腹靜脈血3 mL，并于EDTA處理后的抗凝管中放置樣本血液[5]。在室溫條件下，2 000 r/min離心10 min，進(jìn)行纖維蛋白干擾去除[6]。離心結(jié)束后，血清待用，采取雙抗體酶聯(lián)免疫法對(duì)處理后的血清中進(jìn)行TK1檢測(cè)[7]。微孔板的覆蓋用純化的TK1抗體，微孔板上固定抗體。微孔中放入兩組研究對(duì)象的血清，使血清中的TK1固定抗體結(jié)合，構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，洗滌過(guò)后，加入反應(yīng)底物TMB，顯示出的藍(lán)色深淺，與樣本血清中的TK1水平為正相關(guān)關(guān)系[8];采取雙抗體酶聯(lián)免疫法，對(duì)樣本血清中的DKK-1水平進(jìn)行檢測(cè)[9]。酶標(biāo)儀（生產(chǎn)廠家：南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）可自動(dòng)反映出每個(gè)樣品的吸光度值，在波長(zhǎng)450 nm條件下檢測(cè)樣品的吸光度，借助標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)分析樣品中的TK1水平。將吸光度值結(jié)果從電腦中拷貝出來(lái)，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)兩組TK1、DKK-1水平進(jìn)行檢測(cè)和記錄，并比較研究組治療前后TK1、DKK-1水平。對(duì)研究組患者進(jìn)行定期隨訪，檢測(cè)TK1、DKK-1水平，了解統(tǒng)計(jì)患者3年的生存情況、TK1、DKK-1水平。為確保數(shù)據(jù)的統(tǒng)一性和準(zhǔn)確性，所有的檢測(cè)工作與數(shù)據(jù)記錄分析工作均由同一組工作人員進(jìn)行?；颊呙吭逻M(jìn)行1次復(fù)診，檢查患者各項(xiàng)生命指標(biāo)及TK1、DKK-1水平，直至3年隨訪結(jié)束。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn);采用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 研究組84例患者中，男50例，女34例，平均年齡（45.65±3.05）歲;對(duì)照組84例健康志愿者，其中男45例，女39例，平均年齡（44.57±2.54）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組TK1、DKK-1水平比較 研究組TK1、DKK-1水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 研究組治療前后TK1、DKK-1水平比較 研究組治療后TK1、DKK-1水平均明顯下降，且均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 研究組3年生存情況比較 研究組3年生存率為77.38%（65/84），成功生存者TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。TK1、DKK-1水平與患者生存情況均呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.154、-0.146，P<0.01）。

3 討論

膀胱癌是泌尿科中較為常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，也是目前世界十大常見(jiàn)惡性腫瘤之一，對(duì)患者生命的威脅極大[10]。由于膀胱癌初期的臨床癥狀不具有特異性，與其他泌尿疾病較為相似，因此大部分患者就診時(shí)病情已較為嚴(yán)重[11]。目前主要的治療方法就是手術(shù)治療，但部分患者在手術(shù)后會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)的情況，因此臨床上針對(duì)膀胱癌患者急需一種特異性較強(qiáng)的腫瘤標(biāo)志物，幫助臨床對(duì)患者進(jìn)行診斷，并有效檢測(cè)病情的變化，借此加強(qiáng)治療，提高患者的生存率[12]。

膀胱癌發(fā)病的初期，其腫瘤組織較小，僅靠B超、X線檢查是無(wú)法發(fā)現(xiàn)病灶的，而尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查是無(wú)法保證檢查的準(zhǔn)確性，因此其逐漸被淘汰，新型流式細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)樣本、操作人員的專業(yè)技術(shù)及儀器的要求均較高，因此無(wú)法在臨床對(duì)膀胱癌患者的診斷工作中進(jìn)行推廣和使用，目前臨床檢測(cè)工作中，尚缺少特異性較強(qiáng)的腫瘤標(biāo)志物。

本研究結(jié)果顯示，研究組TK1、DKK-1水平均明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。說(shuō)明對(duì)TK1、DKK-1水平進(jìn)行檢測(cè)，可在一定程度上對(duì)患者的病情進(jìn)行診斷，且其具有一定的準(zhǔn)確性，TK1、DKK-1水平越高病情越嚴(yán)重。文獻(xiàn)[13]報(bào)道，TK1、DKK-1水平的變化與患者的病情有著極為密切的關(guān)系。對(duì)膀胱癌患者的臨床診斷中，可對(duì)TK1、DKK-1水平進(jìn)行檢測(cè)，并以此為基礎(chǔ)，對(duì)患者進(jìn)行診斷。TK1、DKK-1水平與患者的病情呈負(fù)相關(guān)，也就是患者的病情越嚴(yán)重，則TK1、DKK-1水平越高[14-15]。胸苷激酶是一種嘧啶核苷酸代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶，在細(xì)胞G1和S期交界處開(kāi)始升高，在細(xì)胞增殖周期中起到重要的作用，分為T(mén)K1和TK2兩個(gè)亞型，編碼TK1的基因位于17號(hào)染色體上，編碼TK2的基因位于16號(hào)染色體上。血清胸苷激酶在非增殖細(xì)胞中含量極少，只有細(xì)胞異常增殖時(shí)才呈現(xiàn)一個(gè)高表達(dá)狀態(tài)，被認(rèn)為是極具生命潛力的腫瘤標(biāo)志物，而且這種高表達(dá)主要以TK1的含量升高為主。即使是高表達(dá)，在人體內(nèi)也是以pmol/L為單位，可見(jiàn)是一個(gè)極敏感的指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，研究組治療前TK1、DKK-1水平均明顯高于治療后（P<0.05）;3年生存統(tǒng)計(jì)中，成功生存的患者，其TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗的患者（P<0.05）。胸苷激酶1是細(xì)胞增殖的標(biāo)志物，參與DNA合成，在細(xì)胞周期的G1晚期與S期中，胸苷激酶1的表達(dá)水平會(huì)出現(xiàn)一定的上調(diào)，其雖未直接參與到細(xì)胞增殖中，但胸苷激酶1為了適應(yīng)腫瘤細(xì)胞的快速增殖，其水平數(shù)值也會(huì)出現(xiàn)上調(diào)的情況[16-17]。DKK-1屬于分泌性蛋白的一種，DKK-1的羧基端能與人體內(nèi)的低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6（LRP6）結(jié)合，從而阻礙Wnt/β-鏈蛋白信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，與人體內(nèi)的癌癥發(fā)病情況有關(guān)?？梢詤⑴c到Wnt信號(hào)通路的調(diào)控中，其具有的活性可以對(duì)Wnt/β-鏈蛋白進(jìn)行抑制，減少腫瘤細(xì)胞的存活率[18-19]。且DKK-1不僅可以對(duì)Wnt信號(hào)通路的調(diào)控進(jìn)行參與，同時(shí)DKK-1也可以借修飾其他分子的作用，進(jìn)而對(duì)另外的信號(hào)通路的調(diào)控進(jìn)行參與，如DKK-1可以在修飾Slug/Snail家族的鋅指蛋白的過(guò)程中，同時(shí)發(fā)揮其調(diào)控的作用[20]。

綜上所述，膀胱癌患者的TK1、DKK-1水平均明顯高于健康人，TK1、DKK-1在血清中水平治療前后差異顯著，且TK1、DKK-1水平與患者生存均存在相關(guān)性，TK1、DKK-1水平越低，患者預(yù)后越好，將其作為診斷指標(biāo)或預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo)，均具有顯著的臨床價(jià)值。

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（收稿日期：2019-10-09） （本文編輯：程旭然）