卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2、GST-π表達(dá)情況及其與預(yù)后的關(guān)系研究

張桂芳 余靜容 陳小青

【摘要】 目的：探究卵巢癌患者p53蛋白、環(huán)氧合酶-2（COX-2）、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（Bcl-2）及谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π（GST-π）表達(dá)情況及其與預(yù)后的關(guān)系。方法：選取南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院及江西省婦幼保健院2016年6月-2018年1月80例卵巢癌患者為觀察組，另選取同期80例卵巢良性腫瘤患者為對照組。比較兩組p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況。比較觀察組中不同分化程度、分期及預(yù)后的p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況。結(jié)果：觀察組p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率均高于對照組（P<0.05）。觀察組中分化程度越低陽性表達(dá)率越高（P<0.05）;TNM分期越高者陽性表達(dá)率越高（P<0.05）;死亡或復(fù)發(fā)者陽性表達(dá)率高于生存者（P<0.05）。結(jié)論：卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且死亡復(fù)發(fā)患者的表達(dá)相對更高，具有較高的臨床檢測價值。

【關(guān)鍵詞】 卵巢癌 p53蛋白 COX-2 Bcl-2 GST-π

[Abstract] Objective： To investigate the expression of p53 protein， cyclooxygenase-2 （COX-2）， B-lymphocytoma-2 gene （Bcl-2） and GST-π in ovarian cancer patients and their relationship with prognosis. Method： A total of 80 patients with ovarian cancer in The Third Affiliated Hospital of Nanchang University and Jiangxi Maternal and Child Health Hospital from June 2016 to January 2018 were selected as the observation group， and 80 patients with benign ovarian tumors in the same period were selected as the control group. The expressions of p53 protein， COX-2， Bcl-2 and GST-π in the two groups were compared. The expressions of p53 protein， COX-2，?Bcl-2 and GST-π were compared in the observation group with different degrees of differentiation， stages and prognosis. Result： The positive expression rates of p53 protein， COX-2， Bcl-2 and GST-πof observation group were all higher than those of the control group （P<0.05）. In the observation group， the lower the degree of differentiation， the higher the positive expression rate （P<0.05）. The higher the TNM stage， the higher the positive expression rate （P<0.05）. The positive expression rate of death or recurrence was higher than that of survival （P<0.05）. Conclusion： The p53 protein， COX-2， Bcl-2 and GST-πof patients with ovarian cancer show higher expression state， and the expression of patients with recurrence and death are relatively higher， so the detection value of these items are higher.

[Key words] Ovarian cancer p53 protein COX-2 Bcl-2 GST-π

First-authors address： The Third Affiliated Hospital of Nanchang University， Nanchang 330008， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.34.030

卵巢癌是女性生殖器常見惡性腫瘤，患者的死亡率較高，預(yù)后較差。臨床中與卵巢癌相關(guān)的研究較多，其中關(guān)于疾病發(fā)生發(fā)展相關(guān)指標(biāo)的研究是重點與熱點[1-2]。p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π等作為在多類惡性腫瘤中表達(dá)明顯異常的指標(biāo)，其在卵巢癌患者中的表達(dá)也可見，但是上述指標(biāo)在卵巢癌患者疾病分期與分化程度方面表達(dá)意義研究及對預(yù)后的反應(yīng)價值研究仍相對不足[3-4]。本研究就卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況及與預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行探究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院及江西省婦幼保健院2016年6月-2018年1月80例卵巢癌患者為觀察組，另選取同期的80例卵巢良性腫瘤患者為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：20～65歲;卵巢腫塊就診者;未接受相關(guān)治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他生殖器疾病者;合并慢性基礎(chǔ)疾病者;合并代謝性疾病者。所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經(jīng)通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 兩組均進(jìn)行手術(shù)治療，并取病灶組織。檢測兩組病灶組織p53蛋白、環(huán)氧合酶-2（COX-2）、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（Bcl-2）及谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶-π（GST-π）表達(dá)情況。兩組的組織標(biāo)本采集后，采用SP免疫組化法進(jìn)行檢測，試劑購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，將蠟塊進(jìn)行切片，厚度為4 m，進(jìn)行二甲苯脫蠟，抗原修復(fù)，以PBS洗3次，每次時間為2.0分鐘，進(jìn)行顯色處理，流水洗后采用蘇木精復(fù)染，脫水、二甲苯透明，封片。隨機選取10個高倍視野，按綜合棕黃色或棕褐色染色強度和陽性細(xì)胞總細(xì)胞數(shù)的百分比進(jìn)行半定量處理。染色強度按下列標(biāo)準(zhǔn)評分，著色弱但明顯強于陰性對照為1分，染色清晰為2分，染色強為3分;陽性細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)<10%為（-）;10%～50%為2分，51%～80%為3分，>80%為4分，上述兩項評分相加，3分為弱陽性（+），4～5分為中度陽性（+）;6～7分為強陽性（+++）。（-）為陰性表達(dá)，（+）～（+++）為陽性表達(dá)。

1.3 觀察指標(biāo) （1）比較兩組p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率。（2）比較觀察組中不同分化程度者上述指標(biāo)陽性表達(dá)率。（3）比較觀察組中不同TNM分期者上述指標(biāo)的陽性表達(dá)率。（4）隨訪1年，比較觀察組不同預(yù)后（生存與死亡或復(fù)發(fā)）者上述指標(biāo)的表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 23.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對照組年齡23～60歲，平均（42.7±6.0）歲，其中卵巢囊腺瘤者60例，其他20例。觀察組年齡23～61歲，平均（42.9±6.2）歲，分化程度：高分化者40例，中分化者22例，低分化者18例;TNM分期：Ⅰ期者18例，Ⅱ期者20例，Ⅲ期者22例，Ⅳ期者20例。隨訪1年后，觀察組生存38例，死亡或復(fù)發(fā)42例。兩組年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況比較 觀察組p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.3 不同分化程度者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況比較 分化程度越低p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率越高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.4 不同分期者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況比較 TNM分期越高p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率越高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表3。

2.5 不同預(yù)后者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況比較 死亡或復(fù)發(fā)者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率均高于生存者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表4。

3 討論

卵巢癌是婦科常見惡性腫瘤，且預(yù)后較差，對患者的危害極大。與卵巢癌相關(guān)的研究眾多，其中較多為疾病發(fā)生發(fā)展過程中的表達(dá)指標(biāo)變化研究[5-6]。與惡性腫瘤相關(guān)的指標(biāo)較多，其中p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π等在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展乃至耐藥等方面的研究中較為多見。其中p53蛋白表達(dá)異常時，可導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，成為腫瘤發(fā)生的起始因子，在較多惡性腫瘤的預(yù)后中具有反應(yīng)意義[7-10]。COX-2作為臨床研究較多的炎癥誘導(dǎo)酶，其在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著較大的作用，且與新生血管及腫瘤細(xì)胞的侵襲能力等密切相關(guān)[11-12]。Bcl-2則是細(xì)胞凋亡的重要相關(guān)因子，其在腫瘤細(xì)胞的凋亡調(diào)節(jié)中具有較大的作用，在惡性腫瘤中多呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)[13-15]。GST-π在促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生發(fā)展方面具有較強的作用，并對腫瘤細(xì)胞的耐藥反應(yīng)有較大影響，因此認(rèn)為其在卵巢癌中的變化研究意義較高[16-19]。

本研究就卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表達(dá)情況及與預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行探究，結(jié)果顯示，卵巢癌患者組織的p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π陽性表達(dá)率明顯高于卵巢良性腫瘤患者，同時分期較高及分化程度較低的卵巢癌患者其上述指標(biāo)的陽性表達(dá)率相對高于分期較低及分化程度較高的患者，且死亡或復(fù)發(fā)者的陽性表達(dá)率高于生存者，說明p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π在組織中的表達(dá)有助于卵巢癌的診斷及疾病分期、分化程度的了解，其對預(yù)后也有一定的反應(yīng)意義。這可能與上述指標(biāo)在控制細(xì)胞凋亡的基礎(chǔ)上，增強了其耐藥性等因素有關(guān)因此患者的預(yù)后多相對較差，對于預(yù)后的反應(yīng)意義也即具有一定的價值[20-22]。

綜上所述，卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π均呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且死亡或復(fù)發(fā)患者的表達(dá)相對更強，具有較高的臨床檢測價值。

參考文獻(xiàn)

[1]葉麗平，馬靜方，仇會會.RNA干擾cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白對堿性成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)的人卵巢癌細(xì)胞Bcl-2表達(dá)的影響[J].中國老年學(xué)雜志，2017，37（2）：280-282.

[2]孫麗敏，蔡芳，牛東升，等.貝伐珠單抗對復(fù)發(fā)性卵巢癌Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表達(dá)情況及臨床治療效果的影響[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2019，37（1）：100-103，112.

[3]劉金娥，張洪濤，李東燕，等.人參皂甙Compound K對卵巢癌細(xì)胞增殖與凋亡的影響及其機制探討[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報，2019，25（12）：1870-1875.

[4]祁彥萍，楊建敏，馮磊，等.GST-π在上皮性卵巢癌組織中表達(dá)及與患者耐藥、病理特征的關(guān)系[J].中國老年學(xué)雜志，2018，38（12）：2881-2883.

[5]林善群，高淑平，盧運萍，等.p53和survivin蛋白水平在宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)性卵巢癌組織中的表達(dá)意義研究[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，16（14）：1373-1376.

[6] Ferraiuolo M，Verduci L，Blandino G，et al.Mutant p53 Protein and the Hippo Transducers YAP and TAZ：A Critical Oncogenic Node in Human Cancers[J].Int J Mol Sci，2017，18（5）：961.

[7]賈敏利，宋曉彤.上皮性卵巢癌P53、Livin和PARP表達(dá)檢測及其對卵巢癌化療耐藥、臨床預(yù)后的影響研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（4）：452-454.

[8] Madan E，Parker T M， Bauer M R，et al.The curcumin analog HO-3867 selectively kills cancer cells by converting mutant p53 protein to transcriptionally active wildtype p53[J].J Biol Chem，2018，293（12）：4262-4276.

[9]鄭小妹，林葉飛，盧齋，等.卵巢漿液性癌組織中P53、cyclinB1及SIRT1的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系[J].腫瘤藥學(xué)，2017，7（1）：69-73.

[10]陳穎，龍啟芳.ER、HNF-1β及COX-2在子宮內(nèi)膜異位相關(guān)性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué)，2017，46（27）：3801-3803，3807.

[11]王英.EGFR、COX-2、Caspase-3、Blc-2及MMP與卵巢癌患者化療耐藥的關(guān)系[J].實用癌癥雜志，2018，33（5）：721-723.

[12]史紅利.hK14、COX-2蛋白表達(dá)水平變化與上皮性卵巢癌發(fā)病相關(guān)性分析及作用機制分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2018，36（4）：603-605，638.

[13] Khaoula Hadami，Nadia Dakka，Mounia Bensaid，et al.

Evaluation of glutathione S-transferase pi 1 expression and gene promoter methylation in Moroccan patients with urothelial bladder cancer[J].Mol Genet Genomic Med，2018，6（5）：819-827.

[14]楊麗華，屈莉紅.上皮性卵巢癌中化療耐藥相關(guān)蛋白標(biāo)志物的表達(dá)及意義分析[J].癌癥進(jìn)展，2018，16（1）：95-98.

[15]張小華，陳開杰，張海偉，等.P53、Livin和PARP在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及其對卵巢癌患者化療耐藥、臨床預(yù)后的影響[J].中國生化藥物雜志，2017，37（2）：294-296.

[16] Kar S P，Beesley J，Amin A Olama A，et al.Genome-wide Meta-analyses of Breast，Ovarian and Prostate Cancer Association Studies Identify Multiple New Susceptibility Loci Shared by At Least Two Cancer Types[J].Cancer Discov，2016，6（9）：1052–1067.

[17]聶小鳳，楊麗華，張琴，等.p53基因與卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫惡變相關(guān)性Meta分析[J].醫(yī)學(xué)綜述，2017，23（8）：1643-1647.

[18]張威，郭文濤，班振英，等.試析不同卵巢腫瘤組織中Ki-67、P53、C23及EGFR蛋白的表達(dá)變化[J].世界中醫(yī)藥，2017，12（S1）：503.

[19]毛燕南，曾麗霞，李宇虹，等.PAX8、PA字2、p53和RAS蛋白在卵巢及輸卵管組織中的表達(dá)對于高級別卵巢漿液性癌起源的意義[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2017，52（10）：687-696.

[20] Zanjirband M，Edmondson R J，Lunec J.Pre-clinical efficacy and synergistic potential of the MDM2-p53 antagonists，Nutlin-3 and RG7388，as single agents and in combined treatment with cisplatin in ovarian cancer[J].Oncotarget，2016，7（26）：40115-40134.

[21]劉文成，譚布珍，占欣璐，等.雷公藤多苷增強耐順鉑人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP細(xì)胞株順鉑敏感性的體外研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2017，22（12）：1364-1370.

[22]時曉霞，唐德才，尹剛，等.黃芪、莪術(shù)配伍對人卵巢癌HO-8910原位移植瘤組織中MMP-2、FGF-2、BCL-2表達(dá)的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2018，36（6）：1312-1315.

（收稿日期：2019-08-26） （本文編輯：田婧）