丁苯酞對(duì)超早期腦梗死再灌注炎癥損傷的保護(hù)作用及對(duì)血清NSE、S-100β蛋白表達(dá)的影響

杜洪彬

【摘要】 目的：探討丁苯酞對(duì)超早期腦梗死再灌注炎癥損傷的保護(hù)作用及對(duì)血清NSE、S-100β蛋白表達(dá)的影響。方法：選取2016年8月-2019年1月本院收治的62例行溶栓治療的超早期腦梗死患者，按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，各31例。對(duì)照組給予尿激酶行靜脈溶栓治療，觀察組加用丁苯酞治療。于溶栓前，溶栓后1、7 d，檢測(cè)兩組炎癥因子、NSE、S-100β蛋白表達(dá)水平，并評(píng)估神經(jīng)功能改善情況。結(jié)果：溶栓后1 d，兩組血清IL-6、TNF-α、NSE、S-100β蛋白含量均較溶栓前明顯上調(diào)，但至溶栓后7 d兩組含量均較溶栓前明顯下調(diào)，且觀察組溶栓后1、7 d含量均明顯低于對(duì)照組（P<0.05）;溶栓后7 d，觀察組NIHSS評(píng)分為（5.48±0.70）分，明顯低于對(duì)照組的（7.56±0.98）分（P<0.05）。結(jié)論：丁苯酞可改善超早期腦梗死再灌注損傷患者神經(jīng)功能，其保護(hù)作用可能與減輕炎癥損傷，下調(diào)NSE、S-100β蛋白表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 丁苯酞 腦梗死再灌注 炎癥因子 NSE S-100β蛋白

[Abstract] Objective： To investigate the protective effect of Butylphthalide on inflammatory injury induced by super-early cerebral infarction reperfusion and the expression of serum NSE and S-100β protein. Method： From August 2016 to January 2019， sixty-two patients with super-earlycerebral infarction admitted to our hospital were divided into two groups， 31 cases in each group. The control group was treated with intravenous thrombolysiswith Urokinase， and the observation group was treated with Butylphthalide. Before thrombolysis， after thrombolysis 1 and 7 d， the expression levels of inflammatory factors， NSE and S-100β protein were measured and the improvement of neurological function was evaluated. Result： After thrombolysis 1 d， the levels of serum IL-6， TNF-α， NSE and S-100β protein were higher than those of before thrombolysis， but after thrombolysis 7 d， the levels of two groups were lower than those of before thrombolysis， the content of the observation group at 1 and 7 d after thrombolysis were lower than those of the control group （P<0.05）. After thrombolysis 7 d， the NIHSS score of the observation group was （5.48±0.70） scores， which was lower than （7.56±0.98） scores of the control group （P<0.05）. Conclusion： Butylphthalide can improve the neurological function of patients with super-earlycerebral infarctionreperfusion injury， and its protective effect may be related to the reduction of inflammatory injury and down-regulation of NSE and S-100β protein expression.

[Key words] Butylphthalide Cerebral infarction reperfusion Inflammatory factor NSE S-100β protein

First-authors address： Jiamusi Central Hospital， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.31.017

腦梗死是臨床上常見(jiàn)的一種以神經(jīng)功能缺損為臨床主要表現(xiàn)的腦血管疾病，是腦動(dòng)脈狹窄、閉塞或破裂，造成腦組織血液循環(huán)障礙、缺血缺氧，引起的局部組織壞死，占全部腦血管疾病的60%～80%，具有致殘率、病死率雙高的特點(diǎn)，嚴(yán)重危害人類(lèi)身心健康[1]。當(dāng)前，對(duì)于發(fā)病時(shí)間<6 h的超早期腦梗死患者，多采取靜脈溶栓治療，其可有效疏通血管，實(shí)現(xiàn)缺血再灌注（IR），恢復(fù)梗死部位微循環(huán)[2]。但有研究顯示，溶栓后患者腦血管完全再通率僅30%～40%，且在IR的過(guò)程中，因氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、鈣超載、線粒體功能異常等，會(huì)出現(xiàn)IR損傷[3]。因而如何進(jìn)一步提高靜脈溶栓治療效果是當(dāng)前神經(jīng)內(nèi)科研究的熱點(diǎn)。丁苯酞屬于一種人工合成的消旋正丁基苯酞，能夠增加腦缺血區(qū)灌注，重構(gòu)腦微循環(huán)，并保護(hù)腦線粒體功能，但當(dāng)前有關(guān)丁苯酞在腦梗死急性期的作用機(jī)制的研究鮮少。特異性烯醇化酶（NSE）是臨床公認(rèn)的一種神經(jīng)元標(biāo)志性酶，在腦組織受損后，由神經(jīng)元釋放入血，且其在血清中的含量與腦損傷嚴(yán)重程度存在明顯相關(guān)性[4]。S-100β蛋白屬于一種酸性鈣結(jié)合蛋白，可反映腦損傷的進(jìn)展過(guò)程[5]。本研究重點(diǎn)探討在常規(guī)溶栓治療行再灌注的基礎(chǔ)上早期聯(lián)合丁苯酞治療，對(duì)超早期腦梗死再灌注患者神經(jīng)功能、炎癥反應(yīng)及NSE、S-100β蛋白表達(dá)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年8月-2019年1月本院收治的62例行溶栓治療的超早期腦梗死患者作為觀察對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均經(jīng)頭顱CT或MRI檢查確診，且診斷符合《各類(lèi)腦血管疾病診斷要點(diǎn)》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[6];（2）參照《急性缺血性腦卒中診治指南（2018）》[7]，符合尿激酶溶栓指征。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有出血傾向;（2）伴有嚴(yán)重心、肝、腎、肺等重要臟器功能障礙;（3）近15 d內(nèi)服用過(guò)免疫抑制劑、炎癥抑制劑;（4）既往有重度意識(shí)障礙。按隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，各31例。該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法 入組患者均給予吸氧、降血糖、控制血壓、積極的腦保護(hù)、改善血液循環(huán)、防治感染等神經(jīng)內(nèi)科基礎(chǔ)治療，且均給予尿激酶作為再灌注手段，在溶栓前均靜脈滴注20%甘露醇125 mL，滴注完畢后將尿激酶（生產(chǎn)廠家：成都通德藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H51021402，規(guī)格：50萬(wàn)單位）（100～150）萬(wàn)單位混勻于0.9%氯化鈉溶液150 mL后靜脈滴注，30 min內(nèi)滴注完畢。并給予辛伐他?。ㄉa(chǎn)廠家：北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20058534，規(guī)格：10 mg）20～40 mg/次，1次/d，口服。24 h后予以阿司匹林（生產(chǎn)廠家：上海上藥信誼藥廠有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H31022424，規(guī)格：50 mg）300 mg/次，1次/d，共3 d，口服，繼而調(diào)整劑量為100 mg，長(zhǎng)期口服。觀察組靜脈溶栓治療后即刻靜脈滴注丁苯酞（生產(chǎn)廠家：石藥集團(tuán)恩必普藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20100041，規(guī)格：100 mL）100 mL，2次/d，共治療7 d。

1.3 觀察指標(biāo)與評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 血清炎癥因子檢測(cè) 溶栓前，溶栓后1、7 d，抽取空腹靜脈血5 mL，經(jīng)3 000 r/min離心10 min，取血清，利用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量。

1.3.2 血清NSE、s-100β蛋白檢測(cè) 溶栓前，溶栓后1、7 d，取“1.3.1”制備的血清，利用酶聯(lián)免疫吸附法，測(cè)定NSE、S-100β蛋白表達(dá)情況，本組操作過(guò)程均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行，所用試劑盒均購(gòu)自北京潤(rùn)諾思醫(yī)療科技有限公司。

1.3.3 神經(jīng)功能評(píng)估 溶栓前、溶栓后7 d，采用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評(píng)估，涵蓋意識(shí)與定向力、凝視、視野、面癱、上肢運(yùn)動(dòng)、下肢運(yùn)動(dòng)、共濟(jì)失調(diào)、感覺(jué)、語(yǔ)言、構(gòu)音障礙、忽視等項(xiàng)目，評(píng)分范圍為0～42分，0～1分為正常，2～4分為輕度卒中，5～15分為中度卒中，16～20分為中～重度卒中，21～42分為重度卒中[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，組內(nèi)比采用F檢驗(yàn)或配對(duì)t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 觀察組中男17例，女14例;年齡53～76歲，平均（65.48±6.04）歲;病程1～6 h，平均（4.25±0.41）h。對(duì)照組中男16例，女15例;年齡54～78歲，平均（65.57±6.12）歲;病程1～6 h，平均（4.30±0.42）h。兩組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組炎癥因子水平比較 溶栓后1 d，兩組血清IL-6、TNF-α含量均較溶栓前明顯上調(diào)，但至溶栓后7 d兩組血清含量均較溶栓前明顯下調(diào)，且觀察組溶栓后1、7 d的血清含量均明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 兩組血清NSE、S-100β蛋白表達(dá)比較 溶栓后1 d，兩組血清NSE、S-100β蛋白含量均較溶栓前明顯上調(diào)，但至溶栓后7 d兩組血清含量均較溶栓前明顯下調(diào)，且觀察組溶栓后1、7 d的血清含量均明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.4 兩組神經(jīng)功能比較 溶栓后7 d，兩組NIHSS評(píng)分均較溶栓前明顯降低，且觀察組明顯低于對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表3。

3 討論

隨著我國(guó)人民生活水平的提高、生活方式的改變、不良習(xí)慣的養(yǎng)成及人口老齡化進(jìn)程的加劇，缺血性腦卒中已成為導(dǎo)致我國(guó)居民殘疾、死亡的主要疾病之一。雖然采取尿激酶行靜脈溶栓治療可以及時(shí)恢復(fù)超早期腦梗死患者血流灌注，挽救缺血半暗帶組織，但I(xiàn)R損傷嚴(yán)重影響患者預(yù)后，因而進(jìn)行靜脈溶栓的過(guò)程中輔以有效藥物保護(hù)腦組織意義重大。

丁苯酞注射液是新研發(fā)的具有腦保護(hù)作用的藥物，主要活性成分為消旋-3-正丁基苯酞，能夠保護(hù)血管結(jié)構(gòu)的完整性，促進(jìn)側(cè)支循環(huán)建立，并利于增加微血管的數(shù)量與血流速度，顯著改善微循環(huán)，減少梗死面積[8]。同時(shí)，丁苯酞可抑制血栓形成，有效保護(hù)并改善線粒體結(jié)構(gòu)與功能，進(jìn)而改善腦組織的能量代謝，有效挽救“缺血半暗帶”組織[9]。此外，丁苯酞可抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載，促進(jìn)腦血管內(nèi)皮一氧化氮合成，抑制氧自由基釋放，提高抗氧化酶活性以及抑制炎癥因子的表達(dá)，減輕腦損傷與再灌注損傷，改善神經(jīng)功能[10]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，丁苯酞可通過(guò)增強(qiáng)大鼠腦組織的抗氧化能力、促進(jìn)血管生成而發(fā)揮較好的腦保護(hù)作用，從而利于改善腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能[11-12]。同時(shí)，丁苯酞能夠通過(guò)抑制細(xì)胞壞死性凋亡效應(yīng)，減輕小鼠腦缺血再灌注損傷[13]。此次研究結(jié)果顯示，溶栓后7 d，觀察組NIHSS評(píng)分明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。提示，丁苯酞具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，可有效恢復(fù)超早期腦梗死再灌注患者神經(jīng)功能。

炎癥反應(yīng)在腦IR損傷過(guò)程中扮演的角色是當(dāng)前臨床研究的熱點(diǎn)。腦缺血時(shí)，多種通路被激活使腦組織中的炎性細(xì)胞迅速活化，致使IL-6、TNF-α等炎性細(xì)胞因子大量表達(dá)，趨化因子、黏附分子等明顯上調(diào)，引發(fā)白細(xì)胞在腦缺血部位聚集和浸潤(rùn)，阻塞微血管[14-15]。此外，聚集的白細(xì)胞可釋放大量自由基直接引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，破壞血腦屏障，形成腦水腫，損傷神經(jīng)元，加重腦IR損傷。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，丁苯酞可通過(guò)抑制核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）的過(guò)度表達(dá)來(lái)減少下游多種粘附分子、炎癥因子及趨化因子等的釋放，從而減輕炎癥反應(yīng)，保護(hù)神經(jīng)功能[16]。此次研究中，溶栓后1 d，兩組血清IL-6、TNF-α含量均較溶栓前明顯上調(diào)，但至溶栓后7 d兩組含量均較溶栓前明顯下調(diào)，且觀察組溶栓后1、7 d的含量均明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。提示，靜脈溶栓會(huì)引起IR炎癥損傷，而丁苯酞可發(fā)揮腦IR炎癥損傷的保護(hù)作用。

腦梗死后血管內(nèi)皮細(xì)胞壞死造成血腦屏障破壞，此時(shí)損傷部位的某些物質(zhì)會(huì)逸出至血液循環(huán)中。因而檢測(cè)血清中與腦損傷相關(guān)，且靈敏度、特異度高的生物學(xué)物質(zhì)能夠用于監(jiān)測(cè)超早期腦梗死病情的嚴(yán)重程度，并評(píng)估療效。NSE為一種烯醇化酶二聚體同工酶，通常存在于神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，但在腦梗死急性期，神經(jīng)細(xì)胞受損、神經(jīng)元水腫、變性甚至壞死后，大量NSE由神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)滲出，造成外周血NSE含量顯著上調(diào)[17]。研究指出，NSE在腦損傷疾病如缺氧性腦病、癲癇持續(xù)狀態(tài)等的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中扮演著重要角色，且可用于判斷腦損傷嚴(yán)重程度、療效評(píng)估的敏感指標(biāo)[18]。S-100β蛋白為一種酸性鈣結(jié)合蛋白，參與調(diào)節(jié)基因表達(dá)、細(xì)胞增生、分化和凋亡等過(guò)程[19]。正常條件下，S-100β蛋白無(wú)法通過(guò)血腦屏障，一旦顱腦損傷，S-100β蛋白穿過(guò)血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)。S-100β蛋白被臨床認(rèn)為是腦內(nèi)反映神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷的特異性標(biāo)志物之一[20]。此次研究中，溶栓后1 d，兩組血清NSE、S-100β蛋白含量均較溶栓前明顯上調(diào)，但至溶栓后7 d兩組含量均較溶栓前明顯下調(diào)，且觀察組溶栓后1、7 d的含量均明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。提示，靜脈溶栓會(huì)引起IR損傷，而丁苯酞可有效下調(diào)NSE、S-100β蛋白表達(dá)，減輕再灌注損傷，保護(hù)腦組織。

綜上所述，丁苯酞可改善超早期腦梗死再灌注損傷患者神經(jīng)功能，其保護(hù)作用可能與減輕炎癥損傷，下調(diào)NSE、S-100β蛋白表達(dá)有關(guān)。

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（收稿日期：2019-05-16） （本文編輯：程旭然）