葉酸檢測方法研究進展

周惠來 天津市靜海區(qū)婦女兒童保健和計劃生育服務(wù)中心檢驗科 （天津 301600）

內(nèi)容提要： 葉酸屬于人體所需的一種重要維生素，對于骨髓幼細胞具有促熟的效果，并且可以對人體的細胞生長（分裂）、微生物增殖及蛋白質(zhì)合成等產(chǎn)生作用，孕婦孕期多攝入葉酸，可對新生兒唇裂、神經(jīng)管畸形等新生兒出生缺陷發(fā)生風險進行有效控制，若人體中含有的該種維生素量少，會誘發(fā)人們患有白細胞減少癥、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、巨紅細胞性貧血、抑郁癥等疾病。隨著檢查儀器、設(shè)備及試劑的不斷研發(fā)，葉酸的檢查方法越來越多，且準確性越來越高。對目前葉酸的檢查方法及相關(guān)儀器設(shè)備作一簡要綜述，以期為臨床提供一定的參考。

現(xiàn)階段隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，適用于葉酸含量檢測的方法愈來愈多[1,2]。從而依托技術(shù)可以對人們的群體性葉酸情況進行檢測，指導臨床醫(yī)師做好基于葉酸的疾病預防與控制、葉酸日均攝入量設(shè)計等工作，確保葉酸的生物學作用可以最大化的發(fā)揮出來[3,4]?；诖耍疚难芯科陂g選擇葉酸檢測工作為研究對象，對于目前研究人員針對葉酸檢測工作提出的一些檢測方法及使用的儀器設(shè)備等內(nèi)容進行了總結(jié)分析，以此為后續(xù)更多醫(yī)院臨床醫(yī)師合理利用葉酸檢測方法開展葉酸檢測工作提供指導。

1.葉酸檢測方法分析

1.1 微生物檢測法

該種檢測方法為臨床常用方法，應(yīng)用期間需要借助于啤酒小球菌屬、干酪樣乳酸桿菌等微生物，來對人體內(nèi)的葉酸進行感知檢測，其中干酪樣乳酸菌應(yīng)用于檢測工作中有著較寬的反應(yīng)譜帶，對于葉酸的檢測敏感度較高[5-7]。以往使用微生物學檢測法開展葉酸檢測工作期間，多會選擇試管法來進行操作，但是由于該檢測工作方法的操作步驟較為繁雜，后續(xù)經(jīng)過科研人員的研究，提出使用酶標儀法完成基于微生物學檢測法的葉酸檢測工作[8]。

1.2 比色法

該種檢測方法應(yīng)用期間檢測人員需要在氫氧化鈉溶液中放入葉酸，而后可對生成的紫外吸收峰值（最大）進行測定。例如可以采用茚三酮衍生法，應(yīng)用時的作用原理為檢測人員對于葉酸使用鹽酸、鋅粉進行處理，待還原為2,4,5-三氨基-6-羥基嘧啶之后，該還原物便會和茚三酮作用，最后檢驗人員可以對兩者的產(chǎn)物-紫色絡(luò)合物進行吸收峰檢測，一般情況下波長在555nm位置處進行絡(luò)合物吸收峰檢測，可獲得檢定最大值，該法主要應(yīng)用于藥劑葉酸檢測中[9]。

1.3 同位素放射免疫法

該檢測法可以對多谷氨酸葉酸進行檢測，葉酸檢出結(jié)果精準，但是在單谷氨酸葉酸檢測中的效果一般，現(xiàn)階段基于該種檢測方法原理研制成功的葉酸放射免疫試劑盒在臨床葉酸檢驗工作中有著較為廣泛且良好的應(yīng)用，實際使用時具有用時短、檢查結(jié)果準確、操作簡單等優(yōu)勢，所以可以在臨床實驗室葉酸檢測工作中多進行應(yīng)用與推廣。

1.4 色譜法

此法也為臨床應(yīng)用率較高的一種葉酸檢測法，主要對受檢者血清、紅細胞含有的葉酸量做出檢測，有著非常高的檢查靈敏度、特異度，具體檢查操作時的檢測方法為柱前、柱后兩種，作用于蔬果、保健品等檢測物的葉酸檢測工作中能夠獲得準確的檢測結(jié)果[10,11]?，F(xiàn)階段色譜法在國外的葉酸檢測中有著非常高的利用率，一般在使用時主要進行固相萃取操作，而后再對生成物采用紫外檢測器進行檢驗，多對低質(zhì)量分數(shù)物質(zhì)作以檢查[12,13]。

2.檢查儀器設(shè)備

目前醫(yī)院檢驗科進行葉酸檢測工作時，多會使用到智能紅細胞葉酸檢測儀，待醫(yī)師采集受檢者血液后，可從紅細胞中檢測葉酸含量，該設(shè)備使用期間常使用的方法為磁微粒化學發(fā)光法，輔以相配套的檢測試劑，便可得出結(jié)果，該種維生素檢測過程中的指標范圍控制在0.4ng/mL以上、不超過30ng/mL[14]；同時還可以利用生物傳感器（基于等離子體共振技術(shù)研制而成），依托等離子共振儀聯(lián)合競爭抑制法可對檢測對象的葉酸含量作以檢測，而后檢測物會與儀器傳感芯片發(fā)生作用，待生成信號后，便會傳輸至儀器中，方便檢驗科醫(yī)師直接快速、準確地把握需要檢出的葉酸含量值。

3.葉酸缺乏誘發(fā)的疾病分析

首先流產(chǎn)（習慣性），此種妊娠不良結(jié)局的發(fā)生風險高，參考臨床多名學者撰寫的習慣性流產(chǎn)與葉酸代謝之間的相關(guān)性研究的文章，可知該種妊娠情況的發(fā)生與孕婦葉酸缺乏存在關(guān)聯(lián)，使用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)技術(shù)作以檢查后，可得出習慣性流產(chǎn)的發(fā)生危險因素之一為MTHFR C677T基因[15]。孕婦懷孕后體內(nèi)缺乏葉酸，便會對基因造成不良影響，發(fā)生變異后會誘發(fā)孕婦的習慣性流產(chǎn)，所以臨床進行孕婦習慣性流產(chǎn)預防干預時需要對葉酸補充工作多進行重視。

4.小結(jié)

目前葉酸檢測期間，可選擇的工作方法類型較多，不同方法的使用條件與檢測效果之間存在較大差異，所以需要臨床檢驗科醫(yī)師可以全面掌握相關(guān)的葉酸檢測方法，從而在開展人體葉酸的臨床檢查時可以科學、合理的選擇相應(yīng)方法進行葉酸檢測工作，有效提升葉酸檢測敏感度、精確度。