基于流式細胞儀檢測下輸血前后外周血T淋巴細胞亞群的水平變化

趙振廣 沈陽愛爾眼視光醫(yī)院 （遼寧 沈陽 110002）

內(nèi)容提要： 目的：研究基于流式細胞儀檢測下紅細胞輸注無效患者輸血前后外周血T淋巴細胞亞群的水平變化。方法：采用流式細胞儀分別檢測40例紅細胞輸注無效患者輸血前后外周血T淋巴細胞亞群的水平。結(jié)果：紅細胞輸注無效組輸血后的細胞百分比細胞百分比以及比值較輸血前升高（P＜0.05），而細胞百分比無改變（P＞0.05），水平較輸血前下降（P＜0.05）；紅細胞輸注有效組細胞百分比、細胞百分比細胞百分比以及比值無變化（P＞0.05），水平較輸血前升高（P＜0.05）。結(jié)論：紅細胞輸注無效者免疫功能明顯異常細胞減少導(dǎo)致T細胞異?；罨?，可能是紅細胞輸注無效的原因之一。

成分輸血是臨床搶救及治療的重要方法。其中紅細胞懸液輸注是成分輸血中最常用的且不可替代的方法，但在輸注紅細胞懸液治療期間，會出現(xiàn)輸注無效的現(xiàn)象，現(xiàn)已引起臨床專家的關(guān)注。血紅蛋白的升高是臨床衡量輸血效果的重要指標(biāo)，因此，將血容量正常的成年貧血患者作為評價對象，若此患者輸注400mL全血或由其制備的紅細胞后，患者的血紅蛋白大約可提高10g/L，或者提高紅細胞容積0.03，若患者經(jīng)輸注后達不到以上的升高標(biāo)準(zhǔn)，則認為患者輸注無效或者效果欠佳[1]。一旦患者輸注無效，患者的淋巴細胞免疫功能就會受到影響，本研究通過采用流式細胞分析儀對輸血患者進行外周血T淋巴細胞亞群細胞的水平檢測，觀察評估輸血前后T細胞的指標(biāo)變化，并對輸注無效及輸血有效的患者變化進行分析，探討T淋巴細胞亞群CD4+CD25+Treg細胞的水平對紅細胞輸注效果的影響和機制，現(xiàn)報道如下。

1.材料與方法

1.1 臨床資料

本研究收集2017年1月～2018年6月在本院反復(fù)輸血患者80例，每例至少輸注5次，紅細胞輸注量不低于10U。再次輸注紅細胞2U后，根據(jù)24h內(nèi)血紅蛋白量檢測結(jié)果分為無效組40例和有效輸血組40例；除外繼續(xù)失血、血液滲透血管外、脫水、大量補液血液稀釋及紅細胞體外循環(huán)丟失患者；且兩組排除性別、年齡、患者的疾病種類分布影響。輸血前后檢測外周血T淋巴細胞亞群細胞的水平。

儀器試劑：血細胞分析儀稀釋劑，F(xiàn)FS，F(xiàn)BA，4-DL，CL-50，SLS，鞘液（Sysmex公司，批號：G1011）；流式細胞儀及淋巴細胞亞群試劑盒均選自美國BD公司：淋巴細胞亞群試劑盒批號51961，流式細胞儀型號FACSCalibur。

1.2 方法

1.2.2 檢測時間。輸血前后全部樣本檢測。

1.2.3 檢測方法。按照試劑盒說明書進行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

所得研究數(shù)據(jù)通過SPSS 17.0系統(tǒng)軟件進行統(tǒng)計，±s表示計量資料，通過t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

表1.輸血前后T淋巴細胞亞群變化情況(n=30,±s,%)

表1.輸血前后T淋巴細胞亞群變化情況(n=30,±s,%)

組別 CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+CD4+CD25+無效組 輸注前 52.73±4.76 25.53±5.46 23.21±3.69 1.39±0.09 11.79±2.39輸注后 58.59±6.54 33.19±6.38 22.76±4.34 2.12±0.18 10.61±1.10有效組 輸注前 54.69±3.78 23.43±2.36 23.21±3.20 1.61±0.21 10.70±1.31輸注后 52.65±4.66 23.10±2.40 23.80±2.87 1.37±0.19 18.81±3.19

3.討論

大量文獻研究報道：輸血中的紅細胞懸液具有較多免疫相關(guān)物質(zhì)種類，若患者多次輸血可導(dǎo)致患者接收外來刺激增加，進而導(dǎo)致患者的免疫系統(tǒng)活化，而被活化的免疫系統(tǒng)可提高輸入的紅細胞反應(yīng)，致使紅細胞破壞增加，導(dǎo)致患者的輸注無效或效果不佳[2]。

研究報道：異體輸血主要抑制T細胞免疫[3]。而T細胞在自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用[4]。人體免疫應(yīng)答的中心細胞為Th細胞，人體的免疫功能狀況可通過細胞比值的變化來反應(yīng)細胞比值升高或下降可反應(yīng)患者的免疫功能的亢進或低下[5]。

本研究通過對輸注無效患者進行外周T細胞的檢測結(jié)果顯示：紅細胞輸注無效患者淋巴細胞百分比淋巴細胞百分比比值等三項指標(biāo)均高于輸注有效組（P＜0.05），而有效組患者的輸血后水平顯示增多，無效組患者輸血后水平顯示減少，這一結(jié)果說明：無效組患者輸血后由于水平降低，導(dǎo)致患者的免疫耐受平衡受到破壞，T細胞的活化抑制受到影響，致使患者的免疫系統(tǒng)活化過度，產(chǎn)生大量的活化T細胞，T細胞比例的失調(diào)致使細胞因子釋放，紅細胞破壞加速，致使輸注效果不佳。

因此，本研究的結(jié)果顯示，紅細胞輸注無效者免疫功能明顯異常細胞減少導(dǎo)致T細胞異?；罨赡苁羌t細胞輸注無效的原因之一。