乳腺腫瘤微環(huán)境靶向治療的研究進(jìn)展

楊云松，江一舟，胡 欣，邵志敏

復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032

乳腺癌作為全球女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，具有增殖快、易轉(zhuǎn)移和易耐藥的特性，其病死率占所有惡性腫瘤的15%，現(xiàn)已成為惡性腫瘤中的第二大殺手［1］。腫瘤微環(huán)境是指由腫瘤細(xì)胞周?chē)募?xì)胞及非細(xì)胞成分所構(gòu)成的環(huán)境，是腫瘤細(xì)胞賴(lài)以生存的基石。腫瘤微環(huán)境作為腫瘤細(xì)胞的“土壤”，隨著腫瘤細(xì)胞的發(fā)展與其共同進(jìn)化，兩者相輔相成，共同促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。因此，靶向腫瘤細(xì)胞及腫瘤微環(huán)境近年來(lái)成為乳腺癌診療的新思路。本文就乳腺癌腫瘤微環(huán)境的基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化研究進(jìn)行綜述，進(jìn)一步闡述靶向微環(huán)境在腫瘤治療策略中的重要性，為乳腺癌的治療提供新的思路。

1 腫瘤微環(huán)境細(xì)胞對(duì)預(yù)后及療效預(yù)測(cè)的價(jià)值

1.1 免疫細(xì)胞

腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞包括腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumor-infiltrating lymphocyte，TIL）、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等。TIL在三陰性乳腺癌（triple-negative breast carcinoma，TNBC）中的預(yù)后及療效預(yù)測(cè)價(jià)值已被證實(shí)。先后有4項(xiàng)大型臨床試驗(yàn)的轉(zhuǎn)化研究提示，TIL對(duì)早期TNBC的復(fù)發(fā)和總生存有預(yù)測(cè)價(jià)值，每增加10%TIL能夠降低15%～23%的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)［2-4］。不同的是在由美國(guó)東部腫瘤協(xié)作組（Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG）開(kāi)展的兩項(xiàng)臨床試驗(yàn)ECOG 2197和ECOG 119的聯(lián)合分析中，研究者指出間質(zhì)內(nèi)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（stroma tumorinfiltrating lymphocytes，sTIL）對(duì)TNBC的預(yù)后更有預(yù)測(cè)價(jià)值，但這可能是由于這兩項(xiàng)聯(lián)合分析僅納入了481例患者，其中上皮內(nèi)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（intraepithelial tumor-infiltrating lymphocytes，iTIL）的比例僅有15%［2］。除了淋巴細(xì)胞，腫瘤微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞同樣也可以作為良好的預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo)。有研究發(fā)現(xiàn)，高CD4+T細(xì)胞、低CD8+T細(xì)胞和高CD68+巨噬細(xì)胞的患者預(yù)后更差，并且其中CD68+巨噬細(xì)胞即腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor-associated macrophage，TAM）能夠誘導(dǎo)血管新生、介導(dǎo)紫衫類(lèi)耐藥以及誘發(fā)CD8+T細(xì)胞的失活來(lái)抑制腫瘤免疫應(yīng)答［5］。TAM也存在內(nèi)部異質(zhì)性，可以分為能吞噬腫瘤細(xì)胞的M1型和促進(jìn)腫瘤惡性表型的M2型［6］。CD68+CD163+是M2型TAM的特異性表面標(biāo)志物，有研究表明，乳腺癌間質(zhì)高表達(dá)的CD68和CD163與Luminal A型乳腺癌的不良預(yù)后相關(guān)［7］。但實(shí)際最近的研究發(fā)現(xiàn)，不同的TAM亞群行使不同的功能，因此不能簡(jiǎn)單地用M1和M2型來(lái)劃分TAM亞群［8］。Azizi等［9］通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)，在乳腺癌樣本中鑒定出了3群TAM，但這3群TAM在表達(dá)譜上都與經(jīng)典的M1和M2型不完全一致，因此對(duì)于巨噬細(xì)胞M1/M2極化模型提出了質(zhì)疑。中性粒細(xì)胞被證實(shí)能夠促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移并介導(dǎo)腫瘤免疫逃逸。多項(xiàng)研究表明，化療前的高中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（neutrophil lymphocyte ratio，NLR）提示不良預(yù)后［10-11］，最近的一項(xiàng)Meta分析納入了12項(xiàng)研究得到了相似的結(jié)論［12］。中性粒細(xì)胞能夠促進(jìn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶的轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的形成以利于腫瘤細(xì)胞的定植［13］，此外研究者還發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞祖細(xì)胞能夠分化為PD-L1陽(yáng)性的中性粒細(xì)胞抑制T細(xì)胞的活化［14］。外周血淋巴細(xì)胞則與TIL呈正相關(guān)，因此低水平的外周血淋巴細(xì)胞能夠預(yù)測(cè)抑制性免疫微環(huán)境的形成［15］。NLR能夠作為簡(jiǎn)單易行同時(shí)具有良好的預(yù)測(cè)價(jià)值的標(biāo)志物。

乳腺癌腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞組分是預(yù)后及療效預(yù)測(cè)指標(biāo)，但由于免疫細(xì)胞的功能與其分布位置及亞群相關(guān)，使得不同狀態(tài)的免疫細(xì)胞有著不同的功能及預(yù)測(cè)價(jià)值。在療效預(yù)測(cè)方面，現(xiàn)有研究已經(jīng)證實(shí)了高TIL提示TNBC新輔助化療后的高病理完全緩解（pathological complete response，pCR）率［16-19］，但對(duì)于iTIL和sTIL的預(yù)測(cè)價(jià)值觀點(diǎn)不一，可能是由于主觀判讀造成的偏移。有研究提示，iTIL和sTIL均是TNBC新輔助化療pCR的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，PrECOG0105臨床試驗(yàn)的后續(xù)分析也得到了類(lèi)似結(jié)論［20-21］。此外在Loi等［22］進(jìn)行的早期TNBC輔助化療隊(duì)列研究中已證實(shí)高sTIL提示較好的預(yù)后，該團(tuán)隊(duì)還建立了結(jié)合sTIL含量的在線(xiàn)預(yù)后評(píng)估網(wǎng)站。TIL含量與化療效果相關(guān)可能涉及以下機(jī)制：①化療可以調(diào)節(jié)免疫微環(huán)境?；熕幬锟梢詺种菩缘拿庖呒?xì)胞如髓系來(lái)源的抑制性細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞［23-24］。有文獻(xiàn)報(bào)道，新輔助化療后的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)高于化療前［25］。② 化療能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞釋放抗原或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞突變產(chǎn)生新抗原來(lái)誘導(dǎo)免疫反應(yīng)［26］。Li等［27］在HER2陽(yáng)性乳腺癌隊(duì)列的血清樣本中鑒定出了13個(gè)與曲妥珠單抗療效相關(guān)的miRNA，并用其中的4個(gè)構(gòu)建了一個(gè)miRNA的模型來(lái)預(yù)測(cè)曲妥珠單抗的療效，并證實(shí)血清中的這些miRNA大部分是來(lái)自T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞。

1.2 非免疫細(xì)胞

腫瘤微環(huán)境中非免疫細(xì)胞主要包括腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（cancer-associated fibroblast，CAF）、內(nèi)皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞等，其中CAF的含量最為豐富，約占80%，并且參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及耐藥性的產(chǎn)生［28］。Chang等［29］根據(jù)成纖維細(xì)胞在體外不同濃度的血清刺激下的表達(dá)譜差異，構(gòu)建了一個(gè)基因集用以表征成纖維細(xì)胞活化、增殖并分泌膠原修復(fù)損傷的狀態(tài)，該基因集在乳腺癌、肺癌和胃癌等多個(gè)癌種中為不良預(yù)后的指標(biāo)，此外這種活躍的修復(fù)狀態(tài)還是Basal亞型乳腺癌的特征。然而，也有研究顯示，豐富的間質(zhì)成分在乳腺癌中提示較好的預(yù)后，根據(jù)反相蛋白陣列技術(shù)（reverse phase protein arrays，RPPA）對(duì)乳腺癌進(jìn)行分型，其中一型為活化型乳腺癌，這是一類(lèi)富含間質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）但缺乏TIL的乳腺癌，其基于表達(dá)譜的內(nèi)生分型主要是Luminal型乳腺癌，并且預(yù)后相對(duì)RPPA Luminal、RPPA HER2及RPPA Basal較好［30-31］。此外活化型乳腺癌富含間質(zhì)成分的同時(shí)也缺乏淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)，提示豐富的間質(zhì)成分可能是阻礙免疫細(xì)胞浸潤(rùn)的機(jī)制之一，而不同研究之間結(jié)論的差異提示腫瘤間質(zhì)同樣存在異質(zhì)性［32-33］。

2 靶向腫瘤微環(huán)境在腫瘤治療中的應(yīng)用

2.1 靶向免疫細(xì)胞

免疫細(xì)胞是微環(huán)境中能直接殺傷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞成分，但腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)多種機(jī)制塑造抑制性的免疫微環(huán)境。腫瘤的免疫微環(huán)境可以被分為以下3類(lèi)：①缺乏淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的免疫荒漠型或免疫阻隔型；②有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)但PD-1/PD-L1等免疫檢查點(diǎn)通路激活；③有活化的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)［34-35］。因此需要仔細(xì)鑒別每例患者的免疫表型，從而給予不同的免疫治療方案。例如，針對(duì)第1類(lèi)免疫表型首先需要促進(jìn)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，對(duì)于第2類(lèi)則需要免疫檢查點(diǎn)抑制劑來(lái)活化免疫細(xì)胞。

對(duì)于活化免疫細(xì)胞的研究，目前的研究重點(diǎn)是解除抑制性因素如PD-1/PD-L1通路、Treg細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞等。PD-1/PD-L1通路是目前研究較多的免疫逃逸機(jī)制之一，靶向這一通路的免疫檢查點(diǎn)抑制劑已經(jīng)被用于多種癌癥的晚期解救治療［34］。在乳腺癌中，IMpassion130臨床試驗(yàn)的中期分析已初步提示白蛋白紫杉醇聯(lián)合PD-L1抗體一線(xiàn)治療晚期TNBC能夠延長(zhǎng)PD-L1陽(yáng)性患者2年的無(wú)進(jìn)展生存期，這一研究結(jié)果提示免疫治療在TNBC中有著廣闊的前景［36］。有研究者設(shè)計(jì)了一種全新的PD-L1抗體藥物偶聯(lián)物，特異性地靶向糖基化的PD-L1不僅能夠競(jìng)爭(zhēng)性抑制其與PD-1結(jié)合，還可以促進(jìn)抗體和PD-L1的內(nèi)吞并釋放細(xì)胞毒性藥物，因此可以通過(guò)“旁觀者效應(yīng)”殺傷周邊PD-L1陰性的乳腺癌細(xì)胞［37］。

靶向巨噬細(xì)胞也是研究的熱點(diǎn)之一，TAM不僅可以促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移，還參與抑制免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)和活化［38］。CSF1/CSF1R信號(hào)軸對(duì)于TAM的招募、活化及存活有著重要的作用，針對(duì)這一信號(hào)通路的抗體和小分子抑制劑能夠抑制乳腺癌、肺癌和宮頸癌等的發(fā)生、發(fā)展［39-40］。CSF1R的小分子抑制劑BLZ945能夠抑制巨噬細(xì)胞活化為T(mén)AM，同時(shí)還增加CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)［41-42］。同時(shí)靶向TAM表面的CD40和CSF1R能夠促進(jìn)TAM分化為L(zhǎng)y6C+F4/80intTAM，并分泌TNF-α和IFN-γ活化T細(xì)胞［43］。PD-L1的表達(dá)水平在微環(huán)境細(xì)胞中也很高，有研究表明，PD-L1在免疫細(xì)胞表面的表達(dá)決定了免疫檢查點(diǎn)抑制劑的療效［44-45］。曲妥珠單抗誘發(fā)的抗體依賴(lài)的細(xì)胞吞噬作用能誘導(dǎo)TAM上調(diào)PD-L1的表達(dá)引起免疫抑制，因此對(duì)于HER2陽(yáng)性的乳腺癌可能需要聯(lián)用抗HER2靶向治療和免疫檢查點(diǎn)抑制劑來(lái)克服免疫抑制性微環(huán)境的產(chǎn)生［46］。信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（signal regulatory protein α，SIRPα）是位于巨噬細(xì)胞表面的抑制性免疫受體，其配體是CD47分子，CD47/SIRPα信號(hào)軸能夠抑制巨噬細(xì)胞吞噬CD47+腫瘤細(xì)胞，多個(gè)CD47及SIRPα抗體正在血液腫瘤及實(shí)體腫瘤中進(jìn)行臨床試驗(yàn)［47］。但由于CD47同樣在紅細(xì)胞等正常細(xì)胞表面表達(dá)，CD47抗體所造成的嚴(yán)重貧血等問(wèn)題需要注意。最近的研究發(fā)現(xiàn)，MHC-Ⅰ/LILRB1信號(hào)軸也能夠發(fā)出類(lèi)似CD47/SIRPα那樣的“Don’t eat me”信號(hào)抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用，因此同時(shí)阻斷MHC-I/LILRB1和CD47/SIRPα通路能夠最大程度活化巨噬細(xì)胞［48］。TAM在腫瘤微環(huán)境中有著重要作用，但由于其內(nèi)部異質(zhì)性，不同亞群TAM行使不同的功能，因此需要進(jìn)一步探索特異性的靶點(diǎn)。

2.2 靶向CAF

CAF作為腫瘤微環(huán)境中數(shù)量最多的細(xì)胞在腫瘤的進(jìn)展過(guò)程中有著重要作用，并且由于其基因組相對(duì)穩(wěn)定使其成為良好的靶點(diǎn)［49］。CAF主要通過(guò)旁分泌或內(nèi)分泌的方式分泌各種細(xì)胞因子，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）、血小板源性生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor，PDGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor，CTGF）、CXC族趨化因子配體12（CXC chemokine ligand 12，CXCL12）等，來(lái)促進(jìn)腫瘤的惡性表型或調(diào)控免疫微環(huán)境［49］。GPR77被證實(shí)是乳腺癌CAF中介導(dǎo)化療耐藥的重要分子，有研究發(fā)現(xiàn)，CD10+GPR77+CAF在新輔助化療后的樣本中富集，并證實(shí)該亞群通過(guò)GPR77-NF-κB軸促進(jìn)CAF分泌IL-6和IL-8（CXCL8）維持腫瘤細(xì)胞干性從而介導(dǎo)化療耐藥，靶向GPR77的單克隆抗體能夠在小鼠體內(nèi)逆轉(zhuǎn)乳腺腫瘤細(xì)胞對(duì)多西他賽的耐藥［50］。TNBC細(xì)胞可以分泌Hh配體作用于臨近的CAF激活SMO促進(jìn)FGF5的分泌，而間質(zhì)來(lái)源的FGF5又可以維持腫瘤細(xì)胞的干性。研究者同時(shí)開(kāi)展了Ⅰ期臨床試驗(yàn)，對(duì)12例晚期TNBC患者給予SMO抑制劑聯(lián)合多西他賽治療，1例患者達(dá)到完全緩解、2例患者疾病穩(wěn)定［51］。Roswall等［52］發(fā)現(xiàn)，Basal亞型乳腺癌細(xì)胞能夠分泌PDGF-CC作用于CAF，誘導(dǎo)其分泌HGF、IGFBP3和STC1來(lái)維持雌激素受體（estrogen receptor，ER）的低表達(dá)，PDGF-CC單抗則能上調(diào)ER的表達(dá)誘導(dǎo)Basal亞型乳腺癌對(duì)他莫昔芬敏感。

CAF也是微環(huán)境中參與抑制免疫細(xì)胞的重要成分，因此靶向CAF細(xì)胞來(lái)消除微環(huán)境中的免疫抑制因素是近期的研究熱點(diǎn)之一。成纖維細(xì)胞激活蛋白（fibroblast activation protein，F(xiàn)AP）陽(yáng)性CAF被報(bào)道與免疫抑制微環(huán)境密切相關(guān)，研究者鑒定出了一群在TNBC中特異性表達(dá)的CAF-S1，其特征是FAP陽(yáng)性［32］。CAF-S1可以分泌CXCL12并表達(dá)OX40L、PDL2和B7H3等，趨化CD4+T細(xì)胞并誘導(dǎo)它們成為FOXP3+Treg細(xì)胞。在胰腺癌和肝癌中CXCL12受體CXCR4的拮抗劑AMD3100能夠在小鼠體內(nèi)促進(jìn)T細(xì)胞的浸潤(rùn)并能與PD-L1抗體協(xié)同發(fā)揮作用［53-54］。也有文章報(bào)道，F(xiàn)AP+CAF通過(guò)FAP-STAT3-CCL2軸來(lái)趨化MDSC抑制免疫應(yīng)答［55］。若能靶向FAP+CAF、其分泌的效應(yīng)因子及受體如CXCL12/CXCR4則可以糾正抑制性的免疫微環(huán)境。然而在一項(xiàng)轉(zhuǎn)移性腸癌的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)AP單克隆抗體西羅珠單抗應(yīng)答率較低，未能進(jìn)一步開(kāi)展Ⅲ期臨床試驗(yàn)［56］。隨著嵌合抗原受體T細(xì)胞（chimeric antigen receptor T cell，CAR T cell）免疫療法的發(fā)明，研究人員設(shè)計(jì)了靶向FAP的CAR T細(xì)胞，在小鼠模型中證實(shí)靶向FAP+CAF能夠抑制腫瘤的增殖［57-58］。TGF-β是成纖維細(xì)胞活化為CAF并維持相應(yīng)功能的重要信號(hào)分子。FAP+PDPN+CAF能夠響應(yīng)TGF-β刺激，分泌膠原蛋白產(chǎn)生致密的ECM來(lái)阻止T細(xì)胞的浸潤(rùn)，同時(shí)還分泌一氧化氮來(lái)抑制T細(xì)胞的增殖［59］。有研究發(fā)現(xiàn)，CAF中TGF-β信號(hào)通路的激活與阻隔T細(xì)胞的浸潤(rùn)相關(guān)，阻斷這一通路能在小鼠乳腺癌、黑色素瘤模型及結(jié)腸癌的類(lèi)器官模型中促進(jìn)免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)，能夠促進(jìn)PD-L1抗體的效應(yīng)［60-61］。并且有臨床試驗(yàn)初步表明，TGF-β抗體能夠增加外周血中單核細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞的數(shù)量［62］。因此有研究者設(shè)計(jì)了抗TGF-β/PD-L1的雙特異性抗體（M7824）并在Ⅰ期臨床研究中證實(shí)其安全性，相關(guān)的Ⅱ期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中（NCT03620201）［63-64］。CAF中的TGF-β信號(hào)通路在促進(jìn)免疫逃逸中有著重要作用，因此靶向TGF-β信號(hào)通路和抗PD-L1的聯(lián)合治療方案能夠?qū)ⅰ袄淠[瘤”轉(zhuǎn)變?yōu)椤盁崮[瘤”增加免疫治療的效果。

2.3 靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞

持續(xù)的血管新生是腫瘤的特征之一，而這一過(guò)程依賴(lài)微環(huán)境中的血管內(nèi)皮細(xì)胞的活化與增殖?；罨軆?nèi)皮細(xì)胞的重要因子是VEGF，其與內(nèi)皮細(xì)胞表面的VEGF受體（VEGF receptor，VEGFR）結(jié)合激活下游信號(hào)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及遷移［15］。貝伐單抗是第一個(gè)靶向VEGFR的單克隆抗體，但由于其較小的生存獲益和心血管方面的不良反應(yīng)使其被美國(guó)食品藥品管理局撤銷(xiāo)在晚期乳腺癌中的適應(yīng)證［65］。而近年來(lái)多個(gè)VEGFR的小分子酪氨酸激酶抑制劑在多項(xiàng)臨床試驗(yàn)中取得較好的結(jié)果，其中也包括我國(guó)自主研發(fā)的阿帕替尼，其在晚期TNBC中顯示出較好的有效性和安全性［66］。Incio等［67］發(fā)現(xiàn)，肥胖患者血清中較高的IL-6和FGF-2介導(dǎo)了貝伐單抗的耐藥。Allen等［68］在小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，抗VEGFR能夠誘導(dǎo)PD-L1上調(diào)，抗VEGFR/PD-L1的聯(lián)合治療能夠增加療效同時(shí)誘導(dǎo)高內(nèi)皮靜脈的形成，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)。特異性的靶向內(nèi)皮細(xì)胞表面的LIGHT能夠重塑淋巴結(jié)的結(jié)構(gòu)，同時(shí)誘導(dǎo)高內(nèi)皮靜脈的形成并和免疫檢查點(diǎn)抑制劑產(chǎn)生協(xié)同作用［69］。抗ANGPT2/VEGFA雙特異性抗體A2V能促進(jìn)CD8+T細(xì)胞在血管內(nèi)駐留，但同時(shí)促進(jìn)其分泌IFN-γ上調(diào)腫瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)，因此聯(lián)用抗PD-1抗體能夠增加抗血管生成治療的敏感性而雙特異性抗體A2V也能促進(jìn)淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)［70］。靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞的目的已從最初阻斷腫瘤的營(yíng)養(yǎng)供給角度轉(zhuǎn)變?yōu)槭鼓[瘤血管正常化以利于免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)，從而能夠和免疫治療產(chǎn)生協(xié)同作用。

2.4 靶向ECM

ECM可以作為屏障阻擋免疫細(xì)胞及藥物，在腫瘤細(xì)胞周?chē)o腫瘤細(xì)胞提供保護(hù)，因此降解或減少ECM的產(chǎn)生也是靶向微環(huán)境的策略之一。賴(lài)氨酰氧化酶（lysyl oxidase，LOX）被證實(shí)能夠交聯(lián)膠原形成致密的間質(zhì)微環(huán)境，并通過(guò)不同的機(jī)制來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移［71-72］。因此靶向LOX如LOX酶活性抑制劑β-aminoproprionitrile及LOXL2抗體能夠抑制膠原交聯(lián)，降低間質(zhì)的致密性，從而抑制轉(zhuǎn)移微環(huán)境的形成［72-74］。在一項(xiàng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，一種銅螫合劑四硫代鉬酸銨被證實(shí)能夠抑制TNBC的LOX活性、膠原沉積和肺轉(zhuǎn)移的發(fā)生［75］。腫瘤細(xì)胞依賴(lài)整聯(lián)蛋白家族來(lái)感受ECM的變化，隨著ECM的分泌增加，整聯(lián)蛋白家族蛋白也隨之表達(dá)增加，并通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)激活腫瘤細(xì)胞的促癌信號(hào)通路，這其中研究最多、最重要的是β1整聯(lián)蛋白及其下游粘著斑激酶（focal adhesion kinase，F(xiàn)AK）［76-77］。近期Shen等［78］發(fā)現(xiàn)，ECM中的Tinagl1蛋白能夠結(jié)合TNBC表面的整聯(lián)蛋白受體并競(jìng)爭(zhēng)性抑制纖維蛋白所介導(dǎo)的整聯(lián)蛋白/FAK信號(hào)通路，外源性的給予重組Tinagl1蛋白能夠顯著抑制小鼠的肺轉(zhuǎn)移及腫瘤的生長(zhǎng)。抑制下游FAK的磷酸化同樣能夠阻止乳腺癌的增殖，在Ⅰ期臨床試驗(yàn)中入組91例晚期實(shí)體瘤患者均接受FAK的小分子抑制劑PF-00562271治療，31例患者達(dá)到疾病穩(wěn)定［76，79］。此外，靶向FAK還能夠增敏免疫治療。有研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌中過(guò)度的FAK激活阻止CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)到癌巢，而FAK抑制劑和PD-1抗體聯(lián)合治療能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞的浸潤(rùn)并延緩腫瘤的生長(zhǎng)［80］。在乳腺癌中也存在這種免疫阻隔的狀態(tài)，因此若能夠趨化CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)將能提升免疫檢查點(diǎn)抑制劑在乳腺癌中的療效。

3 總結(jié)與展望

目前的研究證實(shí)，微環(huán)境中的淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等均能夠預(yù)測(cè)預(yù)后及化療效果，并且這些細(xì)胞還有助于維持腫瘤的惡性表型，尤其在形成抑制性的免疫微環(huán)境方面有著重要作用。免疫治療是近年也是未來(lái)的研究重點(diǎn)，對(duì)于免疫治療的研究由過(guò)去增強(qiáng)免疫效應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)橄h(huán)境中的免疫抑制因素，即免疫正?；牟呗裕?4］，因此如何靶向微環(huán)境來(lái)增敏免疫治療將成為未來(lái)的研究重點(diǎn)。目前腫瘤微環(huán)境的研究難點(diǎn)在動(dòng)物模型建立難度大、費(fèi)用昂貴，但隨著人源異種移植模型和類(lèi)器官等新模型的建立以及單細(xì)胞測(cè)序和質(zhì)譜流式等技術(shù)的發(fā)展，未來(lái)將能借助新的方法來(lái)揭示腫瘤微環(huán)境中的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并從中尋找合適的治療靶點(diǎn)。