胎盤(pán)組織內(nèi)多環(huán)芳烴濃度與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性研究

喬怡然 倪文麗 孫穎 王斌 靳蕾 李智文 王琳琳 任愛(ài)國(guó)

多環(huán)芳烴(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是一類(lèi)由2個(gè)或2個(gè)以上苯環(huán)以稠環(huán)方式形成的化合物，主要來(lái)自于化石燃料(如煤炭、石油)和生物質(zhì)(如木材、煙草、秸稈)的不完全燃燒。PAHs在環(huán)境中分布廣泛，主要通過(guò)呼吸道和消化道進(jìn)入人體。大量研究顯示，PAHs具有廣泛的不良健康效應(yīng)，如增加腫瘤發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)、造成不良妊娠結(jié)局等[1,2]。唇腭裂(orofacial clefts)是發(fā)生于胚胎發(fā)育第4～12周的先天性口面部畸形。2011年我國(guó)圍產(chǎn)期出生缺陷監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，總唇裂出生患病率為11.43/萬(wàn)，僅次于先天性心臟病和多指(趾)，位居第三[3]。美國(guó)一項(xiàng)針對(duì)PAHs職業(yè)暴露的病例對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，唇裂(伴或不伴腭裂)患兒母親PAHs職業(yè)暴露水平顯著高于對(duì)照組，且具有劑量反應(yīng)關(guān)系；而單純腭裂則不存在這種關(guān)聯(lián)[4]。對(duì)山西省四縣的研究發(fā)現(xiàn)，被動(dòng)吸煙、燃煤取暖與唇腭裂發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在關(guān)聯(lián)，并且顯示出明顯的劑量反應(yīng)趨勢(shì)[5]。煙草煙霧內(nèi)含有PAHs、尼古丁、煙焦油等多種有害物質(zhì)；煤炭燃燒的煙霧中還存在大量粉塵、硫化物、氮氧化物等?；趩?wèn)卷中有關(guān)吸煙或煤炭燃燒的研究無(wú)法確定何種物質(zhì)對(duì)后代唇腭裂存在影響。由于胎兒發(fā)育所處的宮內(nèi)環(huán)境不直接暴露于外界環(huán)境，胎兒與母體通過(guò)胎盤(pán)屏障存在血液交換且具有個(gè)體差異，對(duì)孕婦外環(huán)境的暴露評(píng)估不能有效地評(píng)價(jià)胎兒的暴露情況。因此選擇適宜的生物樣品，通過(guò)檢測(cè)內(nèi)暴露標(biāo)志物，分析環(huán)境暴露與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)性更為客觀。本研究擬通過(guò)檢測(cè)胎盤(pán)組織內(nèi)PAHs濃度，分析PAHs水平與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)性。

對(duì)象與方法

一、對(duì)象

本研究采用病例對(duì)照研究設(shè)計(jì)，病例為2003-2016年間在山西省六個(gè)縣/市募集的有胎盤(pán)組織標(biāo)本的所有唇腭裂病例，共103例；從同期募集的有胎盤(pán)組織的509例無(wú)缺陷新生兒中隨機(jī)抽取103例作為對(duì)照。

納入條件為：病例為產(chǎn)前診斷引產(chǎn)或足月分娩時(shí)診斷的唇腭裂患兒，對(duì)照為無(wú)任何異常的、非醫(yī)學(xué)原因引產(chǎn)的胎兒或足月新生兒。病例與對(duì)照組母親均為當(dāng)?shù)爻Ｗ【用?在當(dāng)?shù)鼐幼　?年)，妊娠期間也在本地居??；簽署知情同意書(shū)，采集胎盤(pán)組織標(biāo)本。本研究獲得北京大學(xué)生物醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

二、方法

1.問(wèn)卷調(diào)查：調(diào)查員為當(dāng)?shù)貗D幼保健院醫(yī)生，經(jīng)過(guò)統(tǒng)一培訓(xùn)，使用結(jié)構(gòu)式調(diào)查表對(duì)病例和對(duì)照母親或家屬進(jìn)行面對(duì)面調(diào)查，內(nèi)容包括孕婦一般情況、末次月經(jīng)日期、圍孕期(孕前3個(gè)月～孕早期)疾病和藥物使用、行為習(xí)慣、飲食與葉酸增補(bǔ)、環(huán)境污染物暴露、出生缺陷家族史、產(chǎn)前診斷、胎兒性別等信息。

2.生物樣品采集：研究對(duì)象簽署知情同意書(shū)后，在引產(chǎn)或足月產(chǎn)時(shí)收集胎盤(pán)組織標(biāo)本。拭去母親面浮血，從胎兒面臍根處向外剪取約10 g胎盤(pán)組織，超純水清洗后剪碎，于凍干機(jī)中-51 °C，0.035 mbar凍干40 h。

3.儀器及試劑：本研究采用氣相色譜-質(zhì)譜法，檢測(cè)美國(guó)環(huán)保署提出的16種優(yōu)先控制的PAHs。所用儀器為Agilent GC-MS:7890B-5977A，使用電子電離轟擊源(Agilent，美國(guó))；DB-5MS毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm，弱極性色譜柱，Agilent，美國(guó))。PAHs混合標(biāo)準(zhǔn)品包括：萘(NAP)、苊烯(ANY)、苊(ACE)、芴(FLU)、菲(PHE)、蒽(ANT)、熒蒽(FLO)、芘(PYR)、苯并[a]蒽(BAA)、艸屈(CHR)、苯并[b]熒蒽(BBF)、苯并[k]熒蒽(BKF)、苯并[a]芘(BAP)、茚并[1,2,3-cd]芘(I1P)、二苯并[a,h]蒽(DahA)、苯并[ghi]芘(BghiP)，產(chǎn)自Dr.Ehrenstorfer公司(德國(guó))。PAHs的定量檢測(cè)使用三種內(nèi)標(biāo)分別為苊-D10 (ACE-D10)、蒽-D12 (ANT-D10)和艸屈-D12 (CHR-D12)，使用兩種回收率指示物菲-D10 (PHE-D10)和芘-D10 (PYR-D10)，均產(chǎn)自Dr.Ehrenstorfer公司(德國(guó))，平均回收率在80%～120%之間視為有效。

試劑包括：正己烷(HEX，農(nóng)殘級(jí))和硅膠(色譜級(jí)，平均孔徑60A，0.063-0.100 mm)購(gòu)于Merck試劑公司；二氯甲烷(DCM，色譜級(jí))購(gòu)于J.T.Baker公司；無(wú)水硫酸鈉(分析純)購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；中性氧化鋁購(gòu)于MP Biomedicals公司。凝膠滲透色譜柱型號(hào)為CLNpak EV-2000(Shodex，日本)。所有玻璃儀器、鋁箔及玻璃纖維濾膜使用前在馬弗爐內(nèi)450 ℃烘烤6 h，無(wú)水硫酸鈉需650 ℃烘烤6 h。

4.胎盤(pán)組織PAHs提取及檢測(cè)：凍干的胎盤(pán)組織置于脂肪提取器中，加入20 ng PAHs回收率指示物(PHE-D10 & PYR-D10)，使用120 ml DCM作為提取液，56 ℃水浴24 h，提取脂肪及目標(biāo)化合物。提取后將溶劑蒸發(fā)至近干，通風(fēng)櫥內(nèi)敞口靜置1 h后稱(chēng)量平底燒瓶和粗脂肪的總重量，總重與平底燒瓶質(zhì)量之差即為粗脂肪質(zhì)量。凝膠色譜儀(GPC)對(duì)樣品進(jìn)行粗凈化，DH11 (DCM:HEX 1:1 v:v)作流動(dòng)相，流速為5 ml/min，接取9～22 min流出液用于分析PAHs。使用氧化鋁-硅膠混合層析柱(內(nèi)徑6 mm)凈化樣品，裝柱填料從下到上依次為氧化鋁(6 cm，2%水去活)、硅膠(6 cm,2%水去活)和無(wú)水硫酸鈉(1 cm)。使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、電子電離轟擊源對(duì)特征離子及保留時(shí)間進(jìn)行定性和定量分析。胎盤(pán)組織中PAHs的濃度以粗脂肪質(zhì)量進(jìn)行調(diào)整，表示為ng/g脂肪。對(duì)檢測(cè)含量在定性檢出限(LOD)和定量檢出限(LOQ)之間的物質(zhì)，在統(tǒng)計(jì)分析時(shí)使用1/2 LOQ進(jìn)行調(diào)整。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS 24.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。通過(guò)χ2檢驗(yàn)比較唇腭裂病例組和對(duì)照組的母親一般特征。由于目標(biāo)物質(zhì)含量不服從正態(tài)分布，使用非參數(shù)檢驗(yàn)比較病例組與對(duì)照組之間胎盤(pán)組織PAHs濃度的差異。以對(duì)照組胎盤(pán)組織PAHs中位濃度為界值進(jìn)行分組，根據(jù)文獻(xiàn)中可能與唇腭裂發(fā)生存在關(guān)聯(lián)的因素進(jìn)行調(diào)整，采用非條件Logistic回歸進(jìn)行多因素分析，獲得調(diào)整混雜因素后污染物濃度與唇腭裂發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)。PAHs水平與唇腭裂發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)使用OR值和95%置信區(qū)間(95%CI)表示。使用Pearson相關(guān)或Spearman相關(guān)探究PAHs濃度的影響因素及PAHs濃度與孕周之間的關(guān)系。統(tǒng)計(jì)分析采用雙側(cè)檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、研究對(duì)象一般特征

103例病例(單純唇裂40例，單純腭裂6例，唇裂合并腭裂57例)及103例對(duì)照的一般特征如表1所示。病例組母親平均年齡(26.1±4.8)歲，對(duì)照組平均年齡(26.5±4.6)歲。將年齡按<25、25～29、30～34及≥35歲分為四組，病例組與對(duì)照組年齡分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.590)。病例組婦女孕前平均BMI為(23.1±4.3)kg/m2，對(duì)照組平均BMI為(22.6±3.8)kg/m2，按<18.5、18.5～23.9、≥24.0分為三組，病例組與對(duì)照組不同營(yíng)養(yǎng)狀況之間分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.565)。研究對(duì)象的孕周均在19～46周之間，病例組孕婦平均孕周為(36.7±5.6)周，對(duì)照組平均孕周為(39.5±2.8)周，以孕37周為界分為兩組，病例組與對(duì)照組之間平均孕周存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)。此外，病例組與對(duì)照組相比在胎兒性別方面男性多于女性(P=0.022)；在出生缺陷胎兒生育史、圍孕期感冒發(fā)熱、吸煙/被動(dòng)吸煙方面病例組高于對(duì)照組；在做飯燃料類(lèi)型分布上病例組更多使用煙煤作為燃料(P=0.001)。病例組與對(duì)照組之間母親職業(yè)、受教育程度、孕期是否采暖不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表1唇腭裂病例和健康對(duì)照的一般特征

Table1Characteristics of demographic and environmental exposure among orofacial cleft cases and controls [n(%)]

CharacteristicControlsCasesMaternal age (years) <2544 (43.1)46 (46.0) 25～2932 (31.4)36 (36.0) 30～3419 (18.6)12 (12.0) ≥357 (6.9)6 (6.0)Body mass index (kg/m2) <18.513 (12.9)10 (10.1) 18.5～23.958 (57.4)53 (53.5) ≥24.030 (29.7)36 (36.4)Occupation Farmer77 (74.8)66 (64.1) Other26 (25.2)37 (35.9)Education Primary or lower4 (3.9)7 (6.8) Junior high60 (58.3)60 (58.3) High school or above39 (37.9)36 (35.0)Gestational week# 19～365 (5.0)24 (24.7) ≥3795 (95.0)73 (75.3)Infant sex* Male46 (46.9)62 (63.3) Female52 (53.1)36 (36.7)History of birth-affected pregnancy* Yes0 (0.0)5 (5.0) No102 (100.0)96 (95.0)Maternal flu or fever in early pregnan-cy# Yes15 (14.7)36 (35.6) No87 (85.3)65 (64.4)Smoking or passive smoking# None68 (66.0)48 (46.6) Sometimes25 (24.3)24 (23.3) Daily10 (9.7)31 (30.1)Primary fuel used for cooking# Coal11 (11.5)31 (30.4) Other85 (88.5)71 (69.6)Conceiving during the heating season Yes51 (52.0)54 (53.5) No47 (48.0)47 (46.5)

*Compared with control group,P<0.05;#Compared with control group,P<0.01

二、胎盤(pán)組織PAHs濃度

根據(jù)定量檢出限進(jìn)行定量，五環(huán)及六環(huán)PAHs(BBF、BKF、BAP、I1P、DahA、BghiP)檢出率均低于60%，四環(huán)PAHs中CHR檢出率低于80%。由于五環(huán)及六環(huán)PAHs定量檢出率過(guò)低，僅對(duì)四環(huán)及以下的PAHs進(jìn)行描述及統(tǒng)計(jì)分析(表2)。PAHs濃度不服從正態(tài)分布，使用中位數(shù)及四分位數(shù)(P25～P75)進(jìn)行描述。從總體來(lái)看，低分子量PAHs (L-PAHs)濃度高于高分子量PAHs (H-PAHs)；不論是∑L-PAHs、∑H-PAHs還是∑PAHs，病例組胎盤(pán)組織PAHs水平低于對(duì)照組，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。L-PAHs中，病例組NAP水平低于對(duì)照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.019)；在H-PAHs中，病例組BAA水平低于對(duì)照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.048)。

表2唇腭裂病例組和健康對(duì)照組胎盤(pán)組織PAHs濃度(ng/g)

Table2Concentrations of PAHs in placental tissues of orofacial cleft cases and controls [Median (P25～P75) ](ng/g lipid)

PAHsControlsCasesL-PAHs NAP#129.4(101.7～153.6)111.1(96.4～136.7) ANY4.2(3.0～5.1)4.3(3.3～4.8) ACE34.0(27.5～41.6)32.9(26.7～38.9) FLU80.6(61.8～94.0)75.8(59.3～92.1) PHE166.3(137.0～221.0)163.8(120.2～227.7) ANT8.8(6.4～11.4)7.7(5.3～10.8)H-PAHs FLO21.2(17.5～26.7)21.8(16.5～25.9) PYR10.3(8.3～12.7)9.5(7.5～12.2) BAA#2.0(1.7～2.6)1.9(1.6～2.3) CHR3.4(2.0～4.4)3.0(1.5～4.2)∑L-PAHs*424.7(363.0～503.2)400.1(335.0～529.6)∑H-PAHs*37.1(30.7～47.3)35.8(28.2～43.8)∑PAHs*468.1(393.5～545.4)441.6(364.5～570.0)

*∑L-PAHs:Sum of NAP,ANY,ACE,FLU,PHE and ANT,∑H-PAHs:Sum of FLO,PYR,BAA and CHR,∑PAHs:Sum of all 10 detectable PAHs above;#Compared with control group,P<0.05.

以對(duì)照組胎盤(pán)組織PAHs中位濃度為界值分組進(jìn)行分析，獲得粗OR值(crude OR,cOR)及95%CI。調(diào)整胎兒性別、孕周分組、孕婦職業(yè)、吸煙與被動(dòng)吸煙、圍孕期感冒發(fā)熱后，使用非條件Logistic回歸，分析PAHs與唇腭裂的關(guān)聯(lián)，獲得調(diào)整后的OR值(adjusted OR,aOR)及95%CI，結(jié)果見(jiàn)表3。盡管NAP的cOR值為0.47 (0.26～0.82)，但調(diào)整混雜因素后NAP的水平與唇腭裂之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)(P=0.124)。∑L-PAHs、∑H-PAHs、∑PAHs的aOR值(95%CI)分別為0.74 (0.38～1.44)、1.17 (0.60～2.25)、0.71 (0.37～1.38)，PAHs高暴露與唇腭裂發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的關(guān)聯(lián)。

表3胎盤(pán)組織PAHs水平與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)

Table3Risk in association with a concentration above the median of PAHs of controls

PAHscOR (95%CI)aOR# (95%CI)L-PAHs NAP0.47 (0.26～0.82) △0.59 (0.30～1.16) ANY1.15 (0.66～1.99)1.06 (0.60～2.24) ACE0.84 (0.48～1.45)0.90 (0.46～1.75) FLU0.74 (0.43～1.29)0.90 (0.46～1.75) PHE0.94 (0.55～1.63)1.04 (0.53～2.06) ANT0.74 (0.43～1.29)0.82 (0.42～1.57)H-PAHs FLO1.10 (0.64～1.91)1.29 (0.66～2.49) PYR0.81 (0.47～1.40)1.08 (0.56～2.09) BAA0.74 (0.43～1.29)0.88 (0.45～1.70) CHR0.69 (0.40～1.19)0.84 (0.44～1.62)∑L-PAHs*0.69 (0.40～1.19)0.74 (0.38～1.44)∑H-PAHs*0.91 (0.52～1.57)1.17 (0.60～2.25)∑PAHs*0.66 (0.38～1.15)0.71 (0.37～1.38)

*∑L-PAHs:Sum of NAP,ANY,ACE,FLU,PHE and ANT,∑H-PAHs:Sum of FLO,PYR,BAA and CHR,∑PAHs:Sum of all 10 detectable PAHs above;#Adjusted for infant sex,gestational week,maternal occupation,smoking and passive smoking and flu or fever during early pregnancy.△P<0.05.

三、PAHs濃度相關(guān)因素分析

為進(jìn)一步研究影響胎盤(pán)組織PAHs濃度的相關(guān)因素，對(duì)母親職業(yè)、胎兒性別、做飯主要燃料、孕期采暖等二分類(lèi)變量使用Pearson相關(guān)分析，對(duì)母親年齡、孕前BMI、孕周等非正態(tài)分布的連續(xù)變量以及受教育程度、吸煙/被動(dòng)吸煙等級(jí)變量使用Spearman相關(guān)分析，分析這些因素對(duì)∑L-PAHs、∑H-PAHs、∑PAHs濃度的影響。如表4所示，孕期采暖與∑L-PAHs及∑PAHs升高有關(guān)，但與∑H-PAHs不存在相關(guān)性(P=0.191)；孕婦職業(yè)為農(nóng)民，其胎盤(pán)組織∑H-PAHs濃度較高(P=0.046)。

四、孕周與PAHs濃度的關(guān)系

由于對(duì)照組標(biāo)本絕大多來(lái)自于足月產(chǎn)胎兒，而部分病例來(lái)自產(chǎn)前診斷引產(chǎn)胎兒。因而，如果污染物水平隨孕周有較大變化，則會(huì)影響研究結(jié)論。因?qū)φ战M孕周分布差異較小，因此僅對(duì)病例組分析孕周與胎盤(pán)組織PAHs濃度的關(guān)系。將孕周按“20～27周”、“28～36周”“≥37周”分為三個(gè)等級(jí)，使用Spearman等級(jí)相關(guān)分析∑L-PAHs、∑H-PAHs、∑PAHs的濃度與孕周的關(guān)聯(lián)(表5)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胎盤(pán)組織內(nèi)∑L-PAHs、∑H-PAHs、∑PAHs水平隨著孕周的增加而升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P=0.005、P=0.025和P=0.006)。

表4 研究對(duì)象一般特征與PAHs濃度的關(guān)系Table 4 Correlation between PAH concentrations and maternal characteristics of demographic and environmental exposure

*Education was coded as:“Primary or lower”-1,“Junior high”-2,“High school or above”-3;#Smoking or passive smoking was coded as:“None”-1,“Sometimes”-2,“Daily”-3;△∑L-PAHs:Sum of NAP,ANY,ACE,FLU,PHE and ANT,∑H-PAHs:Sum of FLO,PYR,BAA and CHR,∑PAHs:Sum of all 10 detectable PAHs above.▲P<0.05.

表5 唇腭裂病例組胎盤(pán)組織PAHs濃度(ng/g)與孕周的關(guān)系Table 5 Relationship between concentrations (ng/g lipid) of PAHs in placental tissues of orofacial cleft cases and gestational weeks

*∑L-PAHs:Sum of NAP,ANY,ACE,FLU,PHE and ANT,∑H-PAHs:Sum of FLO,PYR,BAA and CHR,∑PAHs:Sum of all 10 detectable PAHs above.#Compared within the age group,P<0.05;△Compared within the age group,P<0.01.

討論

本研究對(duì)胎盤(pán)組織內(nèi)16種目標(biāo)PAHs進(jìn)行檢測(cè)，10種高于定量檢出限。唇腭裂病例組和對(duì)照組間10種PAHs總濃度中位數(shù)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；單因素分析時(shí)對(duì)照組萘(NAP)的濃度顯著高于病例組，但調(diào)整混雜因素后，這一聯(lián)系不再存在。按照PAHs分子量分組分析，也未發(fā)現(xiàn)病例組和對(duì)照組之間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

脂溶性有機(jī)污染物PAHs可通過(guò)胎盤(pán)屏障進(jìn)入胎兒體內(nèi)。Yu等[6]對(duì)北京地區(qū)非吸煙婦女母乳、胎盤(pán)組織、臍帶血中的PAHs含量進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，胎盤(pán)組織PAHs濃度低于臍帶血，但二者PAHs濃度之間存在正相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明胎盤(pán)組織PAHs的濃度能夠從一定程度上反映胎兒PAHs的暴露情況。盡管有研究發(fā)現(xiàn)臍帶血BKF、BAP、DahA水平高于母親血[7]，表明有機(jī)污染物可能在胎兒體內(nèi)富集，但對(duì)孕周較小的病例組較難獲取到足夠量的臍帶血標(biāo)本，因此胎盤(pán)組織是能夠獲取的與胎兒暴露較為接近的生物樣品。

本研究中唇腭裂病例組與對(duì)照組中位PAHs濃度分別為441.6 ng/g和468.1 ng/g，與同一項(xiàng)目組對(duì)神經(jīng)管缺陷病例及對(duì)照的胎盤(pán)組織PAHs濃度檢測(cè)的中位濃度值(597 ng/g和392 ng/g)[8]相近，低于母親血清PAHs中位濃度(5 839 ng/g和2 668 ng/g)[9]。對(duì)PAHs母嬰傳遞關(guān)系的研究均顯示，胎盤(pán)組織PAHs濃度低于母親血清PAHs濃度，胎盤(pán)組織PAHs濃度低于臍帶血PAHs濃度[10,11]。

對(duì)于總PAHs濃度，L-PAHs占比較大，而五環(huán)及以上PAHs的定量檢出率均較低。這種分布情況可能與PAHs暴露來(lái)源及人體吸收、代謝有關(guān)，也可能與胎盤(pán)屏障對(duì)不同種類(lèi)PAHs的阻隔作用不同有關(guān)。在Yu等[6]的研究中，胎盤(pán)組織PAHs的濃度同樣存在L-PAHs占比明顯高于H-PAHs的現(xiàn)象。敬燁[12]對(duì)上海地區(qū)PAHs母嬰暴露及傳遞情況的研究發(fā)現(xiàn)，胎盤(pán)組織H-PAHs含量明顯低于母血及臍血，認(rèn)為胎盤(pán)對(duì)H-PAHs的阻隔作用較弱。

在胎盤(pán)組織PAHs濃度影響因素的分析中，孕期采暖與∑L-PAHs和∑PAHs濃度成正相關(guān)關(guān)系。Downward等[13]發(fā)現(xiàn)不同種類(lèi)煤炭燃燒產(chǎn)生的PAHs種類(lèi)及含量具有差異，貧瘦煤燃燒能夠顯著增加空氣顆粒物中NAP水平。Geng等[14]發(fā)現(xiàn)在燃煤產(chǎn)生的PAHs中氣相PAHs占95%，NAP占比最大；顆粒相PAHs以三環(huán)及四環(huán)PAHs為主。本研究發(fā)現(xiàn)孕期采暖與∑L-PAHs之間具有顯著的正相關(guān)關(guān)系，可能提示孕期采暖會(huì)增加L-PAHs的暴露，且L-PAHs可能主要來(lái)自于煤炭的燃燒。

本研究的優(yōu)勢(shì)在于研究納入唇腭裂病例及對(duì)照各103例，與其他使用胎盤(pán)組織樣品進(jìn)行的研究相比，本研究樣本量較大，具有較好的統(tǒng)計(jì)學(xué)功效[11,15]。本研究探討了以胎盤(pán)組織PAHs作為內(nèi)暴露標(biāo)志物與唇腭裂之間的關(guān)系，使用內(nèi)暴露劑量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，避免了單純問(wèn)卷調(diào)查可能存在的回憶偏倚和報(bào)告偏倚。實(shí)驗(yàn)中使用標(biāo)準(zhǔn)樣品、空白對(duì)照、平行樣品測(cè)定、病例與對(duì)照均勻檢測(cè)等方法進(jìn)行質(zhì)量控制，同時(shí)在濃度計(jì)算過(guò)程中隱去研究對(duì)象的分組，避免了研究人員可能的暴露懷疑偏倚。

研究的局限性包括：(1)由于PAHs能夠部分通過(guò)胎盤(pán)屏障進(jìn)入胎兒，且胎盤(pán)對(duì)不同物質(zhì)的阻隔作用不同，胎盤(pán)組織中不同種類(lèi)PAHs的濃度可能與胎兒體內(nèi)的分布情況存在一定差異。(2)病例組與對(duì)照組母親職業(yè)存在明顯差異，對(duì)照組母親職業(yè)為農(nóng)民的比例較大，但社會(huì)階層或職業(yè)與污染物的暴露存在關(guān)聯(lián)[16]，可能會(huì)使胎盤(pán)組織PAHs水平較高。病例與對(duì)照組母親職業(yè)的差異也可能存在類(lèi)似健康工人效應(yīng)的選擇偏倚，即母親職業(yè)為農(nóng)民，可能暴露于高水平的PAHs中，但由于個(gè)體敏感性差異其胎兒出生缺陷率可能更低。(3)由于樣本獲取的限制，病例組胎盤(pán)組織多在胎兒引產(chǎn)時(shí)收集，而對(duì)照組多為足月產(chǎn)胎兒的胎盤(pán)組織，因此病例組孕周顯著小于對(duì)照組。理論上對(duì)照組胎盤(pán)組織具有更長(zhǎng)的蓄積時(shí)間，可能是導(dǎo)致對(duì)照組胎盤(pán)組織PAHs濃度較高的另一個(gè)原因。

總之，本研究采用胎盤(pán)組織內(nèi)PAHs作為暴露標(biāo)志，未發(fā)現(xiàn)孕期PAHs暴露與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)存在關(guān)聯(lián)性。今后可考慮采集唇腭裂診斷時(shí)的母親尿液，檢測(cè)PAHs的代謝產(chǎn)物，進(jìn)一步研究孕期PAHs暴露與唇腭裂風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)性。