益母草及其制劑的研究進(jìn)展

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1.貴州省畢節(jié)市第一人民醫(yī)院藥劑科，貴州 畢節(jié) 551700； 2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193

益母草(LeonurusjaponicusHoutt.)為唇形科(Lamiaceae)益母草屬(Leonurus)植物益母草的新鮮或干燥地上部分，被收載于《神農(nóng)本草經(jīng)》和《本草綱目》，其具有活血調(diào)瘀、利尿消腫之功效。目前臨床上有多種益母草的制劑，如膠囊、片劑、膏劑、顆粒劑和注射液等，主要用于治療痛經(jīng)、功能性子宮出血以及產(chǎn)后子宮復(fù)舊和藥物流產(chǎn)等方面[1]。近年來研究還發(fā)現(xiàn)其在心臟保護(hù)等方面也具有較好的藥理作用[2]。但隨著臨床使用量的不斷增加，其不良反應(yīng)報(bào)道也逐漸增多。本文從其益母草的化學(xué)成分、藥理、毒理和質(zhì)量控制報(bào)道等方面進(jìn)行綜述，以期能為益母草及其制劑的深入研究及臨床安全、合理用藥提供參考。

1 化學(xué)成分

益母草的化學(xué)成分研究顯示，該植物富含生物堿類、黃酮類、香豆素類和萜類等化合物[3-4]。據(jù)報(bào)道[5-6]，不同地區(qū)益母草所含的主要活性成分水蘇堿的含量有明顯差異，不同采收時(shí)間的益母草質(zhì)量也有明顯差異，其中營養(yǎng)期采收的益母草所含總黃酮類成分和主要生物堿成分均較高，其次是在童子期采收的，而在花期和果期采收的含量均較低。黃建[7]研究發(fā)現(xiàn)，開花對益母草中益母草堿和水蘇堿的含量有較大影響，開花后這兩種成分的含量明顯下降，提示開花后期不宜入藥。此外，不同的干燥方法對益母草中的主要化學(xué)成分也有明顯影響，研究顯示以整株熱風(fēng)(70℃)干燥主要成分損失較少，是益母草最佳的干燥方法[8]。

1.1 生物堿類化合物 生物堿類成分被認(rèn)為是益母草重要活性成分。益母草全草含生物堿，以益母草堿、水蘇堿、益母草啶和益母草寧為主；其中益母草堿和水蘇堿是《中國藥典》規(guī)定的質(zhì)控指標(biāo)成分。近年來，劉娟等[9]還從該植物中分離、鑒定到哈帕卜寧堿-N-氧化物及其糖苷，伊貝堿苷A、西貝素及其糖苷多個(gè)生物堿化合物。

1.2 黃酮類化合物 黃酮類化合物是益母草的主要活性成分之一。益母草中含有多種黃酮苷元及其糖苷，其中黃酮苷元包括槲皮素、5, 7, 3′, 4′, 5′五甲氧基黃酮、漢黃芩素、大豆素和蕪花素等[10]；黃酮苷化合物主要是槲皮素糖苷如蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷，山奈酚糖苷如山柰酚-3-O- ( 6′′-O-順式對香豆酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、山柰酚-3-O-蕓香糖苷，和洋芹素葡萄糖苷等[10-12]。

1.3 萜類化合物 益母草富含多種萜類化合物，其中以二萜、三萜和環(huán)烯醚萜類化合物為主[13]。二萜類主要包括益母草素、前益母草素和前益母草乙素等化合物。Giang等[14]通過現(xiàn)代分離純化手段從益母草中分離得到9個(gè)半日花烷二萜，包括leoheteronin A-E和hispanone等。周勤梅[15]等從中分離得到6個(gè)雙螺環(huán)半日花烷型二萜，1個(gè)半日花烷型雙降碳二萜和3個(gè)羽扇豆烷型降碳三萜化合物。Tasdemir等[16]分離得到多個(gè)環(huán)烯醚萜苷類化合物。

1.4 香豆素 楊槐等[17-18]通過多種柱色譜方分離法從益母草中分離得到多個(gè)香豆素類化合物，包括佛手柑內(nèi)酯、花椒毒素、異茴芹內(nèi)酯、歐芹酚甲醚、異歐前胡素、異栓翅芹醇、橙皮內(nèi)酯水合物、異橙皮內(nèi)酯和橙皮油內(nèi)酯烯等。其中大部分香豆素化合物為首次從該屬植物中分離得到。

1.5 其他化合物 包括環(huán)多肽類化合物、酚酸類化合物、甾體類化合物和揮發(fā)油類化合物等[19]。李義秀[20]從益母草中分離得到多個(gè)環(huán)形多肽類類化合物，包括益母草寧，cycloleonuripeptide E、F，cycloleonurinin和環(huán)益母草多肽A、B、C。此外，還分離得到多個(gè)酚酸化合物和β-谷甾醇等。鄧屾和張琳等[3, 21]從益母草中分離得到次黃苷、腺苷、鳥苷、左旋色氨酸、苯丙氨酸等化合物。

2 藥理、毒理作用

2.1 藥理作用

2.1.1 提取物及不同部位的主要藥理作用 益母草具有調(diào)經(jīng)活血、興奮子宮的作用，主要用于婦科疾病[22]。從悅等[23]通過比較研究益母草70%乙醇總提取物和乙酸乙酯層、HPD100乙醇洗脫不同極性部位和總生物堿對大鼠離體子宮平滑肌收縮活動(dòng)活性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)總生物堿和大極性的酚酸類化合物能顯著增強(qiáng)大鼠離體子宮平滑肌收縮活動(dòng)。林建華等[24]通過多中心臨床研究進(jìn)一步證實(shí)益母草確有緩慢而持久的縮宮作用，和縮宮素聯(lián)合能起到更好的效果，且藥物安全性良好。

姜水印等[25-26]報(bào)道益母草生物堿不但能顯著改善大鼠急性心肌梗死后的心功能，還能有效抑制去甲腎上腺素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大。益母草具有較好的改善血液流變學(xué)，改善微循環(huán)、心肌缺血和抗血栓作用等；這些作用與其所含的生物堿類、萜類、環(huán)形多肽類和香豆素類等成分密切相關(guān)[27]。閆曼等[28]研究發(fā)現(xiàn)，益母草乙醇提取物可顯著性降低高尿酸血癥大鼠的血清尿酸和肌酐的水平，升高尿液中尿酸水平，能有效促進(jìn)促進(jìn)腎臟尿酸的排泄。苗明三等[29]通過雌雄激素誘導(dǎo)法建立老齡大鼠前列腺增生模型，研究益母草總堿對老齡大鼠前列腺增生的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)益母草總堿對雌、雄激素誘導(dǎo)的老齡大鼠前列腺增生具有較好的治療效果。李發(fā)勝等[30]報(bào)道益母草多糖具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。益母草外用還具有祛濕和止癢的功效。

2.1.2 單體化合物主要藥理作用 單體化合物的藥理作用研究主要集中在益母草堿和水蘇堿上。覃美蓉等[31]通過大鼠離體子宮模型研究益母草堿和水蘇堿對縮宮素合并用藥的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低劑量時(shí)兩個(gè)化合物對縮宮素所引起的子宮收縮呈抑制作用，而高劑量呈協(xié)同作用。李霞等[32]通過給早孕大鼠口服米非司酮和米索前列醇進(jìn)行造模，以觀察益母草堿對大鼠出血量、出血時(shí)間以及子宮形態(tài)變化的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)益母草堿能顯著減少子宮出血量，縮短出血時(shí)間，明顯減少宮內(nèi)滯留物，增強(qiáng)子宮收縮，并提高血清E2水平；進(jìn)一步的機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)益母草堿能促進(jìn)大鼠子宮收縮，抑制出血的作用與其調(diào)節(jié)內(nèi)皮素介導(dǎo)的信號(hào)通路有關(guān)[33-34]。

近年來研究發(fā)現(xiàn)益母草活性成分在心腦血管方面也有較好的保護(hù)作用[35]。徐玉平等[29]通過大鼠急性心肌梗死模型研究益母草堿對急性心肌梗死造成的心肌缺血和心肌細(xì)胞損害的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)益母草堿對急性心肌缺血造成的心肌損傷有良好的預(yù)防性保護(hù)作用，其作用機(jī)制與提高心肌組織抗氧化能力有關(guān)。Liu等[36]通大鼠心肌梗死模型研究益母草堿對心肌的保護(hù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)益母草堿對缺血條件下乳鼠心肌細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用，能減少心肌梗死面積。楊槐等[18]對從益母草中分離得到的香豆素化合物進(jìn)行活性篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)異栓翅芹醇和九里香酮對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集有顯著的抑制作用。李義秀[20]等通過體外實(shí)驗(yàn)評價(jià)從益母草中分離得到的單體化合物的保肝活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)多個(gè)化合物對半乳糖胺引起的肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用；同時(shí)還發(fā)現(xiàn)部分化合物對魚藤酮損傷的PC12細(xì)胞也有保護(hù)作用。

2.2 毒理作用 孫曉倩等[37]采用經(jīng)典急性毒性實(shí)驗(yàn)法，觀察給大、小鼠灌胃益母草總生物堿后的急性毒性。結(jié)果顯示，給大、小鼠灌胃益母草總生物可造成急性毒性損傷，小鼠對益母草總生物堿提取物的LD50為5.707 g·kg-1·d-1，對大鼠的LD50為4.510 g·kg-1·d-1，死亡動(dòng)物出現(xiàn)俯臥昏睡、怠動(dòng)、呼吸急促和抽搐等癥狀。羅毅等[38]通過給小鼠連續(xù)灌胃益母草總生物堿(0.615、1.23 mg kg-1·d-1)15 d后研究總生物堿對小鼠肝、腎的亞急性毒性作用，結(jié)果顯示，僅高劑量組小鼠的AST升高，其他指標(biāo)無明顯變化，且全部給藥組小鼠肝、腎組織病理均未見明顯改變。蔡浙毅等[39]通過給大鼠灌持續(xù)灌胃不同劑量(0.8、1.6、3.2 g)的益母草水煎劑30、45或60 d后，研究其對大鼠腎功能的影響；結(jié)果顯示，益母草對腎小球無明顯的損傷，但高劑量組可引起腎間質(zhì)輕度炎癥和纖維組織增生，腎小管出現(xiàn)輕度脂肪變，提示長期服用大劑量益母草可能會(huì)導(dǎo)致腎損傷。

呂麗莉等[40]通過給予大鼠大劑量(30、60、120 g/kg)的益母草乙醇提取物90 d后，觀察其毒性作用，研究結(jié)果顯示，益母草醇提取物可增高血中尿素氮、肌酐含量，并出現(xiàn)不同程度的腎小管損傷，且這種腎損傷有明顯的劑量依賴性；黃偉等[41]進(jìn)一步對益母草乙醇提取物致腎損傷的機(jī)制進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其主要與機(jī)體的氧化應(yīng)激誘導(dǎo)腎細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)有關(guān)，和脂質(zhì)過氧化與組織內(nèi)活性分子巰基損耗有關(guān)。因此，在臨床使用益母草及其制劑的過程中，應(yīng)注意把握使用劑量和使用時(shí)間，以免發(fā)生腎損傷。

3 益母草藥代動(dòng)力學(xué)研究

晁志[42]通過高效液相色譜技術(shù)建立測定益母草堿在血漿中的分析方法，研究益母草堿在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果顯示益母草堿在大鼠體內(nèi)迅速分布，呈二室內(nèi)開放模型，代謝消除相對緩慢，生物半衰期為6 h。張金蓮[43]通過Beagle犬和大鼠研究益母草堿的藥代動(dòng)力學(xué)，結(jié)果顯示，益母草堿在Beagle犬體內(nèi)的生物利用度相對較低，僅為7.5%，半衰期約為2 h，在20 mg/kg劑量下連續(xù)給藥多次后沒有出現(xiàn)明顯的蓄積，靜脈和灌胃給藥都符合二室模型的特征；其主要代謝酶是UGT1A1。毒代動(dòng)力學(xué)研究顯示，單次給Beagle犬灌胃(80，240，800 mg/kg)益母草堿后，其原型和主要代謝產(chǎn)物的AUC隨劑量不成比例增加，相同劑量連續(xù)給藥28天后，蓄積量隨著劑量增加而增加，出現(xiàn)蓄積現(xiàn)象；但給大鼠連續(xù)灌胃給藥(200、600、2000 mg/kg)卻未見明顯蓄積；在兩種動(dòng)物中均未見明顯毒性反應(yīng)。

4 益母草及其制劑質(zhì)量控制

目前對益母草及其制劑的質(zhì)量控制主要集中在測定益母草堿和鹽酸水蘇堿的含量方面，《中國藥典》2015年版亦以這兩個(gè)成分作為質(zhì)控指標(biāo)。鄧哲等[44]通過制備多批不同品質(zhì)的益母草湯劑，建立其HPLC指紋圖譜，并對鹽酸益母草堿和鹽酸水蘇堿進(jìn)行含量測定，建立益母草制劑的質(zhì)控方法。周超等[45]采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立測定鹽酸水蘇堿與鹽酸益母草堿含量測定的方法，該方法靈敏度高，檢測限低的優(yōu)點(diǎn)。何成軍等[46]采用現(xiàn)代分離和分析手段，從益母草注射液中分離并鑒定出15個(gè)成分，其中包括9個(gè)生物堿、4氨基酸及其衍生物和2個(gè)呋喃羧酸類化合物。鐘寧遠(yuǎn)等[47]通過高效液相色譜技術(shù)，建立益母草流浸膏的指紋圖譜和多指標(biāo)成分含量分析的方法，以其中的6個(gè)特征峰作為指紋圖譜，進(jìn)一步鑒定其中3個(gè)并進(jìn)行含量測定，該方法在益母草的質(zhì)量控制方面相對更加科學(xué)、有效。然而，研究顯示[45]，目前部分益母草藥材及其制劑中的益母草堿和水蘇堿的含量都達(dá)不到藥典的要求，不同生產(chǎn)企業(yè)之間的不同制劑含量也有顯著差異，而且同一企業(yè)生產(chǎn)的不同批號(hào)之間也有較大差異。

益母草含有多種成分，而質(zhì)控體系只是簡單的以兩種成分作為指標(biāo)，不能有效的反映益母草藥材及其制劑的整體質(zhì)量水平，無法保證質(zhì)量的穩(wěn)定和臨床療效。因此，在質(zhì)量控制方面還有待于進(jìn)一步深入研究，以提高益母草藥材及其制劑的含量，促進(jìn)臨床用藥安全、有效。

5 臨床應(yīng)用

益母草的制劑主要包括益母草注射液、益母草膏、益母草口服液、益母草流浸膏、益母草顆粒、益母草膠囊等。除了單獨(dú)使用外，益母草還是多種復(fù)方的重要組成部分。

益母草注射液的主要成分是益母草總生物堿，其在產(chǎn)后出血的防治方面具有重要作用，主要用于預(yù)防和治療子宮收縮乏力所致的產(chǎn)后出血(包括晚期產(chǎn)后出血)；減少流產(chǎn)后子宮出血；和修復(fù)流產(chǎn)后子宮內(nèi)膜損傷[48]。臨床研究顯示，益母草注射液與縮宮素等藥物合用，具有協(xié)同互補(bǔ)作用，能促進(jìn)產(chǎn)后子宮復(fù)位，減少產(chǎn)后流血[24]。此外，在微創(chuàng)手術(shù)出血、月經(jīng)過多、上環(huán)、取環(huán)、子宮肌瘤核除術(shù)等方面亦有一定的療效[48-49]。除了用于婦科方面外，益母草注射液還用于血瘀高粘血癥、冠心病、急性腦梗死和動(dòng)脈硬化性腦梗死等疾病的治療[50]。

益母草片、益母草顆粒、益母草膠囊、益母草膏、益母草口服液等都是由益母草水提取物制備而成，具有活血調(diào)經(jīng)的功能，臨床主要用于血瘀所致的月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后惡露不絕，癥見經(jīng)水量少、淋漓不凈、產(chǎn)后出血時(shí)間過長及產(chǎn)后子宮復(fù)舊不全等的治療。宋志秀等[51]報(bào)道縮宮素聯(lián)合益母草顆粒可有效減少藥物流產(chǎn)陰道出血量及時(shí)間。

6 臨床不良反應(yīng)

隨著臨床對益母草及其制劑的廣泛使用，不良反應(yīng)報(bào)道也不斷增多[22, 52]。曾有報(bào)道[53]一名患者因閉經(jīng)服用大劑量(400 g)益母草煎劑后出現(xiàn)頭疼、腹痛伴周身發(fā)麻，繼而上消化道出血、陰道出血、尿血致最終搶救無效死亡。近年來有多例關(guān)于益母草制劑與西藥聯(lián)用過程中引起嘔吐、皮膚刺激、過敏性反應(yīng)、血壓升高、胸悶憋氣、顏面潮紅和宮縮疼痛等不良反應(yīng)的報(bào)道[22]。林樹松[54]報(bào)道多例產(chǎn)后精神病患者在服用含益母草的方劑后而出現(xiàn)腹痛癥狀。不良反應(yīng)往往與所服劑量密切相關(guān)，有多例報(bào)道顯示患者在過量服用益母草后，出現(xiàn)了乏力、多汗、肢體麻痹、血壓過低、呼吸加快，同時(shí)部分患者還伴有腰痛、尿血、宮血或流產(chǎn)等癥狀[22]。

7 展望

中藥是一個(gè)復(fù)制的體系，其復(fù)雜性在于所含在成分的多樣性。中藥藥效不是來自某個(gè)單一的成分，而是來自于多種成分之間的協(xié)同或拮抗作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，中藥的療效是其化學(xué)物質(zhì)作用于人體，使機(jī)體的生理機(jī)能或生化反應(yīng)發(fā)生一系列復(fù)雜變化的過程；但是，并不是所有的化學(xué)成分都能夠被吸收，只有被機(jī)體吸收的那部分物質(zhì)才能發(fā)揮藥效作用[55]。益母草所含成分多樣，其在婦科疾病治療的方面的療效得到臨床肯定。但目前僅以其所含的個(gè)別成分來反映益母草及其制劑的質(zhì)量或功效，是不夠科學(xué)的。在益母草及其制劑的質(zhì)量控制方面，以其相應(yīng)的吸收入血成分或指紋圖譜來代替單一成分可能會(huì)更為科學(xué)。

雖然人們對益母草及其制劑藥理作用的研究取得了一定成果，但對其安全性和質(zhì)量控制方面還有待進(jìn)一步研究。近年來益母草顆粒等制劑發(fā)生了多例藥物不良反應(yīng)，但其說明書中的藥物不良反應(yīng)仍是尚不明確。此外，說明書上也沒有藥物相互作用方面的信息。這些不詳細(xì)的說明書往往會(huì)增加臨床用藥的困難。

因此，在后續(xù)的研究中，筆者認(rèn)為應(yīng)加強(qiáng)對益母草及其制劑的安全性的評價(jià)，在用藥后應(yīng)注意觀察潛在的藥物不良反應(yīng)。還應(yīng)進(jìn)一步研究其潛在藥物相互作用，如藥物代謝酶與轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白等介導(dǎo)的藥物相互作用。通過上述研究不斷完善相關(guān)信息，將有利于提高臨床對益母草及其制劑的安全、合理運(yùn)用，降低臨床不良反應(yīng)的發(fā)生率和用藥風(fēng)險(xiǎn)。