茶葉中茶多酚的檢測方法研究

朱 虹

（河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河北石家莊 050026）

1 引言

茶多酚(Tea Polyphenols)又叫茶鞣質(zhì)、茶單寧，是茶葉中酚類物質(zhì)的總稱。是決定茶湯滋味、顏色的主體成分，也是決定茶葉品質(zhì)的關(guān)鍵物質(zhì)[1]。茶多酚主要包括兒茶素類、黃酮苷類、酮類以及青花素等。研究結(jié)果表明，茶多酚具有抗氧化[2]、抗腫瘤[3]、抗動(dòng)脈粥樣硬化[4]、抗炎抑菌[5]、抗輻射[6]、降血脂等作用。茶多酚除了廣泛應(yīng)用于藥品中，還可作為保鮮劑應(yīng)用于食品工業(yè)中，由于具有抗衰老、防輻射的特點(diǎn)，被添加在護(hù)膚霜、防曬霜等化妝品中。

由于茶多酚廣泛的應(yīng)用前景，目前對茶葉中茶多酚的研究受到國內(nèi)外的關(guān)注，因此準(zhǔn)確、高效、簡便的檢測方法對于茶多酚的研究具有重要意義。

2 檢測方法

2.1 滴定法

滴定法的測定原理是：茶多酚本身具有還原性，能被具有氧化性的高錳酸鉀溶液所氧化，以靛紅為指示劑，通過滴定終點(diǎn)的顏色變化，對茶多酚總量進(jìn)行測定。此方法的缺點(diǎn)是：第一，由于茶葉中含有的其他物質(zhì)也易被氧化，造成結(jié)果準(zhǔn)確度不高。第二，終點(diǎn)不易判斷。不同的檢驗(yàn)人員滴定時(shí)會對終點(diǎn)的讀取有差異，造成結(jié)果誤差偏大。雖然此法對茶多酚含量的測定有一定的誤差，但是由于實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)濟(jì)、方法簡便易行，目前仍有一些茶飲行業(yè)在應(yīng)用。

2.2 分光光度法

分光光度法的測定原理是：在適當(dāng)濃度的稀溶液中，被測物質(zhì)的吸光度與濃度之間具有一定的線性關(guān)系，通過在特定的波長處測定被測物質(zhì)的吸光度，或者在一定波長范圍內(nèi)測定被測物質(zhì)的吸收光譜，來對被測物質(zhì)進(jìn)行定量和定性的分析方法。包括可見分光光度法、紫外分光光度法、原子吸收分光光度法等。

2.2.1 可見分光光度法

可見分光光度法是傳統(tǒng)的茶多酚總量的測定方法，主要有酒石酸亞鐵比色法和福林酚比色法。酒石酸亞鐵比色法的測定原理是在一定pH條件下，茶多酚與酒石酸亞鐵絡(luò)合反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物，在540nm處測定吸光度。此方法簡便、快速、重現(xiàn)性好。但是也有缺點(diǎn)：測定結(jié)果易受pH值的影響；不同的多酚物質(zhì)對酒石酸亞鐵的顯色有差異，不同廠家、不同品質(zhì)、不同工藝、不同原料生產(chǎn)的多酚組成往往不一樣,故用此法很難找到一種比較理想的對照品[7]。福林酚比色法是目前的國標(biāo)法，其測定原理是鎢鉬酸與多酚類物質(zhì)進(jìn)行氧化還原反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，在765nm處測定吸光度。此方法簡便、快速、重現(xiàn)性好、試劑用量少，并且有研究表示此方法與酒石酸亞鐵比色法相比，測定結(jié)果更接近真實(shí)值[8]。

2.2.2 紫外分光光度法

紫外分光光度法的原理是基于茶多酚具有不飽和結(jié)構(gòu)，分別在320～380 nm(吸收帶I)和200～270 nm(吸收帶Ⅱ)有深度吸收峰。根據(jù)大多數(shù)酚類最大吸收峰波長的確定，一般選擇在205 nm和375 nm波長處進(jìn)行測定。

2.2.3 原子吸收分光光度法

原子吸收分光光度法測定茶多酚一般用間接測定法，即利用茶多酚與金屬離子絡(luò)合生成沉淀，通過測定沉淀中的金屬離子或上清液中剩余的金屬離子，來間接測定茶多酚的含量。有文獻(xiàn)報(bào)道，利用醋酸銅與多酚物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)測定茶多酚的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)茶葉中的氨基酸成分對實(shí)驗(yàn)有干擾，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果誤差很大。廖曉玲等[9]調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)條件，使多酚與堿式乙酸鉛絡(luò)合反應(yīng)生成難溶的沉淀，通過測定上清液中的鉛離子的含量，間接測定茶葉中的多酚含量，研究結(jié)果表明該法具有簡便快速、實(shí)際用量少等優(yōu)點(diǎn)，可用于微量茶多酚含量的測定。

2.3 色譜法

色譜法具有較高的靈敏度和較強(qiáng)的專屬性，因此可用于茶多酚組分的定性和定量測定。

2.3.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法具有準(zhǔn)確度高和分離度好的特點(diǎn)，是目前檢測茶葉中多酚類物質(zhì)應(yīng)用最廣泛的方法。目前國標(biāo)中對茶葉中兒茶素類的檢測就是高效液相色譜法。

目前大多數(shù)的文獻(xiàn)的樣品前處理方法是采用溶劑提取法，一般選用沸水浸提，還有模擬飲茶習(xí)慣按一定茶水比浸泡一定時(shí)間。儀器條件使用較多的檢測器是紫外檢測器和二極管陣列檢測器。色譜柱多采用反相色譜柱C18。流動(dòng)相一般采用含酸(如甲酸、乙酸、磷酸)的甲醇或乙腈的水溶液，研究表明酸的存在有助于改善某些化合物的峰型。

2.3.2 氣相色譜法

氣相色譜法對于測定茶多酚中的易揮發(fā)性成分有很好的效果，但是對于大部分多酚物質(zhì)需要進(jìn)行衍生化才能進(jìn)行測定，步驟相對較繁瑣，實(shí)際應(yīng)用不如高效液相色譜法廣泛。

2.4 其他檢測方法

除了以上介紹的一些方法，文獻(xiàn)研究中還有其他一些方法，如電化學(xué)分析法、紅外光譜法、色譜聯(lián)用技術(shù)、毛細(xì)管電泳法、核磁共振法、流動(dòng)注射法和色度分析法等，但由于分析方法或儀器設(shè)備的局限性，目前為止實(shí)際應(yīng)用較少。

3 研究展望

隨著茶多酚應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，檢測要求和儀器性能的不斷提高，茶多酚的檢測方法仍需不斷改進(jìn)與優(yōu)化，例如，提高茶多酚檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度；研究快速有效的樣品前處理方法；研究高通量快速檢測茶多酚的方法；發(fā)展新型現(xiàn)代化綠色環(huán)保檢測技術(shù)等。