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    3種軟棗獼猴桃的離體快繁技術(shù)

    2019-01-06 11:05韓德偉關(guān)麗霞
    現(xiàn)代園藝 2019年3期
    關(guān)鍵詞:軟棗離體試管

    韓德偉,關(guān)麗霞

    (遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,遼寧營口 115009)

    軟棗獼猴桃(Kiwi berry),別名:奇異莓、軟棗子、圓棗子,是獼猴桃科獼猴桃屬多年生木質(zhì)藤本植物,有“水果之王”的美稱,主要分布在我國的華北、西北、東北及長江流域,其它國家也有分布。其中,我國東北南部山區(qū)較多見,是珍貴的抗寒果樹資源,也是當(dāng)今世界新興小漿果類樹種之一。目前,丹東地區(qū)野生資源最為豐富。軟棗獼猴桃果實翠綠無毛,細(xì)嫩多汁,酸甜可口,風(fēng)味獨特,營養(yǎng)豐富。軟棗獼猴桃享有“水果之王,維C之冠”的美譽。軟棗獼猴桃不僅抗病蟲害,而且維生素C含量極高,果實無污染、口感好,全株根、莖、葉、果實均可入藥。因此,市場對軟棗獼猴桃需求量不斷增加,但軟棗獼猴桃種質(zhì)資源缺乏,采用播種方式有性繁殖難以區(qū)分雌雄株,通過嫁接、扦插等常規(guī)無性繁殖方式,繁殖系數(shù)低、周期長、繁殖困難,且品種間差異顯著,故而影響了優(yōu)良軟棗獼猴桃品種的大面積推廣。為了快速滿足市場需要,及時提供大量整齊一致、優(yōu)良的種苗,本文對3種市場深受歡迎的軟棗獼猴桃進(jìn)行了深入的離體快繁技術(shù)研究。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試材料為桓優(yōu)1號、龍成2號、魁綠。上述材料均取自遼寧營口蓋洲惠順果蔬合作社春季當(dāng)年生枝條。

    1.2 試驗方法

    在春季溫室內(nèi)軟棗獼猴桃萌動20d后,剪取直徑0.5cm左右、無病蟲害、健壯、未木質(zhì)化的枝條。剪去枝上葉片,留下0.3cm長的葉柄,切割為4~6cm左右長的莖梢,然后置于流水下沖洗0.5~1h,再在無菌操作工作臺上,用70%乙醇溶液消毒30s,2.0%NaClO浸泡消毒8~10min,最后用無菌水沖洗3次,瀝干水分備用。

    1.2.1 初代誘導(dǎo)培養(yǎng)。將備用材料,剪切成1.5~2.5cm長、帶1~2節(jié)的莖段,接種于初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)培養(yǎng)基設(shè)3個處理:①MS+BA 0.7mg/L+NAA 0.1mg/L(附加蔗糖 30g/L、瓊脂 7g/L,pH 值 5.8~6.0,下同),②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,③MS+BA1.5mg/L+NAA 0.1mg/L。3個品種3種培養(yǎng)基各接種30瓶,重復(fù)2次。培養(yǎng)條件:溫度 18~21℃、光照強度 1800~2300Lx、光照14h/d。

    1.2.2 繼代增殖培養(yǎng)。將外植體誘導(dǎo)出的腋芽,切割成含1~2節(jié)的莖段或莖尖,接種于繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基同樣設(shè)3個處理:①MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L,②MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L,③MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,3個品種3種培養(yǎng)基各接種30瓶,重復(fù)2次。培養(yǎng)條件同上。

    1.2.3 試管生根及移栽馴化。將要進(jìn)行生根培養(yǎng)的增殖苗,剪切成高3cm以上的單苗,接種到生根培養(yǎng)基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)條件同上:溫度18~21℃,光照強度20000~30000 Lx、光照14h/d。生根培養(yǎng)15d后,將根長0.5cm以上的試管苗進(jìn)行馴化移栽和養(yǎng)護(hù)管理。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 3種軟棗獼猴桃的初代誘導(dǎo)

    3種軟棗獼猴桃的外植體在初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng),7d后,陸續(xù)可見莖段葉腋處有芽萌出,隨著時間延長,芽逐漸長大,28d后長成5cm高以上新梢。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基①MS+BA 0.7mg/L+NA 0.1mg/L上,3個品種軟棗獼猴桃均可萌出1~4個不等新梢,在相同培養(yǎng)條件下,新梢生長時間長,生長速度相對較慢;在誘導(dǎo)培養(yǎng)基②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L上,3個品種軟棗獼猴桃均可萌出3~6個不等新梢,在相同培養(yǎng)條件下,新梢生長時間較短,生長速度相對較快;在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L上,3個品種軟棗獼猴桃均可萌出4~8個不等新梢,在相同培養(yǎng)條件下,新梢生長時間最長,生長速度相對最慢,且均伴有玻璃化苗產(chǎn)生。但3個品種軟棗獼猴桃在相同的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中差異不明顯。所以,MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L是3種軟棗獼猴桃誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基。

    2.2 3種軟棗獼猴桃的增殖培養(yǎng)

    轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)的增殖苗,12d后,在基部或葉腋處分化出新的芽苗,隨著時間延長,芽苗逐漸長大,30d左右統(tǒng)計各個品種在各培養(yǎng)基上的增殖情況,從而發(fā)現(xiàn)桓優(yōu)1號、魁綠2個品種在增殖培養(yǎng)基MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好,增殖系數(shù)可達(dá)8以上;龍成2號在增殖培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好,增殖系數(shù)在7以上。

    2.3 3種軟棗獼猴桃的生根培養(yǎng)及馴化移栽

    增殖苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng),7d后,苗基部形成根原基,15d左右,長成具有2~3條、0.5cm長的根,從而形成完整植株。3種軟棗獼猴桃試管苗瓶內(nèi)生根率可達(dá)98%以上。此時,將有根試管苗移至溫室,上覆遮陽網(wǎng),閉瓶煉苗3d,然后再開瓶煉苗3d,最后開蓋取苗,洗去苗基部培養(yǎng)基,移栽到滅菌過的河沙、中草炭(2∶1)的混合基質(zhì)中。栽后前期,上邊要搭小拱棚,栽培管理條件:空氣濕度80%以上,溫度20~25℃,光強5000Lx以下。1個月后,有新葉長出,代表成活,成活率在90%以上。

    3 小結(jié)與討論

    軟棗稱猴桃果實清香適口、營養(yǎng)豐富、維生素含量較高,同時是制作飲料和食品的美味原料。為滿足市場對軟棗獼猴桃種苗的需求,選育出了產(chǎn)量高、果實大、品質(zhì)好的優(yōu)良單株。為達(dá)到短期、規(guī)?;鲋?,對3個品種的優(yōu)良單株進(jìn)行了離體快繁的研究,結(jié)果表明:3種軟棗獼猴桃的初代誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;桓優(yōu)1號、魁綠2個品種的最適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L,龍成2號的最適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.05mg/L;3種軟棗獼猴桃在培養(yǎng)基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中生根率達(dá)90%以上。

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