馬騰達(dá),王慧玲,周鳳霞,王宇
(1.吉林省經(jīng)濟(jì)管理干部學(xué)院;2.長(zhǎng)春經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)實(shí)驗(yàn)學(xué)校;3.吉林省安信食品技術(shù)服務(wù)有限責(zé)任公司,吉林 長(zhǎng)春 130118)
真菌毒素是由于真菌在食品或者飼料里生長(zhǎng)所產(chǎn)生的一類(lèi)代謝的產(chǎn)物,對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物都有危害。真菌毒素可以通過(guò)飲食的方式進(jìn)入人或動(dòng)物體內(nèi),使人或動(dòng)物急性或者慢性中毒,進(jìn)而造成傷害。由于真菌毒素對(duì)人體的毒害性,為此,必須對(duì)食品中真菌毒素含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。因而,研究食品中真菌毒素的檢測(cè)新進(jìn)展是很必要的。
如今,食品中真菌毒素的檢測(cè)方法最常用的主要有:快速檢測(cè)方法、熒光光度法、免疫熒光分析法、膠體金免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析技術(shù)、免疫芯片技術(shù)、液相色譜或液質(zhì)聯(lián)用法、薄層色譜法、氣相色譜或氣質(zhì)聯(lián)用法等。
隨著科學(xué)的進(jìn)步,真菌毒素在食品檢測(cè)中的研究方法也得到發(fā)展,李小明等采用便攜式真菌毒素快速定量檢測(cè)儀對(duì)玉米中黃曲霉毒素B1和嘔吐毒素進(jìn)行定量檢測(cè),同時(shí)與酶聯(lián)免疫法對(duì)比檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果顯示:黃曲霉毒素B1快速定量檢測(cè)卡檢出限為1.75μg/kg;準(zhǔn)確性與所采用酶聯(lián)免疫法無(wú)顯著差異;檢測(cè)結(jié)果變異系數(shù)范圍在7%~11.2%,平均變異系數(shù)為8.7%;定量檢測(cè)儀臺(tái)間無(wú)顯著差異。嘔吐毒素快速定量檢測(cè)卡檢測(cè)限為0.078 mg/kg;定量檢測(cè)儀臺(tái)間無(wú)顯著差異;采用便攜式定量檢測(cè)儀具有簡(jiǎn)單、快速、成本低、能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)操作,且實(shí)時(shí)上傳數(shù)據(jù)并記錄監(jiān)測(cè)地點(diǎn)位置等優(yōu)勢(shì),具有較好的推廣與使用價(jià)值,特別適用于衛(wèi)生調(diào)查、研究、篩查等現(xiàn)場(chǎng)使用。
曹德康等利用膠體金免疫層析技術(shù)開(kāi)發(fā)出了一種快速檢測(cè)谷物中的黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的三聯(lián)檢測(cè)卡。優(yōu)化了膠體金溶液pH值、金標(biāo)抗體量及抗原包被量制備3種膠體金試紙條,將試紙條組裝成檢測(cè)卡,研究了該卡的檢測(cè)限、準(zhǔn)確度、特異性和穩(wěn)定性。結(jié)果表明:這種三聯(lián)檢測(cè)卡操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定,且能同時(shí)檢測(cè)3種真菌毒素,在谷物的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中有較好的應(yīng)用前景。
劉丹等建立花生油和玉米油中黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、單端孢霉烯族化合物等13種真菌毒素的高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法。樣品經(jīng)乙腈—水提取、MultiSep 226多功能凈化柱凈化后,分別用電噴霧正離子模式和負(fù)離子模式檢測(cè)。經(jīng)優(yōu)化后,正離子模式流動(dòng)相為含2 mmol/L甲酸銨的0.1%甲酸—甲醇溶液,負(fù)離子模式流動(dòng)相為0.1%氨水—乙腈溶液。該方法對(duì)花生油和玉米油中13種真菌毒素的檢出限為0.05~3.00μg/kg,定量限為0.10~10.00μg/kg,平均加標(biāo)回收率為66.6%~114.9%。該方法操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、重復(fù)性好,可用于花生油和玉米油的檢測(cè)。
張海霞等建立了QuEChERS結(jié)合HLC-MS對(duì)玉米中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)的方法。樣品用20mL乙腈∶水∶甲酸(50∶49∶1)震蕩提取,離心后取上清液4mL經(jīng)無(wú)水硫酸鎂、PSA、C18分散固相萃取凈化,離心,取2mL凈化液氮吹至近干。殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解,以 Waters BEHC18色譜柱分離,采用多反應(yīng)檢測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè),外標(biāo)法定量。根據(jù)各個(gè)化合物的響應(yīng)值和限量標(biāo)準(zhǔn),選擇3個(gè)不同水平添加濃度,回收率在89.7%~112.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于8.7%。7種真菌毒素在0.5~1200.0μg·kg-1時(shí)相關(guān)系數(shù)均大于0.99。方法的定性限為 0.06~10.00μg·kg-1,定量限為 0.30~32.00μg·kg-1。結(jié)果表明,該方法具有提取效率高,凈化效果好,回收率高,準(zhǔn)確靈敏等優(yōu)點(diǎn)。
近幾年對(duì)真菌毒素在食品檢測(cè)方面的研究越來(lái)越受到關(guān)注。每種方法都有各自的優(yōu)點(diǎn)和局限性,例如熒光分析法比較簡(jiǎn)便,但是準(zhǔn)確度不高;氣相色譜法準(zhǔn)確度和精密度較高,但前處理需要衍生、比較繁瑣等。所以,在今后的研究方向應(yīng)該轉(zhuǎn)為開(kāi)發(fā)出更適合的儀器和檢測(cè)的方法,通過(guò)改進(jìn)樣品前處理方法建立更快速、簡(jiǎn)單、實(shí)用的測(cè)定方法和限量標(biāo)準(zhǔn),以便更好地為食品檢測(cè)服務(wù)。