CLIA和ELISA檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物的效果探討

王磊

機(jī)體感染乙肝病毒后便會(huì)形成乙肝, 如果不予以及時(shí)的處理和臨床干預(yù), 隨著病情發(fā)展則會(huì)逐步出現(xiàn)嚴(yán)重肝炎、肝硬化, 甚至肝癌等重癥疾病［1］。因此, 及早予以準(zhǔn)確有效的乙肝病毒感染檢測(cè)有利于及早采取積極治療措施, 改善患者生存質(zhì)量。為探討CLIA及ELISA檢測(cè)乙肝病毒感染血清標(biāo)志物的效果, 對(duì)本院收治的90例乙肝患者進(jìn)行了本次研究,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2015年2月～2017年4月收治的90例乙肝患者作為研究對(duì)象, 所有患者均符合乙肝臨床診斷標(biāo)準(zhǔn), 經(jīng)臨床和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)排除其他病毒感染類型肝炎、酒精性肝炎、肝硬化等。其中男47例, 女43例, 年齡最小24歲,最大78歲, 平均年齡(45.32±11.27)歲。

1.2 方法 患者于晨起時(shí)分別抽取其空腹靜脈血3 ml, 在室溫環(huán)境下進(jìn)行離心處理后提取血清, 并置于冰箱內(nèi)保存待測(cè)。所有患者的血清平均分成A、B兩份, 并做標(biāo)記。然后分別進(jìn)行CLIA法和ELISA法檢測(cè)HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五項(xiàng)乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物指標(biāo)。CLIA法采用上海研拓生物有限公司生產(chǎn)的檢測(cè)儀及其配套試劑盒, ELISA法采用上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司生產(chǎn)的KHB-st-360型酶標(biāo)檢測(cè)儀, 試劑盒由廈門新創(chuàng)科技有限公司提供, 具體操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行, 由國(guó)家衛(wèi)生部(現(xiàn)衛(wèi)健委)臨床檢驗(yàn)中心提供的乙肝血清標(biāo)志物的定值參比血清。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)比兩種檢測(cè)方法乙肝病毒標(biāo)志物陽(yáng)性檢出率、低水平HBsAg的檢測(cè)效果、HBsAg檢測(cè)靈敏度。ELISA法陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：HBsAg、HBsAb、HBeAg標(biāo)本OD值與臨界OD值的比值≥1為陽(yáng)性, HBeAb、HBcAb標(biāo)本OD值與臨界OD值的比值≤1為陽(yáng)性。CLIA法陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：HBsAg＞0.05 IU/ml, HBsAb＞10 IU/ml, HBeAg、HBcAb標(biāo)本RLU與臨界值RLU比值≥1為陽(yáng)性, HBeAb標(biāo)本RLU與臨界值RLU比值≤1為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法乙肝病毒標(biāo)志物陽(yáng)性檢出率對(duì)比 CLIA法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性檢出率分別為62.22%(56/90)、68.89%(62/90)、30.00%(27/90), 均顯著高于ELISA 法的 46.67%(42/90)、52.22%(47/90)、16.67%(15/90), 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CLIA法檢測(cè)HBsAb、HBcAb陽(yáng)性檢出率分別為61.11%(55/90)、70.00%(63/90), 與ELISA法的60.00%(54/90)、64.44%(58/90)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 兩種檢測(cè)方法低水平HBsAg的檢測(cè)效果對(duì)比 經(jīng)確診,90例患者中低水平HBsAg患者45例。CLIA法檢出45例(100.00%), ELISA法檢出30例(66.67%), 對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其中, HBsAg水平0.06～0.2 IU/ml時(shí), CLIA法檢出8例, ELISA法檢出2例, 對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；HBsAg水平 0.21～0.5 IU/ml時(shí)：CLIA 法檢出 13例 , ELISA法檢出5例, 對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；HBsAg水平0.51～1.0 IU/ml時(shí)：CLIA法檢出19例, ELISA法檢出18例,對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；HBsAg水平1.0～3.0 IU/ml時(shí)：CLIA法檢出5例, ELISA法檢出5例, 對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。HBsAg水平＜0.5 IU/ml時(shí), CLIA法的檢測(cè)效果高于ELISA法, ＞0.5 IU/ml時(shí), 兩種方法檢測(cè)效果相同。

2.3 兩種檢測(cè)方法HBsAg檢測(cè)靈敏度對(duì)比 采用陰性血清對(duì)2.0 IU/ml HBsAg定值參比血清進(jìn)行倍比稀釋, CLIA法最低檢出濃度為0.030 IU/ml, ELISA法最低檢出濃度為0.129 IU/ml, CLIA法的靈敏度高于ELISA法。

3 討論

乙肝雖是由于乙肝病毒感染而引起的, 但是其傳染性強(qiáng),感染率高, 且容易發(fā)展為肝炎、肝硬化、肝癌等重癥疾病,嚴(yán)重影響人類健康［2］。有研究表示［3］, 有效、快速的檢驗(yàn)可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)乙肝病毒感染情況。因此, 及早準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)乙肝病毒感染情況對(duì)臨床預(yù)防和治療均具有重要意義。

CLIA法和ELISA法是臨床上檢測(cè)乙肝病毒血清標(biāo)志物的常用方法, 其中ELISA法具有快速簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn), 在乙肝疾病診治過(guò)程中具有一定效果。但是ELISA法只能對(duì)乙肝病毒血清標(biāo)志物進(jìn)行定性分析, 而不能定量分析, 臨床診斷過(guò)程中無(wú)法判斷乙肝病毒感染復(fù)制情況, 甚至有時(shí)候還會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定的現(xiàn)象。CLIA法是一種同時(shí)結(jié)合化學(xué)發(fā)光反應(yīng)和免疫反應(yīng)的檢測(cè)方法, 與ELISA法相比, CLIA法的靈敏度及準(zhǔn)確率更高、特異性更強(qiáng), 能快速進(jìn)行定量分析, 彌補(bǔ)了 ELISA 法的缺陷［4-6］。

本次研究結(jié)果顯示, CLIA法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、HBeAb的陽(yáng)性檢出率均顯著高于ELISA法, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。這主要是因?yàn)镃LIA法中的順磁性微粒是固相載體,體積小而表面積大, 因而具有更大的反應(yīng)面積。此外, 因標(biāo)志物可循環(huán)利用而能有效延長(zhǎng)發(fā)光時(shí)間, 增加強(qiáng)度, 準(zhǔn)確顯示乙肝病毒感染具體情況, 進(jìn)一步提高了檢測(cè)檢出率和靈敏度［7,8］。本次研究結(jié)果也顯示, CLIA法對(duì)低水平HBsAg的檢測(cè)效果優(yōu)于ELISA法, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)?？梢?jiàn), CLIA法可有效避免低水平HBsAg樣本的假陰性漏檢現(xiàn)象。此外, CLIA法最低檢出濃度為0.030 IU/ml, ELISA法最低檢出濃度為0.129 IU/ml, CLIA法的靈敏度高于ELISA法。

綜上所述, 在乙肝病毒標(biāo)志物臨床檢測(cè)中, CLIA法檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率更高, 且對(duì)于低水平HBsAg的檢測(cè)效果和靈敏度均優(yōu)于ELISA法, 值得臨床推廣應(yīng)用。