豬博卡病毒感染的防控技術(shù)

萬遂如

（中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會，吉林 長春 130122）

豬博卡病毒（PBOV）自2009 年由瑞典Biomstrom等從斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的仔豬淋巴結(jié)中分離鑒定出來后，近幾年來在歐洲、北美、中國、泰國、韓國、日本等地均有豬感染博卡病毒的報道，并且發(fā)現(xiàn)豬博卡病毒與其他病毒、細菌等共感染或繼發(fā)感染，對養(yǎng)豬生產(chǎn)構(gòu)成嚴重威脅。目前研究發(fā)現(xiàn)，博卡病毒在我國豬群中陽性檢出率很高，危害性日趨嚴重，應引起重視。為此，本文就豬博卡病毒感染及其防控技術(shù)談點個人意見，僅供養(yǎng)豬場參考。

1 病原體

豬博卡病毒屬于細小病毒科（Parvoviridae），細小病毒亞科（Parvovirus），博卡病毒屬（Bocavirus）成員。細小病毒科，包括2 個亞科：濃核病毒亞科感染昆蟲，細小病毒亞科感染脊椎動物。細小病毒亞科又分為細小病毒屬、博卡病毒屬、紅病毒屬、依賴性病毒屬和阿母多病毒屬等5 個屬。博卡病毒屬包括5個種：豬博卡病毒（PBOV）、牛細小病毒（BPV1）、犬細小病毒（CMV1）、大猩猩博卡病毒（GBOV1）、人博卡病毒（HBOV1-4）。豬博卡病毒是一種無囊膜的分節(jié)段的單股DNA 病毒，也是一種體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的新的細小病毒，為二十面體的小顆粒，直徑為20～26 nm，基因組為單股DNA，呈線狀。基因組由3個開放閱讀框構(gòu)成（Open Reading Frame,ORF），還有4 個功能蛋白：ORF1 編碼非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1）、ORF2編碼2 個衣殼蛋白（VP1 和VP2）、中間開放閱讀框（ORF3）編碼一個高度磷酸化核蛋白（NP1）。非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1）較為保守，而衣殼蛋白（VP1 和VP2）較易發(fā)生突變。VP2 蛋白是主要的衣殼蛋白，占全部衣殼蛋白的95%以上。病毒5＇ 端的獨特區(qū)域（ofVP1、VP1-V），具有磷脂酸A2 樣活性，這種活性與病毒的感染性有關(guān)。目前研究發(fā)現(xiàn)，豬博卡病毒的基因大小約為5.2 kb 左右，完整NP1 基因及部分VP1/VP2基因與人博卡病毒（HBOV）4 型存在遺傳相關(guān)性，大約有60%核苷酸序列同源。PBOV（中國株）與PBOV（瑞典株）、PBOV（香港株）NP1 基因之間的同源性達到90%以上。而中國株（PBOV）與大猩猩博卡病毒、犬細小病毒、牛細小病毒的NP1 基因的同源性僅為44%～55%。而PBOV 與經(jīng)典的豬細小病毒毒株之間沒有親緣關(guān)系，這表明PBOV 的NP1 基因在同種間具有較好的保護性?；贜S1 蛋白或VP 蛋白的不同，可將豬博卡病毒分為PBOV1、PBOV2、PBOV3、PBOV4 和PBOV5 五種亞型。PBOV1 又稱為豬博卡樣病毒（PBOLV），首次發(fā)現(xiàn)的PBOV2 又稱為豬細小病毒（PPV4），PBOV3 介于PBOV1 和PBOV2 之間（基因組序列為5 235 bp），PBOV3 在健康豬糞便中檢出率為19.6%，PBOV4 在中國香港出現(xiàn)（6V/7V株），PBOV5 于2012 年在我國江蘇腹瀉疾病豬體內(nèi)發(fā)現(xiàn)（JS677 株）。豬博卡病毒5 種亞型通常存在混合感染，在歐洲和北美已發(fā)現(xiàn)。

5%聚維酮碘溶液、1∶300 月芐三甲氯銨溶液、0.8%戊二醛溶液、1%菌毒敵、0.5%過氧乙酸、衛(wèi)康、強力消毒靈等消毒藥物對博卡病毒有殺滅作用，可用于豬舍、豬圈、環(huán)境及物品、用具的消毒。

2 流行特點

博卡病毒屬的病毒來源于牛，后又發(fā)現(xiàn)犬博卡病毒（MVC）。2005 年瑞士學者Allander 等從2 歲小孩的呼吸道感染鼻咽分泌物中檢測分離到人的博卡病毒（HBOV），并證實其與牛和犬的博卡病毒同源性很高。隨后澳大利亞、日本、加拿大、西班牙和中國等也先后在患呼吸道感染的嬰幼兒標本中檢測分離出人的博卡病毒。2009 年瑞典首次發(fā)現(xiàn)豬的博卡病毒，2010—2011 年羅馬尼亞學者在野豬體內(nèi)檢出了博卡病毒，檢出陽性率為12.9%。其中6～12 月齡野豬陽性率為77.06%，12～13 月齡的野豬陽性率為22.64%。2011 年我國江蘇獸醫(yī)研究所從發(fā)生圓環(huán)病毒2 型（PCV2）感染的138 份病豬樣品中檢出博卡病毒，感染陽性率為38.4%，PCV2 與PBOV 兩種病毒混合感染占23.2%。來自上海、江蘇、安徽、山東及貴州等省、市的病豬糞便樣品中檢出PBOV 感染陽性率高達63.2%；來自河北某豬場健康豬的糞便中檢出PBOV 感染陽性率為12.5%。據(jù)關(guān)茹、田益明等（2017）報道，從我國西南地區(qū)36 個豬場的豬血清與糞便樣品208 份，檢出PBOV 感染豬場陽性率為52.7%，PBOV 樣品陽性率為22.1%，其中PBOV 與傳染性胃腸炎病毒（TGEV）共感染陽性率為2.78%，PBOV 與PEDV 共感染陽性率為20%。而且證實，我國西南地區(qū)分離的PBOV 主要為PBOV3、PBOV4、PBOV5 三個基因型，PBOV 毒株存在遺傳多樣性，不同的豬場存在PBOV 不同基因型毒株混合感染。魯楊超、張晶等（2017）報道，從來自湖北、河南、河北、福建、廣東等省的31 個養(yǎng)豬場及部分屠宰場采集的799 份樣品采用PCR 方法檢測PBOV 帶毒情況。結(jié)果顯示，PBOV 總感染陽性率為37.9%，其中湖北檢出陽性率為44.2%、河北為41.48%、河南為32.31%、廣東為19.57%；糞便樣品陽性率為59.62%，血清樣品陽性率為36.5%，PBOV 與PCV2 混合感染率為3.48%。

豬博卡病毒主要通過空氣經(jīng)呼吸道感染，也可經(jīng)消化道、血液及胎盤垂直傳播。本病一年四季均可發(fā)生，但豬只發(fā)病多見于秋末、冬季與早春季節(jié)。氣溫寒冷、天氣突變以及各種應激等可誘導本病的發(fā)生與流行。目前獸醫(yī)臨床上多見PBOV 常與其他病毒共感染，研究證實PBOV 對豬只發(fā)生豬圓環(huán)病毒感染與豬病毒性腹瀉疾病具有促進和加重病情的作用。

3 癥狀特征

豬博卡病毒可引發(fā)豬只發(fā)生呼吸道疾病和腸道感染，臨床上表現(xiàn)為支氣管炎、肺炎及急性與慢性胃腸炎癥狀。仔豬出生后2～3 天發(fā)病，先嘔吐，后出現(xiàn)劇烈的腹瀉，排黃綠色、淺綠色或灰白色水樣糞便，病豬精神沉郁，脫水消瘦，被毛粗亂，不吃，一般于5～7 天內(nèi)死亡，病死率高達50%～80%。斷奶前后的仔豬發(fā)病表現(xiàn)為減食，精神不振，個別體溫升高，皮膚發(fā)紅，耳朵發(fā)紫，鼻孔流出膿性液體，腹瀉，行走后肢無力，不能站立，有時會發(fā)生突然死亡，但死亡率較低。妊娠母豬發(fā)病可見流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、食欲減少，精神不振。臨床上常見PBOV 與圓環(huán)病毒2 型、豬輸血傳播病毒（TTV1 與TTV2）、藍耳病病毒、流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒及豬瘟病毒等共感染，使病情加重，臨床癥狀復雜化，病死率增高。

4 病理變化

死亡仔豬尸體消瘦，脫水，被毛無光澤。剖檢可見胸腔積液，心外膜纖維素性滲出，有斑點狀出血。肺臟呈間質(zhì)性水腫，有大理石樣病變。肝臟表面有白色壞死點；脾臟腫大，有黑色壞死灶；腎臟呈淡黃色或黑色病變；胃黏膜呈彌漫性出血；大腸壁壞死、盲腸有紐扣狀潰瘍、小腸黏膜充血，腸壁變薄透明、無彈性；腸腔內(nèi)充滿水樣稀糞，腸系膜淋巴結(jié)腫大、腹股淋巴結(jié)腫大等。

5 診斷

根據(jù)流行特點、癥狀特征及病理變化只能作出初步診斷，確診本病一定要進行實驗室診斷。目前實驗室檢測的方法主要有病毒的細胞培養(yǎng)與鑒定、間接免疫熒光技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗、聚合酶鏈式反應（PCR）和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）等。目前使用較多的是用PCR 或RT-PCR 檢測PBOV，該方法具有特異性強、敏感性高、重復性好的特點。

6 防控技術(shù)

6.1 加強科學的飼養(yǎng)管理，全面落實各項生物安全措施

養(yǎng)豬場要堅持“管重于養(yǎng)，養(yǎng)重于防，防重于治，綜合防控”的方針、堅持實行“全進全出”分點隔離飼養(yǎng)管理制度，堅持定期消毒、驅(qū)蟲、滅鼠、殺蟲制度。嚴禁飼喂發(fā)霉變質(zhì)的飼料、嚴禁濫用抗生素、嚴禁使用違禁的飼料添加劑、嚴禁在豬場內(nèi)混養(yǎng)其它動物。重視豬只福利，保證豬舍冬暖夏涼、空氣流動、清潔干燥、飼養(yǎng)密度適中。糞污、污水與污染物要無害化處理，資源化利用；保持好生態(tài)環(huán)境，做到健康生態(tài)養(yǎng)殖。定期對員工進行養(yǎng)豬生產(chǎn)技術(shù)培訓，以提升養(yǎng)豬生產(chǎn)的技術(shù)水平，進而提高養(yǎng)豬場的生產(chǎn)效力與經(jīng)濟效益。

6.2 加強免疫預防，提高豬群的特異性免疫力

目前我國養(yǎng)豬場老病新發(fā)，新病不斷的出現(xiàn)；病原體變異加快，毒力增強，致病力增高；免疫抑制普遍存在，威脅加重；多種病原體混合感染與繼發(fā)感染越來越普遍，臨床上單一病原感染病例極少見；豬群長期帶毒，處于亞健康狀態(tài)等。由此可見，養(yǎng)豬場疫病防控形勢非常嚴峻，防控的難度也越來越大。因此，養(yǎng)豬場一定要加大防控重大疫病的力度，要根據(jù)當?shù)貏游镆卟×餍袪顩r與養(yǎng)豬場對疫病監(jiān)測和檢測評估結(jié)果，結(jié)合疫苗的性質(zhì)與作用以及豬場生產(chǎn)中存在的實際問題，制定科學合理的、符合豬場實際的免疫程序，有計劃地實施免疫預防，以提高豬群的特異性免疫力。

雖然目前還沒有可用于預防豬博卡病毒感染的疫苗，但是養(yǎng)豬場必須要重點做好豬瘟、口蹄疫、偽狂犬病、圓環(huán)病毒病、豬乙型腦炎及病毒性腹瀉（三聯(lián)活疫苗）等病毒性傳染病的免疫預防，確保豬群具有對抗主要疫病的特異性免疫力。細菌性疫苗盡可能少用。藍耳病疫苗提倡使用滅活疫苗；弱毒活疫苗是否使用，可根據(jù)豬群健康狀態(tài)評估后使用?？偟脑瓌t是使用的疫苗種類不要過多，接種疫苗的次數(shù)不要頻繁，更不要長期超大劑量接種疫苗。絕不是疫苗接種越多，劑量越大，免疫力就越強。接種疫苗過多、劑量過大，會造成豬體產(chǎn)生免疫麻痹、免疫不全，疫苗之間相互產(chǎn)生干擾，導致免疫失敗。疫苗接種時可配合使用動物免疫增強劑，比如豬用轉(zhuǎn)移因子、白細胞介素-4、MHC-Ⅱ類分子等，可與弱毒活疫苗混合注射（與滅活疫苗則分別肌注），使用方便。免疫增強劑能有效增強疫苗的免疫應答，提高疫苗免疫效果、抗體水平與免疫保護力。

6.3 重視保健預防，增強豬群的非特異性免疫力

養(yǎng)豬場在養(yǎng)豬生產(chǎn)中要重視保健預防，根據(jù)豬只生長發(fā)育不同的階段、不同的生產(chǎn)環(huán)節(jié)，以及豬場疫病發(fā)生的規(guī)律，有目的有針對性地選用某些有效藥物或保健制劑通過飼料或飲水中添加，進行藥物保健預防，可有效地提高動物機體的非特異性免疫力與抗病力，減少豬群中各種疾病的發(fā)生與流行，這也是養(yǎng)豬場一項十分重要的防控疫病的技術(shù)措施。

保健預防藥物要選用沒有毒副作用，安全效果好，不能產(chǎn)生藥物殘留與耐藥性，具有抗病毒、抗細菌、抗應激作用，并能提高動物機體免疫力與抗病力的藥物。不提倡使用抗生素類藥物，可選用中獸藥制劑，如黃芪多糖、靈芝多糖、香菇多糖、甘草多糖、豬苓多糖、清開靈、板藍根、穿心蓮、大青葉、魚腥草、金銀花、連翹、雙黃連等制劑。細胞因子制劑，如干擾素、轉(zhuǎn)移因子、白細胞介素、免疫核糖核酸、高免球蛋白等制劑。生物抗菌制劑，如溶菌酶、抗菌肽、細菌素及植物內(nèi)生菌等制劑。中藥制劑與細胞因子制劑和生物抗菌藥物可以聯(lián)合使用。既能充分發(fā)揮各種制劑的功能，又能相互協(xié)同提高藥物作用效果，而且不產(chǎn)生干擾，安全、防治效果更佳，使用方便。

保健預防方案介紹如下，養(yǎng)豬場可結(jié)合豬場生產(chǎn)實際選用。

6.3.1 初生仔豬的保健預防

方案1：仔豬出生后，用消毒紗布或毛巾將其身體擦洗干凈，然后放入30 ℃左右的保溫箱中待10分鐘，讓其適應一下外界環(huán)境與溫度。然后于1 日齡與4 日齡各肌肉注射免疫球蛋白（每頭0.25 毫升）、加轉(zhuǎn)移因子（每頭0.25 毫升）1 次，同時口服止痢寶（嗜酸乳桿菌口服液），第1 天每頭口服1 毫升，第2天每頭再口服2 毫升。

方案2：仔豬出生后，放入保溫箱中待10 分鐘，然后于1 日齡與4 日齡各肌肉注射免疫核糖核酸（每頭0.25 毫升）、加白細胞介素-4（每頭0.25 毫升）1 次；同時口服桿諾肽口服液（芽孢桿菌和變形內(nèi)毒素），第1 天每頭口服2 毫升，第2 天每頭再口服2 毫升。

方案3：仔豬出生第3 天，每頭肌注牲血素1 毫升，0.1%亞硒酸鈉-維生素E 注射液0.5 毫升，可有效預防仔豬發(fā)生缺鐵性貧血與缺硒性拉稀。

6.3.2 成年豬的保健預防

方案1：穿心蓮粉1 000 克、干擾素800 克、轉(zhuǎn)移因子400 克、溶菌酶400 克，拌入1 噸飼料中，連續(xù)飼喂12 天。

方案2：銀翹散（金銀花、連翹、甘草、桔梗、荊芥、薄荷等）600 克、干擾素800 克、白細胞介素-4（400 克）、抗菌肽400 克，拌入1 噸料中，連續(xù)飼喂12天。

方案3：黃連解毒散（黃連、黃芩、黃柏、梔子等）800 克、干擾素800 克、細菌素400 克、免疫核糖核酸500 克，拌入1 噸飼料中，連續(xù)飼喂12 天。

以上方案可用于保育仔豬、肥育豬轉(zhuǎn)群及后備種豬配種前保健預防，可有效預防豬的高熱綜合征、呼吸道疾病綜合征以及多種病毒與細菌混合感染與繼發(fā)感染的傳染性疾病。一年四季均可使用，安全、效果好。

6.3.3 生產(chǎn)母豬保健預防

方案1：黃芪多糖粉1 000 克、干擾素1 000 克、轉(zhuǎn)移因子500 克、溶菌酶500 克，拌入1 噸飼料中，連續(xù)飼喂12 天。

方案2：魚腥草粉1 500 克、干擾素1 000 克、白細胞介素-4（500 克）、抗菌肽500 克，拌入1 噸飼料中，連續(xù)飼喂12 天。

方案3：雙黃連粉（金銀花、黃芩、連翹）800 克、干擾素1 000 克、細菌素500 克、電解質(zhì)多維600克，混合對水1 噸，連續(xù)飲用12 天。

母豬妊娠2 個月、母豬產(chǎn)仔前后各1 周，都可使用上述方案進行保健預防。不僅可預防各種病毒與細菌共感染引發(fā)的疫病，防止繁殖障礙的發(fā)生，還可預防母豬產(chǎn)前產(chǎn)后便秘及預防子宮內(nèi)膜炎、陰道炎與乳房炎等“三炎征”的發(fā)生。

6.4 病豬的治療

在獸醫(yī)臨床上對疫病要做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。及時采取抗病毒療法、細胞因子療法、支持療法及對癥治療等進行綜合治療，方可取得良好的治療效果。治療方案介紹如下，可結(jié)合豬場發(fā)病狀況選用。

方案1：穿心蓮注射液（每千克體重0.1 毫升），加干擾素（每40 千克體重1 毫升），排疫肽（5 種高免球蛋白，300 千克體重5 毫升，重癥加量），混合肌注，每日1 次，連用3 天；同時肌注多西環(huán)素注射液（每千克體重0.2 毫升），每日1 次，連用3～4 天。

方案2：黃芩注射液（黃芩、柴胡、金銀花、魚腥草等，每千克體重0.2 毫升），轉(zhuǎn)移因子（每50 千克體重1 毫升，重癥加量），干擾素（每40 千克體重1毫升），混合肌注，每日1 次，連用3 天；同時肌注硫酸頭孢喹肟注射液（第4 代頭孢，每千克體重2 毫克），每日1 次，連用3～4 天。

方案3：黃芪多糖注射液（每千克體重0.1 毫升），免疫核糖核酸（每25 千克體重1 毫升，重癥加量），混合肌注，每日1 次，連用3 天；同時肌注易速達（長效頭孢噻呋晶體，每20 千克體重肌注1 毫升），肌注1 次，15 天有效。

方案4：電解質(zhì)多維800 克、葡萄糖粉800 克、溶菌酶500 克、維生素C 200 克，對水1 噸，連續(xù)飲水7 天。

病豬不吃料，下午肌注復合維生素B 注射液（每千克體重0.2 毫升），每日1 次，連用2 次。嚴重者可靜脈注射10%的葡萄糖鹽水注射液加維生素C 20毫升，每日1 次。