高效液相色譜儀常見故障及解決方法研究

摘 要：本文首先針對(duì)高效液相色譜儀的系統(tǒng)組成、工作原理進(jìn)行簡單闡述。其次，結(jié)合實(shí)際情況，對(duì)高效液相色譜儀的具體應(yīng)用情況進(jìn)行分析，并且提出現(xiàn)階段存在于其中的各種故障問題，最終提出相對(duì)應(yīng)的處理措施。

關(guān)鍵詞：高效液相；色譜儀；常見故障；解決方法

中圖分類號(hào)：TH833 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1004-7344（2018）26-0298-01

高效液相色譜儀是現(xiàn)階段在針對(duì)有機(jī)化合物進(jìn)行分離和處理時(shí)，應(yīng)用最廣泛的一種方法。這種方法在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，可以通過一系列的化學(xué)反應(yīng)，將這些有機(jī)化合物逐漸轉(zhuǎn)變成為無機(jī)物，這種方法在實(shí)際應(yīng)用時(shí)的效果普遍比較良好。與此同時(shí)，該方法在使用時(shí)的整體靈敏度比較高，同時(shí)選擇性也比較強(qiáng)。液相色譜儀在使用時(shí)，主要是檢測、處理裝置等各個(gè)零部件相互組合而成。高效液相色譜儀在實(shí)際應(yīng)用過程中，經(jīng)常出現(xiàn)一些對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生影響的因素條件，所以需要相關(guān)人員在日常應(yīng)用時(shí)，對(duì)其采取有針對(duì)性的措施進(jìn)行維護(hù)，這樣有利于保證其在使用時(shí)的效果。

1 高效液相色譜儀的系統(tǒng)組成以及工作原理分析

該系統(tǒng)在運(yùn)作過程中，其主要是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱等很多部分相互組合而成。在儲(chǔ)液器當(dāng)中存在的流動(dòng)相會(huì)直接被高壓泵作用，從而將其打入到系統(tǒng)當(dāng)中，與此同時(shí)，樣品溶液在經(jīng)過進(jìn)樣器之后會(huì)逐漸進(jìn)入到流動(dòng)相當(dāng)中。同時(shí)，可以被流動(dòng)相直接載入到色譜柱當(dāng)中，但是值得注意的問題是由于樣品溶液中很多組成部分在實(shí)際組合過程中，會(huì)由于各種情況導(dǎo)致其分配系數(shù)相互之間具有明顯的差異性。如果在兩相當(dāng)中實(shí)現(xiàn)相對(duì)運(yùn)動(dòng)的時(shí)候，需要反復(fù)多次對(duì)其進(jìn)行吸附，并且需要吸附-解吸這一分配過程的來回反復(fù)[1]。各個(gè)組別在實(shí)際劃分和移動(dòng)速度等方面都會(huì)呈現(xiàn)出比較大的差異性。如果在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，將其分離成單個(gè)組分，并且其一次從柱內(nèi)留出的時(shí)候，那么可以直接通過儀器對(duì)其進(jìn)行檢測。同時(shí)，樣品濃度可以直接被轉(zhuǎn)換成為電信號(hào)，然后經(jīng)過傳送之后到達(dá)記錄儀當(dāng)中，數(shù)據(jù)以及相對(duì)應(yīng)的信息資料可以通過圖譜的方式打印出來。

2 高效液色譜儀的具體應(yīng)用

高效液相色譜法在實(shí)際應(yīng)用過程中，其最根本的目的是為了要求樣品能夠在經(jīng)過一系列操作之后，可以形成溶液。而這一溶液的形成和使用，不會(huì)受到樣品自身揮發(fā)性的限制影響，同時(shí)流動(dòng)相在其中可以完成自我合理范圍寬度的有效選擇。同時(shí)，固定相的種類比較多，所以在針對(duì)一些非揮發(fā)性的各種分子量范圍物質(zhì)進(jìn)行分離時(shí)，可以與實(shí)際情況進(jìn)行結(jié)合。除此之外，與試樣預(yù)處理技術(shù)相互之間可以建立有效連接，并且實(shí)現(xiàn)有效配合，這樣有利于從根本上保證HPLC能夠達(dá)到非常高的分辨率，同時(shí)其正比靈敏度也相對(duì)比較高。這樣可以直接促使其實(shí)現(xiàn)分離，同時(shí)還能夠?qū)εc實(shí)際情況非常接近的物質(zhì)進(jìn)行性質(zhì)的有效測定。這樣做可以最大限度保證將復(fù)雜相體當(dāng)中的一些微量成分有效的分離出來[2]。在高效液相色譜儀實(shí)際應(yīng)用過程中，會(huì)隨著固定相的不斷進(jìn)步和發(fā)展，將其保持在具有生化物質(zhì)活性的基礎(chǔ)條件下，這樣有利于保證分離的有效落實(shí)。HPLC可以成為現(xiàn)階段在針對(duì)一些生化分析問題進(jìn)行處理時(shí)，最有效的途徑方法之一。由于HPLC這種方法在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，具有高分辨率、高靈敏度等優(yōu)勢特征，同時(shí)色譜柱可以實(shí)現(xiàn)反復(fù)有效的利用。所以這種方法被廣泛應(yīng)用到很多領(lǐng)域當(dāng)中，其中包括一些醫(yī)藥研究或者是環(huán)境分析等[3]。

3 高效液相色譜儀常見故障以及對(duì)應(yīng)處理措施

在經(jīng)過對(duì)高效液相色譜儀的日常工作情況進(jìn)行分析之后可以總結(jié)出，該儀器在日常比較常見的一些故障類型，根據(jù)這些故障類型，可以提出相對(duì)應(yīng)的解決措施。

3.1 故 障

在高效液相色譜儀的實(shí)際應(yīng)用過程中，流動(dòng)相當(dāng)中可能會(huì)存在氣泡問題，在看見氣泡之后，關(guān)閉泵意義打開泄壓閥，同時(shí)打開purge鍵按鈕，對(duì)脫氣進(jìn)行相對(duì)應(yīng)的清洗。但是仍然有很多氣泡不斷從過濾器當(dāng)中出現(xiàn)，并且直接進(jìn)入到流動(dòng)相當(dāng)中。針對(duì)這一現(xiàn)象，無論在實(shí)際操作中打開purge鍵多少次，都不能夠完全將氣泡給清除掉。

3.2 故障原因

在針對(duì)這一故障進(jìn)行深入分析之后可以得出，由于過濾器長期都處于乙酸銨等一些緩沖液當(dāng)中，所以過濾器內(nèi)部會(huì)由于霉菌的影響，而導(dǎo)致其出現(xiàn)過多的細(xì)菌，最終導(dǎo)致菌團(tuán)的形成。一旦形成菌團(tuán)，那么勢必會(huì)對(duì)過濾器產(chǎn)生嚴(yán)重的阻塞影響，緩沖液很難在這種狀態(tài)下很仍然保持順暢的裝百經(jīng)過過濾器。因此，就導(dǎo)致空氣在泵的壓力影響和作用下，經(jīng)過過濾器之后直接進(jìn)入到流動(dòng)相當(dāng)中。

3.3 解決措施

在針對(duì)上述問題進(jìn)行處理的時(shí)候，可以結(jié)合實(shí)際情況，將過濾器在5%的硝酸溶液當(dāng)中浸泡，在浸泡之后，可以利用超聲對(duì)其進(jìn)行清晰。同時(shí)，還可以將過濾器直接放置在5%硝酸溶液當(dāng)中浸泡12～36h。在這之后，可以對(duì)其輕輕震蕩幾次，之后可以利用純水對(duì)過濾器進(jìn)行清晰。與此同時(shí)，打開泄壓閥，同時(shí)開啟purge鍵，這樣有利于脫氣的清晰。在清晰時(shí)，如果仍然發(fā)現(xiàn)氣泡出現(xiàn)，那么可以將過濾器繼續(xù)浸泡在硝酸溶液當(dāng)中，一直到?jīng)]有氣泡出現(xiàn)為止[4]。在這種方法實(shí)際應(yīng)用過程中，如果氣泡在其中不會(huì)出現(xiàn)，那么就意味著過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已經(jīng)被硝酸溶液徹底破壞，這樣流動(dòng)相就可以順暢通過過濾器。與此同時(shí)，可以打開泄壓閥，打開泵，并且將其流動(dòng)速度調(diào)整到1.0～3.0ml/min，利用純水對(duì)其進(jìn)行沖洗，基本上沖洗1h左右即可。這樣不僅有利于保證過濾器的干凈度，而且在泄壓閥關(guān)閉之后，可以利用純甲醇對(duì)其進(jìn)行沖洗，時(shí)間控制在0.5h左右即可。

除此之外，高效液相色譜儀在實(shí)際應(yīng)用過程中，還存在各種其他的故障。比如湖南省某單位在針對(duì)這一問題進(jìn)行分析時(shí)，其發(fā)現(xiàn)高效液相色譜儀常見故障當(dāng)中包括壓力高這一問題。導(dǎo)致這一現(xiàn)象出現(xiàn)的根本原因主要體現(xiàn)在流動(dòng)相具體使用缺乏合理性、緩沖結(jié)晶鹽會(huì)出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。除此之外，樣品與流動(dòng)相相互之間并不能夠形成有效的溶合，色譜柱自身的性能越來越低等。這些原因都有可能會(huì)導(dǎo)致其在實(shí)際應(yīng)用時(shí)出現(xiàn)壓力高的現(xiàn)象。針對(duì)這一故障在處理時(shí)，可以利用符合實(shí)際要求的流動(dòng)相，并且對(duì)其進(jìn)行有效的沖洗，保證其表面的干凈整潔。與此同時(shí)，還可以對(duì)流動(dòng)相進(jìn)稀釋或者是改變處理，這樣有利于促使樣品與流動(dòng)相相互之間形成有效的溶合。

4 結(jié)束語

綜上所述，在高效液相色譜儀的日常使用過程中，保養(yǎng)工作至關(guān)重要。如果在使用時(shí)，并沒有意識(shí)到定期維修養(yǎng)護(hù)的重要性，那么會(huì)很容易讓空氣進(jìn)入到輸液系統(tǒng)當(dāng)中，這樣就會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)在運(yùn)作時(shí)受到嚴(yán)重的影響。與此同時(shí)，在針對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)，要保證樣品當(dāng)中的所有雜質(zhì)全部都處理干凈，盡可能減少對(duì)色譜柱的污染影響。在保證延長色譜柱使用壽命的基礎(chǔ)上，能夠盡可能避免故障的發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

[1]卓宇楨.高效液相色譜儀常見故障原因分析和解決方法[J].化工管理，2015（23）：44.

[2]王 媚.高效液相色譜儀的日常維護(hù)及常見故障[J].現(xiàn)代婦女（下旬），2014（11）：494.

[3]徐曉玲，樓雪芳.高效液相色譜儀使用中的常見故障及維護(hù)方法[J].山東化工，2014，43（09）：43～48.

[4]劉春偉.高效液相色譜儀使用中常見故障及對(duì)策[J].商品與質(zhì)量，2012（S5）：326.

收稿日期：2018-8-4

作者簡介：辛文慧（1979-），女，本科。