自然放牧和TMR育肥對(duì)絨山羊成年母羊消化道酶活性的影響

■溫 琦 格日樂瑪 閆素梅

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

阿爾巴斯白絨山羊是世界著名的絨肉兼用型品種。但是近年來，隨著羊絨價(jià)格不斷下降和羊肉需求量不斷提高，使得羊肉生產(chǎn)成為飼養(yǎng)絨山羊新的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)。另一方面，在正常的絨山羊生產(chǎn)中，每年有30%左右的成年母羊被淘汰作為肉用，成為羊肉生產(chǎn)的重要來源。然而，傳統(tǒng)的天然放牧育肥使得草場(chǎng)生態(tài)受到了嚴(yán)重破壞。因此，改變傳統(tǒng)的飼養(yǎng)方式，對(duì)淘汰羊?qū)嵤┒唐诘纳犸曈食蔀榱四壳爸饕挠史绞?，這也是保證絨山羊產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要途徑。消化道酶活性可間接反映動(dòng)物對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化程度，與其生長(zhǎng)育肥性能和屠宰性能密切相關(guān)。課題組前期研究了放牧育肥與舍飼TMR育肥對(duì)絨山羊母羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與放牧育肥相比，舍飼育肥顯著提高母羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，這可能與兩組羊的腸道消化酶活性不同有關(guān)。因此，本試驗(yàn)主要研究不同育肥方式[自然放牧育肥（NG）和TMR育肥（TMR）]下阿爾巴斯白絨山羊母羊消化道酶活性的變化規(guī)律，研究結(jié)果為深入研究絨山羊消化生理機(jī)制、制定絨山羊舍飼育肥方案提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧

試驗(yàn)在內(nèi)蒙古白絨山羊種羊場(chǎng)進(jìn)行，采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，變量是育肥方式，即NG和TMR。從淘汰的成年母羊群中選擇年齡、體重相近的5歲成年母羊60只隨機(jī)分為兩組，每組30只，一組圈養(yǎng)飼喂TMR，即TMR組，參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 816-2004）配制TMR，每天飼喂2次，上、下午各1次。預(yù)飼期15 d，正式育肥期60 d，分為育肥前期(1～30 d，8月份)和育肥后期(31～60 d，9月份)兩個(gè)階段，育肥前期和后期每天每只羊飼喂的風(fēng)干料量分別為2.06 kg和2.19 kg，自由采食，自由飲水。TMR組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1；另一組按照原場(chǎng)的飼喂方式在天然草場(chǎng)放牧，即NG組，每天上午7：00出牧，下午6：00歸牧，采食的牧草營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表1 TMR組母羊日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 自然放牧組母羊采食牧草營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 樣品的采集

育肥試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別從每組母羊中隨機(jī)選取6只母羊禁食24 h、禁水2 h后進(jìn)行屠宰。在頸靜脈處放血處死、立即打開腹腔、取出內(nèi)臟，在冰盤上小心剝除胰腺的脂肪組織和結(jié)締組織后用錫箔紙包好，立即放入液氮中冷凍。同時(shí)參考《家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)》迅速在冰盤上剪取十二指腸、空腸、回腸各腸段約7 cm左右，并用預(yù)冷的生理鹽水將各腸段上的食糜沖洗干凈，用錫箔紙包好放入液氮中快速冷凍。所有樣品轉(zhuǎn)入-20℃低溫凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 樣品的處理

1.2.2.1 小腸黏膜的處理

將冷凍的組織樣品置于4℃冰箱中，待樣品完全解凍后放在保鮮膜上沿腸壁縱向剪開，用載玻片刮下黏膜。準(zhǔn)確稱取腸黏膜的重量，按質(zhì)量體積比1∶9的比例加入勻漿介質(zhì)在玻璃勻漿器中勻漿(整個(gè)操作過程都在冰浴條件下進(jìn)行)。充分勻漿后將勻漿液倒入離心管中，3 000 r/min 4℃條件下離心10 min，收集上清并迅速將上清液分裝成若干份貯存于-20℃中，以備進(jìn)行酶活性分析。

1.2.2.2 胰腺的處理

將冷凍的胰臟置于4℃冰箱中解凍，待樣品將要完全解凍時(shí)從頭、體、尾三個(gè)部位剪取約0.5 g左右的胰腺，并用分析天平準(zhǔn)確稱重。按質(zhì)量體積比1∶9的比例加入勻漿介質(zhì)在玻璃勻漿器中勻漿(整個(gè)操作過程都在冰浴條件下進(jìn)行)。充分勻漿后將勻漿液倒入離心管中3 000 r/min 4℃條件下離心10 min，收集上清并迅速將上清液分裝成若干份貯存于-20℃中，以備進(jìn)行酶活性分析。

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 測(cè)定指標(biāo)

十二指腸、空腸、回腸、胰腺的淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性；十二指腸的糜蛋白酶活性。

1.3.2 測(cè)定方法

測(cè)試方法參照南京建成生物工程研究所提供的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶測(cè)試盒說明書進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.0軟件的統(tǒng)計(jì)程序進(jìn)行T檢驗(yàn)分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果P＜0.01表示組間差異極顯著，P＜0.05表示組間差異顯著，0.05≤P＜0.10表示組間差異趨于顯著。

2 結(jié)果

2.1 淀粉酶活性（見表3）

表3 不同育肥方式對(duì)母羊小腸及胰腺淀粉酶活性的影響(U/mg prot.)

從表3可以看出，不同育肥方式對(duì)母羊小腸淀粉酶活性無顯著性影響，但對(duì)于胰腺淀粉酶活性有顯著的影響。TMR組母羊胰腺淀粉酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.02）；十二指腸、空腸及回腸淀粉酶活性略高于NG組，但是差異不顯著（P=0.48、P=0.65、P=0.77）。

2.2 脂肪酶活性（見表4）

表4可以看出，TMR組母羊十二指腸和空腸脂肪酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.04，P=0.02）；回腸和胰腺脂肪酶活性略高于NG組母羊，但是差異不顯著（P=0.73，P=0.52）。

表4 不同育肥方式對(duì)母羊小腸及胰腺脂肪酶活性的影響(U/mg prot.)

2.3 胰蛋白酶活性（見表5）

表5 不同育肥方式對(duì)母羊小腸及胰腺胰蛋白酶活性的影響(U/mg prot.)

表5顯示了不同育肥條件下母羊小腸及胰腺的胰蛋白酶活性。表5結(jié)果可見，TMR組母羊十二指腸和胰腺胰蛋白酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.003、P=0.02）；回腸胰蛋白酶活性有高于NG組母羊的趨勢(shì)（P=0.08）；空腸胰蛋白酶活性略高于NG組母羊，但差異不顯著（P=0.46）。

2.4 糜蛋白酶活性（見表6）

表6 不同育肥方式對(duì)母羊十二指腸糜蛋白酶活性的影響(U/mg prot.)

從表6可以看出，TMR組母羊十二指腸糜蛋白酶活性顯著高于NG組母羊（P=0.009）。

3 討論

小腸是動(dòng)物機(jī)體的主要消化吸收部位，小腸消化酶活性直接影響動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率。因此，消化酶活性水平的高低直接反映機(jī)體對(duì)飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用程度。影響小腸消化酶活性的因素有很多，其中主要有品種、年齡、飼糧組成、小腸部位及腸道內(nèi)環(huán)境等。育肥方式是影響飼糧組成的主要因素，而飼糧組成又決定了動(dòng)物飼糧的營(yíng)養(yǎng)水平。本試驗(yàn)研究了NG與TMR兩種育肥方式對(duì)阿爾巴斯絨山羊成年母羊小腸及胰腺主要消化酶活性的影響，結(jié)果表明，TMR育肥可顯著提高母羊十二指腸胰蛋白酶、糜蛋白酶和脂肪酶活性，空腸脂肪酶活性，胰腺淀粉酶和胰蛋白酶活性(P＜0.05)；對(duì)母羊回腸胰蛋白酶活性有提高的趨勢(shì)（P=0.08）。這說明育肥方式可影響成年母羊小腸及胰腺的酶活性，這可能與兩種育肥方式下動(dòng)物采食的飼糧營(yíng)養(yǎng)水平不同有關(guān)。TMR組TMR的蛋白質(zhì)和能量的營(yíng)養(yǎng)水平均高于NG組（1～30 d兩組蛋白水平接近）。王寶山與劉月琴等研究發(fā)現(xiàn)，小尾寒羊小腸內(nèi)的淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性隨飼糧中粗蛋白質(zhì)含量的增加而增加。仁瑞清等研究結(jié)果得出，與飼喂低能量水平的開食料相比，飼喂能量水平較高的開食料可增加犢牛小腸各段及胰腺內(nèi)脂肪酶、胰蛋白酶和十二指腸糜蛋白酶的活性。這些研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相似，進(jìn)一步說明了動(dòng)物消化道酶活性受飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平的影響。

本試驗(yàn)中，與NG育肥相比，TMR育肥略微增加了母羊的小腸淀粉酶活性，這可能與它們的日糧組成及采食量有關(guān)。其中，十二指腸的淀粉酶活性值高于空腸、回腸和胰腺。小腸內(nèi)容物中的淀粉酶主要由胰腺分泌的，然而，飼喂1 h內(nèi)胰腺分泌的淀粉酶到最高值（徐明，2007；John等，1999）。本試驗(yàn)是在進(jìn)食24 h、進(jìn)水2 h后屠宰的，可能屠宰時(shí)胰腺中分泌的淀粉酶已充分流經(jīng)十二指腸，但未大量流至回腸段，且回腸段之前留存的食糜已經(jīng)基本排空，故造成了十二指腸段淀粉酶活性比空腸和回腸段高的現(xiàn)象。因此可以推斷，屠宰前停止飼喂時(shí)間對(duì)淀粉酶活性有一定的影響，具體作用機(jī)理還需要進(jìn)一步探討。另一方面，TMR組母羊胰腺淀粉酶活性顯著高于NG組母羊，這可能是因?yàn)門MR的淀粉水平高于牧草的原因。

日糧脂肪消化依賴于胃腸道脂肪酶及胰腺脂肪酶活性。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中粗脂肪含量的增加可以提高體內(nèi)小腸消化酶中脂肪酶的活力。本試驗(yàn)中，TMR組母羊日糧粗脂肪含量高于放牧母羊，這也是引起TMR組母羊的十二指腸和空腸胰腺脂肪酶活性顯著高于NG組母羊，回腸脂肪酶活性趨于顯著高于NG組的主要原因。此外，本試驗(yàn)結(jié)果也指出，各部位脂肪酶活性從大到小排序依次為胰腺、回腸、空腸、十二指腸，提示脂肪在小腸后段被消化，與劉月琴等（2004）結(jié)果一致。

小腸胰蛋白酶、糜蛋白酶是日糧蛋白質(zhì)的主要分解酶。本試驗(yàn)TMR組母羊的日糧蛋白水平高于NG組母羊，這是導(dǎo)致本試驗(yàn)結(jié)果TMR組母羊十二指腸胰蛋白酶和糜蛋白酶活性顯著高于NG組母羊，空腸和回腸胰蛋白酶活性值略高于放牧母羊的主要原因。本試驗(yàn)結(jié)果與Mourot等（1979）和Simoes-Nunes（1986）一致。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，十二指腸胰蛋白酶活性最高，其次空腸，最后是回腸。這些結(jié)果提示日糧蛋白質(zhì)主要在小腸前段消化。

4 結(jié)論

與NG育肥相比，TMR育肥可以提高絨山羊成年母羊小腸和胰腺的消化酶活性。