■曲洪磊 劉桂芹 格日樂其木格 李文強(qiáng) 邢敬亞 董博穎
(1.國家膠類中藥工程技術(shù)研究中心東阿阿膠股份有限公司,山東 東阿 252201;2.聊城大學(xué)生物制藥研究院,山東 聊城 252059;3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)
隨著屠呦呦諾貝爾獎的獲得,中藥產(chǎn)品市場需求量增加,導(dǎo)致中藥渣產(chǎn)量激增。以東阿阿膠股份有限公司為例,單生產(chǎn)復(fù)方阿膠漿后剩余中藥渣達(dá)1 000 t(干物質(zhì)),由中藥渣帶來的環(huán)境壓力也日益嚴(yán)峻,因此對其進(jìn)行開發(fā)利用迫在眉睫。近幾年,印遇龍?jiān)菏繄F(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)所研究的6種中藥渣均具有一定的營養(yǎng)及保健價(jià)值[1],同時還對中藥渣在仔豬、妊娠母豬、哺乳母豬、育肥豬上的作用進(jìn)行了大量的研究,發(fā)現(xiàn)中藥渣不僅可用于養(yǎng)殖,還具有很好的調(diào)節(jié)作用[2-6]。如蘇家宜等[5-6]發(fā)現(xiàn),藥渣喂豬可提高斷奶仔豬空腸吸收面積、調(diào)節(jié)血脂、提高機(jī)體抗氧化能力等。此外,中藥渣在雞、羊、兔等動物上也證明具有提高生產(chǎn)性能的效果[7-9]。復(fù)方阿膠漿生產(chǎn)原料包括紅參、黨參、熟地黃和山楂等,經(jīng)過水提取后的藥渣中除了含有較多的粗纖維外,還包括復(fù)雜多樣的蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素及殘留的活性成分等多種物質(zhì)。作者前期研究發(fā)現(xiàn),復(fù)方阿膠漿藥渣飼喂驢具有較好的采食性。且陳遠(yuǎn)慶等(2016)[10]和曲洪磊等(2016)[11]報(bào)道,復(fù)方阿膠漿藥渣喂飼驢,不但能提高驢的生長性能、屠宰率和凈皮率,還能改善驢肉品質(zhì)。有報(bào)道稱熟地黃具有降低白細(xì)胞數(shù)量及升高膽固醇的作用[12]。那么,含有熟地黃的復(fù)方阿膠漿藥渣能否作為粗飼料長期飼喂驢及其對驢血液指標(biāo)、臟器指數(shù)、抗氧化能力等指標(biāo)仍無報(bào)道。因此,本研究取復(fù)方阿膠漿藥渣替代粗飼料的平均值(10%干物質(zhì))飼喂驢,通過血液生化參數(shù)、臟器指數(shù)抗氧化指標(biāo)等,檢測復(fù)方阿膠漿藥渣對驢生理及健康的影響,從而評估復(fù)方阿膠漿藥渣飼喂的可行性,為復(fù)方阿膠漿藥渣的再利用提供理論依據(jù)。
2015年5~8月在山東省東阿縣開展。
按照隨機(jī)的原則選用300頭1.5歲左右疆岳驢,平均分為2組,每組2個重復(fù),每個重復(fù)75頭,采用大群飼養(yǎng)。試驗(yàn)采用對驢打耳標(biāo)的方式進(jìn)行試驗(yàn)跟蹤。
對照組:基礎(chǔ)飼草自由采食。
試驗(yàn)組:基礎(chǔ)飼草和復(fù)方阿膠漿藥渣(飼草和藥渣比例為9∶1)混合后自由采食。
基礎(chǔ)飼草為:豆秸(市購);復(fù)方阿膠漿藥渣(由東阿阿膠股份有限公司提供;藥渣主要營養(yǎng)成分見表1);除基礎(chǔ)飼草外,每頭驢每天補(bǔ)充1 kg精料補(bǔ)充料,飼糧配方及營養(yǎng)水平見表2。
試驗(yàn)驢采用大欄飼養(yǎng),運(yùn)動場自由活動,每天飼喂4次,飼喂時間分別為07:00、11:00、17:00、22:00,由專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)與管理,全天自由飲水。期間注意觀察驢的采食規(guī)律、行為表現(xiàn)和健康。
90 d試驗(yàn)期之后,各組抽取接近平均體重2公3母屠宰,屠宰前空腹稱取空腹活體重;靜脈采血20 ml,分為2份,一份置醫(yī)用抗凝負(fù)壓管供血生化指標(biāo)測定用(血液樣品用泡沫箱加冰袋貯存),另一份在3 000 r/min條件下離心取血清,用于血清指標(biāo)測定用。
屠宰過程中摘取心、肝、脾、胃、腎、胰、肺、胰臟等臟器稱重計(jì)算臟器指數(shù)(臟器重/空腹活體重)。
表1 復(fù)方阿膠漿藥渣的主要營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
表2 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
BIOTEK/EXL-808型酶標(biāo)儀(美國伯騰)、Evolution-300分光光度計(jì)(美國賽默飛世爾)、KBFP-240恒溫恒濕箱(德國賓得)、MC-350磁力攪拌器(瑞士Salvis)、DH-800全自動血液生化分析儀(美國貝克曼庫爾特)、DxH-600血液分析儀(美國貝克曼庫爾特)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件中的ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
血清代謝酶指標(biāo)的變化反映了機(jī)體新陳代謝機(jī)能的改變。由表3可知,飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣后驢血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)均沒有顯著影響(P>0.05);堿性磷酸酶(ALP)含量顯著升高(P<0.05);谷草轉(zhuǎn)氨酶具有明顯的升高趨勢(0.05<P<0.1)。
表3 飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血清代謝酶參數(shù)的影響(n=5)
表4 飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血清生化參數(shù)的影響(n=5)
由表4可知,飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣后血清總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(T-CH)、血清鈣(Ca)影響不顯著(P>0.05);血清白蛋白(ALB)含量顯著升高(P<0.05);血清總磷(TP)含量極顯著下降(P<0.01);血清總膽固醇、總蛋白有升高趨勢(0.05<P<0.1)。
表5 飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血細(xì)胞參數(shù)的影響(n=5)
由表5可以看出,飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血紅蛋白含量(Hb)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、平均紅細(xì)胞體積(HCT)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞數(shù)(LYC)、淋巴細(xì)胞百分比(LY)等參數(shù)均沒有顯著影響(P>0.05)。
由表6可知,飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、肺臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、胰臟指數(shù)及腸指數(shù)均沒有顯著影響(P>0.05);但驢胃指數(shù)顯著低于對照組(P<0.05);脾臟指數(shù)和肝臟指數(shù)均有明顯增加趨勢(0.05<P<0.1)。
表6 飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢臟器指數(shù)的影響(n=5)
試驗(yàn)為了驗(yàn)證復(fù)方阿膠漿藥渣飼喂對驢抗氧化的影響,從血清及肌肉兩部分進(jìn)行測定,結(jié)果見表7。由表7可知,肌肉及血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH)、過氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和脂褐質(zhì)(LF)等抗氧化酶及氧化產(chǎn)物均無顯著影響(P>0.05);肌肉中的脂褐質(zhì)具有明顯下降趨勢(0.05<P<0.1)。
表7 飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血清及肌肉抗氧化指標(biāo)的影響(n=5)
復(fù)方阿膠漿生產(chǎn)原料包括紅參、黨參、熟地黃和山楂等,經(jīng)過水提取后的藥渣中除了含有較多的粗纖維外,還包括復(fù)雜多樣的蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素及殘留的活性成分等多種物質(zhì)。
臟器指數(shù)又稱臟體比,是試驗(yàn)動物某臟器的重量與其體重的比值。臟器系數(shù)的變化可較好地反映化學(xué)毒物對該臟器的毒性綜合情況。臟器系數(shù)下降表示萎縮、退行性變化;臟器系數(shù)加大,在一定范圍內(nèi)表示臟器機(jī)能增強(qiáng),過大則可能是充血、水腫、增生肥大性變化等病變。
本試驗(yàn)顯示,心、肝、脾、腸指數(shù)都呈上升趨勢,但差異不顯著(0.05<P<0.1),說明該藥渣喂驢是安全的,并且在一定程度上增強(qiáng)了臟器功能。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼喂藥渣導(dǎo)致驢胃指數(shù)顯著降低(P<0.05),但腸指數(shù)稍微升高,分析原因可能是藥渣經(jīng)過粉碎浸提后比粗飼料細(xì)很多,驢在采食相同干物質(zhì)條件下攝入飼草體積大幅減少從而減輕了胃負(fù)擔(dān)引起。陳遠(yuǎn)慶等(2016)報(bào)道,隨著飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣時間的延長可以顯著提高驢的平均日增重,這與飼草容積減小而腸吸收增加提高生產(chǎn)性能一致。與魏柄棟等[13]報(bào)道中藥可以提高肉仔雞臟器指數(shù)結(jié)果一致。
ALP是機(jī)體生長性能的重要指標(biāo)之一,在體內(nèi)與激酶互逆地調(diào)節(jié)著蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物的代謝,同時與機(jī)體鈣、磷代謝有關(guān),其活性高低可反映動物的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組ALP活性顯著升高(P<0.05),結(jié)合血清磷極顯著降低(P<0.01)以及肝指數(shù)明顯升高的結(jié)果說明試驗(yàn)條件引起了鈣、磷代謝異常。產(chǎn)生這一結(jié)果的原因可能是藥渣飼喂對肝臟造成了損傷,或擾亂了酸堿代謝,或者存在腎衰趨勢、甲狀旁腺功能損傷,其作用機(jī)理還有待于進(jìn)一步的驗(yàn)證。
ALT和AST是機(jī)體兩種重要的轉(zhuǎn)氨酶,它能加快蛋白質(zhì)合成代謝,增進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化效率而有利于機(jī)體的生長,如果這兩種酶異常增多則表示肝損傷引起肝功能降低。該試驗(yàn)結(jié)果表明,飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣對驢血清ALT和AST的活性都有增強(qiáng)趨勢,但差異不顯著(0.05<P<0.1),該結(jié)果提示復(fù)方阿膠漿藥渣對機(jī)體氮代謝有一定的促進(jìn)作用,同時肝功正常。CK主要存在于骨骼肌和心肌,與ATP的再生有關(guān),主要參與機(jī)體的能量代謝。LDH在肝、腎、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中含量最多,是機(jī)體能量代謝重要酶。LDH和CK一樣,含量增加代表機(jī)體代謝旺盛,但大量激增證明組織受損兩者釋放入血。試驗(yàn)結(jié)果顯示CK和LDH輕微升高,表明藥渣促進(jìn)了機(jī)體代謝,與陳遠(yuǎn)慶等(2016)的結(jié)論一致。董占蓮[14]報(bào)道黨參莖葉可以提高豬生產(chǎn)性能,與本試驗(yàn)含有黨參的結(jié)果一致。
血清總蛋白(TP)含量反應(yīng)機(jī)體對日糧CP的消化利用率,TP含量高則蛋白沉積增多,動物生長發(fā)育加快[15]。本研究中試驗(yàn)組血清總蛋白(TP)與球蛋白(ALB)含量較對照組高,說明藥渣能增強(qiáng)驢蛋白質(zhì)的沉積,與其獲得較高出肉率相符。在體液中血清ALB可以運(yùn)輸脂肪酸、膽色素、氨基酸、類固醇激素、金屬離子和許多功能因子等,同時還可以維持血液正常的滲透壓。試驗(yàn)組ALB含量顯著性升高,說明藥渣具有促進(jìn)物質(zhì)吸收及運(yùn)輸?shù)墓π?,可以提高畜體的飼料轉(zhuǎn)化和增重,這對于驢育肥后期具有重要的意義。機(jī)體鈣、磷變化互為消漲,本研究中血清磷含量極顯著降低(P<0.01),可能與堿性磷酸酶含量顯著升高有關(guān)(P<0.05)。
淋巴細(xì)胞屬于白細(xì)胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,參與機(jī)體的體液免疫。試驗(yàn)藥渣中含有紅參,結(jié)果發(fā)現(xiàn),LY及LYC數(shù)量有升高趨勢(都在正常范圍內(nèi)),提高了機(jī)體免疫力與黃寶亮等[16]報(bào)道紅參具有提高機(jī)體免疫力功效結(jié)果一致。本試驗(yàn)紅細(xì)胞數(shù)量(RBC)、血紅蛋白含量(Hb)和紅細(xì)胞積壓(HCT)都有升高趨勢(0.05<P<0.1),說明飼喂復(fù)方阿膠漿藥渣可以提高攜氧能力,具有改善血液循環(huán)的功能,與劉若軒等[17]報(bào)道,熟地黃具有補(bǔ)血功效結(jié)果一致。同時試驗(yàn)組WBC數(shù)量增加的結(jié)果與前期報(bào)道熟地黃增加外周血WBC數(shù)量的結(jié)果一致。
SOD和GSH作為抗氧化系統(tǒng)中重要酶系,其活性與機(jī)體清除自由基的能力成正比,而MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,其含量可間接反映細(xì)胞損傷的程度。LF是脂肪氧化后產(chǎn)物,其含量高低反映了機(jī)體脂質(zhì)氧化程度,與機(jī)體抗氧化能力成反比。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組驢肌肉脂褐質(zhì)含量降低,血液SOD和GSH含量升高,與熟地黃多糖[18]、黨參多糖[19]等均可提高仔豬機(jī)體抗氧化酶活性,抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)以增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能的報(bào)道一致。
試驗(yàn)結(jié)果表明,復(fù)方阿膠漿藥渣可以替代粗飼料飼喂驢;復(fù)方阿膠漿藥渣通過提高臟器指數(shù)、機(jī)體代謝酶、血液生化參數(shù)和抗氧化能力等改善機(jī)體機(jī)能。