亮藍(lán)G減輕急性CO中毒大鼠海馬的損傷*

楊坤麗， 沈 慧， 李 璐， 張利彬， 李秀娟， 魏林郁， 黃亞迪， 趙紅崗， 江林華， 李東亮△

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院 1三全學(xué)院生理學(xué)教研室， 2生理與神經(jīng)生物學(xué)教研室， 3第三附屬醫(yī)院， 河南 新鄉(xiāng) 453003)

一氧化碳(carbon monoxide，CO)是造成中毒性死亡最常見的有毒氣體，可引起機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)的損傷，其中，缺氧引起的腦損傷是造成患者死亡的主要原因[1-2]。急性一氧化碳中毒(acute carbon monoxide poisoning，ACMP)后數(shù)小時(shí)會(huì)引起神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)炎癥反應(yīng)和腦組織水腫等一系列病理變化，最終導(dǎo)致神經(jīng)元的凋亡或壞死，其中海馬神經(jīng)細(xì)胞的損傷尤為嚴(yán)重，從而引起學(xué)習(xí)和記憶能力受損[3-5]。目前普遍認(rèn)為炎癥在CO中毒腦損傷中起著重要作用，抑制炎癥可以促進(jìn)CO中毒患者神經(jīng)功能的恢復(fù)，提高學(xué)習(xí)記憶能力，降低死亡率，但其病理機(jī)制和分子靶標(biāo)仍然不十分清晰[6-7]。

嘌呤能P2X7受體(purinergic P2X7receptor，P2X7R)是三磷酸腺苷門控陽離子通道，屬于嘌呤受體P2X家族的一個(gè)亞型。P2X7R在病理情況下被過度激活后會(huì)引起白細(xì)胞介素1β(interleukin-1β，IL-1β)等促炎因子的釋放，引發(fā)系列級(jí)聯(lián)反應(yīng)，造成細(xì)胞不可逆的損傷[8]。近幾年研究表明P2X7R在許多神經(jīng)性疾病的炎癥發(fā)生中有重要作用，包括阿爾茨海默病[9]、脊柱損傷[10]和腦缺血[11]等。在許多誘導(dǎo)神經(jīng)炎癥的模型動(dòng)物，用P2X7R拮抗劑能夠減輕炎癥反應(yīng)，起到神經(jīng)保護(hù)作用[8,12]，但P2X7R在ACMP腦損傷中的作用至今未見文獻(xiàn)報(bào)道。

亮藍(lán)G(brilliant blue G，BBG)是P2X7R的特異性拮抗劑，近幾年研究已經(jīng)證明BBG對(duì)許多腦部疾病有神經(jīng)保護(hù)作用。BBG的干預(yù)可以減輕阿茲海默病[13]、脊柱損傷[10]和腦缺血[11]引起的神經(jīng)癥狀和病理結(jié)果。然而，BBG對(duì)ACMP引起腦損傷的影響尚未見報(bào)道。本文觀察BBG對(duì)ACMP引起的海馬損傷的影響，探討P2X7R在ACMP引起腦損傷中的作用，試圖揭示ACMP的嘌呤受體機(jī)制。

材 料 和 方 法

1 動(dòng)物

8～10周齡健康雄性SD大鼠，體重280～355 g, 購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，所有操作和動(dòng)物處理嚴(yán)格遵循倫理道德的指導(dǎo)原則，動(dòng)物合格證號(hào)為SCXK(京)2016-0011。

2 主要試劑

99.9% CO氣體(新鄉(xiāng)市北普特殊氣體有限公司)； BBG(Sigma)；腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-1β和IL-6酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(武漢博士德生物技術(shù)有限公司)；TRIzol 試劑和RT-qPCR試劑盒(Invitrogen)；HE染色試劑盒(索萊寶科技有限公司)。

3 主要方法

3.1動(dòng)物分組及模型的制備 80只雄性SD大鼠采取隨機(jī)抽樣法分為4組：對(duì)照(control)組：腹腔注射1 mL的生理鹽水，30 min后注射100 mL/kg的空氣；ACMP組：腹腔注射1 mL的生理鹽水，30 min后注射100 mL/kg的CO氣體；ACMP+BBG組：腹腔注射BBG(30 mg/kg，溶解于雙蒸水中)，30 min后注射100 mL/kg 的CO氣體；BBG組：腹腔注射BBG(30 mg/kg，溶解于雙蒸水中), 30 min 后注射100 mL/kg 空氣。分組處理后120 min眼內(nèi)眥取血測碳氧血紅蛋白(carboxyhemoglobin,HbCO)的濃度，ACMP組和ACMP+BBG組大鼠在注射CO后2 h HbCO濃度均達(dá)75.00%±0.05%以上，達(dá)到重度中毒的程度，且2組HbCO沒有差異；control組和BBG組HbCO濃度僅為5.00%±0.60%，表明ACMP大鼠造模成功。染毒6 h后計(jì)數(shù)各組存活率。

3.2海馬組織的提取及保存 第一批動(dòng)物：染毒6 h后每組存活的動(dòng)物中各取5只，10%的水合氯醛(4 mL/kg)麻醉，斷頭取腦，快速分離左右側(cè)海馬，左側(cè)立即用干濕稱重法測水含量，右側(cè)立即置于-80 ℃保存?zhèn)溆?。第二批?dòng)物于水迷宮試驗(yàn)結(jié)束后，用上述方法分離左右海馬，分別放入不同EP管中，立即置于-80 ℃保存，用于ELISA和RT-qPCR實(shí)驗(yàn)。

3.3RT-qPCR法檢測P2X7R的mRNA表達(dá) 取出冷凍的右側(cè)海馬組織，冰上溶解，組織總RNA用TRIzol法提取，然后以總RNA為模板反轉(zhuǎn)錄為cDNA，步驟如下：取一PCR管，加入含2 μg RNA的溶液，加入1 μL Oligo(dT)18，用無核糖核酸酶的去離子水補(bǔ)足至12 μL，于PCR儀上70 ℃保溫5 min，迅速置冰上冷卻，依次加入4 μL 5×buffer、 2 μL 10 mmol/L dNTPs、 1 μL RNA inhibitor和1 μL 反轉(zhuǎn)錄酶，用槍抽吸混勻，在PCR儀上42 ℃保溫60 min，結(jié)束后80 ℃保溫5 min滅活反轉(zhuǎn)錄酶。最后進(jìn)行PCR定量，配制PCR擴(kuò)增體系：cDNA 12.5 μL,上、下游引物各2 μL，酶和底物等混合物2.5 μL，加無菌去離子水8 μL。反應(yīng)條件: 95 ℃預(yù)變性10 min； 95 ℃變性10 s, 60 ℃ 退火60 s, 95 ℃延伸15 s，共40個(gè)循環(huán)。以標(biāo)準(zhǔn)品GAPDH為內(nèi)參照，建立擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果采用2-ΔΔCt(Livak法)法進(jìn)行分析，引物序列見表1。

3.4ELISA檢測海馬組織炎癥因子的含量 取出冷凍的左側(cè)海馬組織快速稱重，低溫下進(jìn)行勻漿，4 ℃、12 000 r/min離心15 min，取上清液作為待測樣品，-80 ℃保存?zhèn)溆?。在各孔中加入?biāo)準(zhǔn)品或稀釋過的待測樣品各100 μL，37 ℃反應(yīng) 90 min。加生物素標(biāo)記抗體工作液100 μL，37 ℃反應(yīng) 60 min。緩沖液洗滌 3 次。加100 μL ABC工作液，37 ℃反應(yīng) 30 min，緩沖液洗滌 5 次。加入TMB 90 μL，37 ℃ 反應(yīng) 20～25 min。加入100 μL TMB 終止液，立即在450 nm 處測量吸光度(A)值。

3.5干濕稱重法檢測海馬組織的含水量 6 h后每組取5只大鼠，在10%的水合氯醛(4 mL/kg)麻醉下斷頭取腦，分離左側(cè)海馬，立即置于事先稱重過的1.5 mL的EP管中封口，用電光分析天平(分度值0.000 1)稱濕重，放入電熱恒溫干燥箱100 ℃烘烤72 h后稱干重。測定的含水量公式：含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。

3.6Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測大鼠學(xué)習(xí)記憶能力

3.6.1定位航行實(shí)驗(yàn) Morris水迷宮內(nèi)徑160 cm，水深22 cm。水池均分為4個(gè)象限，分別標(biāo)記為NW(northwest)、SW(southwest)、SE(southeast)和NE(northeast)。水迷宮平臺(tái)位于SE象限中間，直徑9 cm，平臺(tái)上面低于水面0.5 cm。池壁周圍懸掛藍(lán)色布簾，水池內(nèi)壁各象限固定不同形狀的參照物。實(shí)驗(yàn)開始前調(diào)整水溫至22 ℃。各組大鼠在未作任何處理的情況下先行定位航行訓(xùn)練7天，每天提前 30 min 帶入水迷宮實(shí)驗(yàn)室以熟悉環(huán)境。每日每只大鼠在每個(gè)象限訓(xùn)練 1 次，訓(xùn)練時(shí)間間隔為25 min。每次訓(xùn)練的最大時(shí)長為 60 s， 60 s 內(nèi)找不到水下平臺(tái)的，將其引至平臺(tái)上并停留 30 s，逃避潛伏期記為 60 s，低于 60 s找到平臺(tái)的則以實(shí)際時(shí)間記錄逃避潛伏期。第8天按分組條件給大鼠相應(yīng)處理， 6 h后每組取5只大鼠在目標(biāo)象限對(duì)側(cè)(NW象限)進(jìn)行定位航行試驗(yàn)，記錄逃避潛伏期。

3.6.2空間探索實(shí)驗(yàn) 第8天進(jìn)行，移除水下平臺(tái)，水溫保持 22 ℃。將大鼠在NW象限(即目標(biāo)象限的對(duì)側(cè))放入池中，用攝像記錄游泳軌跡，用軟件EthoVision XT 8 (Noldus)進(jìn)行信號(hào)的采集與分析。 記錄時(shí)長300 s，觀察在各象限的游泳路徑及時(shí)長，分析其空間記憶能力。

3.7HE染色 3 d后每組取5只大鼠，10 %的水合氯醛(4 mL/kg)麻醉，仰臥固定, 經(jīng)左心室灌注生理鹽水,看到剪破的右心耳流出清亮液體,然后再灌注4 %的多聚甲醛約250 mL。固定完畢后,迅速斷頭取腦,將腦組織置于4 %多聚甲醛中4 ℃過夜。多聚甲醛浸置后的腦組織常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋、冠狀位切片,每張切片厚約7 μm,每組取3張切片置于載玻片上，進(jìn)行HE染色，顯微鏡下觀察切片并拍照。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié)果用SPSS 19.0軟件行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，多組間比較用單因素方差分析(one-way ANOAN)，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 各組P2X7R的mRNA表達(dá)

RT-qPCR結(jié)果顯示，ACMP組海馬組織的P2X7R的mRNA表達(dá)量比control組明顯增高(P<0.05), ACMP+BBG組P2X7R的mRNA表達(dá)量比ACMP組明顯降低(P<0.05)，BBG組與control組比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見圖1。

Figure 1.The mRNA expression of P2X7R in the rat hippocampal tissues was measured by RT-qPCR at 6 h after ACMP. Mean±SD. n=5. *P<0.05 vs control group; # P<0.05 vs ACMP group.

2 BBG對(duì)ACMP引起的大鼠死亡率的影響

Control組和BBG組存活率都是100%，而ACMP組的存活率為55%，明顯低于control組(P<0.05)； ACMP+BBG組的存活率為75%，較ACMP組有明顯提高(P<0.05)。

3 BBG對(duì)ACMP后海馬組織促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6含量的影響

與control組和BBG組相比，ACMP組的IL-1β、IL-6和TNF-α的含量明顯升高(P<0.05)；與ACMP組相比，ACMP+BBG組的IL-1β、TNF-α和IL-6含量顯著降低(P<0.05)；control組與BBG組相比的炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見圖2。

Figure 2.The effect of BBG on the concentrations of IL-1β, TNF-α and IL-6 in the rat hippocampal tissues at 6 h after ACMP. Mean±SD. n=5. * P<0.05 vs control group; # P<0.05 vs ACMP group.

4 BBG對(duì)ACMP誘導(dǎo)的海馬組織水腫的影響

Control組和BBG組的海馬組織含水量分別為79.22%±0.82%和78.97%±0.71%，兩者之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。ACMP組海馬組織的含水量為80.72%±0.93%，明顯高于control組(P<0.05)；而ACMP+BBG組海馬組織的含水量為79.56%±0.63%，顯著低于ACMP組(P<0.05),見圖3。

Figure 3.The effect of BBG on the water content in rat hip-pocampal tissues at 6 h after ACMP. Mean±SD. n=5. * P<0.05 vs control group; # P<0.05 vs ACMP group.

5 BBG對(duì)ACMP大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響

5.1定位航行訓(xùn)練的結(jié)果 定位航行訓(xùn)練7 d，結(jié)果顯示全部大鼠的逃避潛伏期第1天平均為46.25 s，第7天降至14.02 s，且4組之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見圖4A。第8天對(duì)各組大鼠進(jìn)行相應(yīng)藥物處理后發(fā)現(xiàn)BBG組與control組相比逃避潛伏期的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，ACMP組的逃避潛伏期較control組顯著延長(P<0.05)，而ACMP+BBG組的逃避潛伏期明顯短于ACMP組(P<0.05)，見圖4B。

5.2空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果 BBG組與control組相比，在目標(biāo)象限探索時(shí)間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性;與control組相比，ACMP組大鼠在目標(biāo)象限的探索停留時(shí)間顯著縮短(P<0.05)，軌跡減少;與ACMP組相比，ACMP+BBG組大鼠在SE象限的探索時(shí)間明顯延長(P<0.05)，軌跡增加，見圖5。

6 BBG對(duì)ACMP大鼠海馬組織 CA1區(qū)細(xì)胞形態(tài)的影響

HE染色顯示, control組的細(xì)胞密集整齊排列，胞體形態(tài)規(guī)整，胞質(zhì)豐富，胞核與胞質(zhì)界限清晰可見；ACMP組海馬CA1區(qū)細(xì)胞數(shù)目減少，細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞形態(tài)不完整, 胞質(zhì)稀少，胞核與胞質(zhì)界限模糊，細(xì)胞核深染、固縮，呈三角形或不規(guī)則形；與ACMP組比較，BBG+ACMP組大鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)細(xì)胞核固縮現(xiàn)象明顯改善，形態(tài)較規(guī)則，排列整齊；BBG組與control組無明顯差異，見圖6。這一結(jié)果表明，BBG預(yù)處理能夠改善急性CO中毒引起的大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元損傷。適宜濃度的BBG單獨(dú)處理，對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元CA1的形態(tài)結(jié)構(gòu)無影響。

Figure 4.The result of escape latency of the rat in the Morris water maze. A: the mean latency time to find the platform had no significant difference between the 4 groups from the 1st day to the 7th day; B: the effect of BBG on the escape latency at 6 h after ACMP on the 8th day. Mean±SD. n=5. * P<0.05 vs control group; # P<0.05 vs ACMP group.

Figure 5.The effect of BBG on the probe trial at 6 h after ACPM on the 8th day. A: the total time in target quadrant (lower right) in spacial probe phase; B: the typical swimming traces of the 4 groups. Mean±SD. n=5. * P<0.05 vs control group; # P<0.05 vs ACMP group.

討 論

在我國ACMP是急性中毒中最常見的一種，其發(fā)病率和死亡率仍然很高。制備ACMP的動(dòng)物模型對(duì)研究ACMP的干預(yù)措施有重要意義。傳統(tǒng)的吸入法制備一氧化碳中毒的動(dòng)物模型分為動(dòng)態(tài)和靜態(tài)吸入法，動(dòng)態(tài)吸入法CO需要量大，消耗成本高，操作要求高，對(duì)實(shí)驗(yàn)者自身安全也有威脅。靜態(tài)吸入法雖操作簡單，但不能排除CO2蓄積、缺氧等干擾因素。模型制備的種種困難制約了對(duì)CO中毒的研究進(jìn)展[14]。1985年Gutierrez等[15]運(yùn)用腹腔注射CO氣體的方法成功建立了CO中毒動(dòng)物模型，此方法操作方便，造價(jià)低，實(shí)驗(yàn)者安全有保障，并且能夠達(dá)到與吸入法相同的CO中毒程度。近年來，隨著對(duì)此模型的進(jìn)一步完善，腹腔注射CO造模的方法得到廣泛應(yīng)用[16]，本文觀察到腹腔注射CO后 5 min，大鼠出現(xiàn)呼吸急促、煩躁不安等現(xiàn)象，并逐漸加重，30 min左右，大鼠走路不穩(wěn)、嗜睡、昏睡，2 h 時(shí)癥狀更為嚴(yán)重，血HbCO濃度超過75%，達(dá)重度CO中毒程度。本實(shí)驗(yàn)又一次證明了腹腔注射CO造模，方法簡單，結(jié)果可靠，能較好模擬CO中毒的臨床表現(xiàn)，又不構(gòu)成對(duì)實(shí)驗(yàn)者的威脅。

Figure 6.The morphological changes of neural cells in the CA1 region of rat hippocampal tissues were observed by HE staining at 3 d after ACPM (×200).

一氧化碳中毒后缺氧引起的海馬損傷對(duì)患者生存率和預(yù)后都有極大影響，但其損傷的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和受體機(jī)制尚不清楚。近幾年研究發(fā)現(xiàn)中、重度CO中毒患者腦組織存在過度炎癥反應(yīng)，看來炎癥可能是CO中毒誘導(dǎo)腦損傷的重要病理進(jìn)程。文獻(xiàn)報(bào)道ACMP后數(shù)小時(shí)IL-1β和TNF-α等炎癥因子釋放明顯增加，6 h達(dá)到高峰，炎癥反應(yīng)所致?lián)p傷達(dá)36 h以上[3-5]。過量的IL-1β和TNF-α可能通過誘發(fā)和促進(jìn)炎癥，而后產(chǎn)生免疫損傷、細(xì)胞毒性、激活凋亡途徑等一系列反應(yīng)，引起繼發(fā)性神經(jīng)元損傷[17]。研究證明ACMP患者血IL-2、4、6水平明顯升高，IL-8介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能也參與ACMP及遲發(fā)型腦病(delayed encephalopathy of acute carbon monoxide， DEACMP)的病理損傷過程，ACMP早期階段中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生IL-6程度與大腦白質(zhì)脫髓鞘程度有關(guān)[18]，但是ACMP后炎癥因子IL-1β、TNF-α和IL-6含量增多的機(jī)制尚不十分清楚。本研究用ELISA法檢測海馬組織中炎癥因子的含量，發(fā)現(xiàn)ACMP后6 h，大鼠海馬組織中IL-1β、TNF-α和IL-6水平明顯增加，這與文獻(xiàn)報(bào)道相符[19]。我們用BBG預(yù)處理，結(jié)果這些促炎細(xì)胞因子都明顯降低了，提示P2X7R在ACMP誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子的大量釋放中起著重要作用。

常態(tài)下P2X7R只是陽離子通道，參與細(xì)胞的正常興奮功能。但在細(xì)胞受到損傷時(shí)，P2X7R過度激活，就會(huì)通過介導(dǎo)一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，加重細(xì)胞損傷。P2X7R與許多神經(jīng)性疾病的神經(jīng)炎癥發(fā)生相關(guān)，目前對(duì)于P2X7R研究的熱點(diǎn)是它能夠釋放IL-1β和IL-18等炎癥因子，血液中IL-1β的釋放可以用來作為P2X7R活化的標(biāo)志。也有報(bào)道指出TNF-α、IL-6、CCL2、CCL3 和CXCL2的釋放也能反映P2X7R的激活[20-22]。ACMP引起的IL-1β、TNF-α和IL-6釋放量增多是否也與P2X7R的激活相關(guān)呢？目前未見文獻(xiàn)報(bào)道，本研究發(fā)現(xiàn)ACMP 6 h后P2X7R的mRNA水平明顯增高，提示 ACMP可能誘導(dǎo)P2X7R的表達(dá)；采用P2X7R的拮抗劑BBG預(yù)處理，可明顯降低ACMP引起的P2X7R mRNA表達(dá)的上調(diào)，明顯減少了ACMP引起的海馬組織中IL-1β、TNF-α和IL-6的釋放，并且降低了ACMP大鼠的死亡率，減輕了海馬組織水腫和海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損傷。上述結(jié)果表明P2X7R在ACMP引起腦損傷中起著重要作用，我們的結(jié)果也初步說明ACMP可過度刺激P2X7R，引發(fā)促炎細(xì)胞因子釋放，但ACMP時(shí)P2X7R誘導(dǎo)促炎因子釋放的胞內(nèi)信號(hào)通路尚需深入研究。大量促炎因子進(jìn)一步助推炎癥和水腫反應(yīng)，導(dǎo)致大量腦細(xì)胞死亡。BBG的使用阻斷了P2X7R，也就抑制了ACMP病理進(jìn)程中炎癥這一關(guān)鍵環(huán)節(jié)，通過抗炎作用改善ACMP引起的海馬損傷。

大腦邊緣系統(tǒng)中的海馬是學(xué)習(xí)、記憶等高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的重要部位。當(dāng)腦組織受到缺氧、 缺血刺激時(shí)，IL-1β異常升高，高濃度IL-1β可抑制海馬神經(jīng)元的興奮性和突觸功能從而導(dǎo)致認(rèn)知功能受損[23]。McAfoose等[24]認(rèn)為高濃度IL-1β可直接影響長時(shí)程增強(qiáng)的發(fā)生，引起學(xué)習(xí)記憶缺陷。本研究發(fā)現(xiàn)ACMP 6 h后，促炎癥因子IL-1β、TNF-α和IL-6明顯增高的同時(shí)，大鼠學(xué)習(xí)記憶能力也顯著下降，表明炎癥反應(yīng)增強(qiáng)與學(xué)習(xí)記憶能力減退密切相關(guān)。近年來有研究表明創(chuàng)傷性腦損傷[25]和帕金森病[26]等神經(jīng)系統(tǒng)疾病引起的學(xué)習(xí)記憶能力減退與P2X7R的過度激活有關(guān)，使用P2X7R抑制劑能夠改善這些疾病的學(xué)習(xí)記憶功能減退。然而P2X7R是否參與了大鼠CO中毒后大腦學(xué)習(xí)記憶損傷的病理過程，至今未見文獻(xiàn)涉及。本文用P2X7R的拮抗劑BBG預(yù)處理來研究對(duì)ACMP的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACMP引起的炎癥因子IL-1β、TNF-α、IL-6的釋放減少了，同時(shí)明顯改善了ACMP大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。提示P2X7R在ACMP引起的海馬學(xué)習(xí)記憶功能受損中扮演著重要角色，BBG可能是通過抗炎作用來改善ACMP大鼠海馬組織損傷，提高學(xué)習(xí)記憶能力。本文的這一結(jié)果為CO中毒病理機(jī)制的研究提供了新思路，為干預(yù)CO中毒病理進(jìn)程提供了新靶點(diǎn)，為開發(fā)ACMP腦保護(hù)藥物提供了的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。ACMP后有10%～30%的病人會(huì)發(fā)生遲發(fā)型腦病，再次出現(xiàn)以急性癡呆為主的神經(jīng)精神癥狀[27]，病人的認(rèn)知能力嚴(yán)重受損，嚴(yán)重影響到患者及家庭的生活質(zhì)量。P2X7R是否在DEACMP中發(fā)揮著重要作用、阻斷P2X7R是否可以改善DEACMP的學(xué)習(xí)記憶功能受損，將是我們課題組下一步希望解決的問題。