補體因子H和補體因子H相關(guān)蛋白1、2、3和5與IgA腎病的關(guān)聯(lián)性

鄭笑 張艷君 楊淑芬 郭玉 陸晨

1安徽醫(yī)科大學新疆臨床學院（烏魯木齊 830001）；2新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院（烏魯木齊 830001）

IgA腎?。↖gA nephropathy，IgAN）是我國乃至全球最常見的原發(fā)性腎小球腎炎，也是引起終末期腎臟病的重要原因之一。IgAN臨床、病理表現(xiàn)多樣，個體預(yù)后差異明顯。自1968年BERGER首次報道以來，IgAN一直是腎臟病研究領(lǐng)域的熱點。在已知的三種補體激活途徑中，補體替代途徑和凝集素途徑在IgAN的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用，補體活化是IgAN發(fā)生及發(fā)展的重要機制［1-3］。CFH及CFHRP是補體系統(tǒng)激活途徑中的調(diào)節(jié)因子，CFHRP能通過與CFH競爭性結(jié)合細胞表面補體C3b，直接影響CFH對補體替代途徑的抑制功能［4］，故研究CFH和CFHRP與IgAN的關(guān)聯(lián)性具有重要意義。本研究分析血漿和尿液中CFH和CFHRP 1、2、3和5與IgAN的關(guān)聯(lián)性，旨在為IgAN的診斷和活動性乃至預(yù)后尋找新的生物學指標提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1研究對象納入新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院腎病科經(jīng)腎活檢術(shù)診斷為IgAN的患者153例和健康體檢的志愿者150例。排除已進入ESRD和繼發(fā)性IgAN的患者，后者如過敏性紫癜、肝硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、HIV感染等。本研究得到新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會批準，所有入組患者和健康志愿者均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1采集患者基線資料一般信息資料包括患者的姓名、性別、年齡、民族、體質(zhì)量等；臨床及病理資料包括患者的臨床癥狀、24 h蛋白定量、尿微量蛋白、血清肌酐、血清總蛋白及白蛋白、總膽固醇、甘油三脂、血紅蛋白、血尿酸、腎小球濾過率（estimated glomerular filtration rate，eGFR）（采用改良簡化的MRDR方程［9］估算eGFR，即eGFR=［175×（血肌酐）-1.234×（年齡）-0.179×（女性×0.79）］及IgAN牛津分級和MEST評分等。

1.2.2血漿和尿液CFH和CFHR1、2、3、5濃度水平的測定行腎活檢術(shù)當日采集IgAN患者2 mL晨血于EDTA抗凝管內(nèi)和5 mL晨尿于無菌管內(nèi)，分別離心20 min（3 000 r/min），仔細收集上清液于凍存管內(nèi)，-80℃保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測血漿和尿液中CFH和CFHRP 1、2、3和5濃度水平，嚴格按照試劑盒（由齊?生物科技（上海）有限公司提供）的說明書進行實驗操作。

1.2.3統(tǒng)計學方法使用SPSS 19.0軟件進行分析，定量資料通過均數(shù)±標準差（正態(tài)分布）或四分位數(shù)間距（非正態(tài)分布）來表示，兩樣本比較則分別采用兩獨立樣本t檢驗（正態(tài)分布）或秩和檢驗（非正態(tài)分布）。定性資料用頻數(shù)和率表示，兩組間率比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法。以α=0.05為檢驗標準，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1一般資料IgAN組和健康對照組入組對象各為153例和150例，男女比例分別約1.25∶1和1.46∶1，主要民族為漢族和維吾爾族，平均年齡分別為（39.57±21.43）歲和（42.43±28.13）歲，見表1。

表1 兩組對象一般資料Tab.1 General information for group objects 例

2.2血漿和尿液中CFH和CFHRP 1、2、3和5濃度與IgAN的關(guān)聯(lián)性分析IgAN組血漿和尿液中CFHRP5濃度水平明顯高于健康對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），并且CFH和CFHRP5濃度水平成反比。另外，IgAN組血漿中CFHRP1濃度水平亦明顯高于健康對照組，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其他數(shù)據(jù)在兩組中差異無統(tǒng)計學意義，見表2、3。

表2 兩組血漿中CFH和CFHRP1、2、3和5濃度水平的對照分析Tab.2 Contrastive analysis of CFH and CFHRP1、2、3 and 5 levels in plasma of two groups ± s，μg/mL

表2 兩組血漿中CFH和CFHRP1、2、3和5濃度水平的對照分析Tab.2 Contrastive analysis of CFH and CFHRP1、2、3 and 5 levels in plasma of two groups ± s，μg/mL

注：與組間比較，*P＜0.05

組別IgAN組健康對照組CFH*68.76±23.14 465.47±172.61 CFHRP1*254.95±107.45 79.43±54.73 CFHRP2 71.49±31.52 53.51±18.64 CFHRP3 104.54±73.09 89.49±52.17 CFHRP5*74.45±33.67 7.12±4.37

表3 兩組尿液中CFH和CFHRP1、2、3和5濃度水平的對照分析Tab.3 Contrastive analysis of CFH and CFHRP1、2、3 and 5 levels in urine of two groups ±s

表3 兩組尿液中CFH和CFHRP1、2、3和5濃度水平的對照分析Tab.3 Contrastive analysis of CFH and CFHRP1、2、3 and 5 levels in urine of two groups ±s

注：與組間比較，*P＜0.05

組別IgAN組健康對照組CFH（ng/mL）*1 320.47±236.44 1 047.76±195.24 CFHRP1（ng/mL）21.49±4.44 21.97±3.46 CFHRP2（pg/mL）4 180.05±913.81 4 152.69±912.44 CFHRP3（pg/mL）2 339.27±856.77 2 311.71±766.25 CFHRP5（pg/mL）*589.22±93.56 254.80±68.39

2.3CFH和CFHRP1、5的濃度水平與IgAN患者的臨床特征的分析將IgAN患者根據(jù)臨床特點分為腎炎綜合征組、腎病綜合征組、無癥狀血尿組及無癥狀蛋白尿組4組。在血漿中，無癥狀血尿組CFH濃度水平最高，腎炎綜合征組中最低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；在尿液中亦是，但存在的差異無統(tǒng)計學意義。血漿中CFHRP5濃度在無癥狀血尿組最低，在腎炎綜合征組最高，而尿液中則恰好相反，但兩者存在的差異均無統(tǒng)計學意義。另外，血漿中CFHRP1的濃度水平在各組中差異無統(tǒng)計學意義。在這4組中，血漿中CFH濃度水平越低，其對應(yīng)的血肌酐、尿素氮和尿蛋白定量升高，而血清白蛋白降低。見表4。

2.4 CFH和CFHRP1、5濃度水平與IgAN患者腎臟病理分級（牛津分級MEST評分）的關(guān)聯(lián)性分析血漿中CFH濃度水平與MEST評分呈反比，而尿液中CFH濃度水平與MEST評分呈正比，這兩者存在的差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。另外，血漿中CFHRP5濃度水平亦是隨MEST評分的增高而升高的，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。而尿液中CFHRP5和血漿中CFHRP1濃度水平在MEST評分中差異無統(tǒng)計學意義。見表5。

表4 CFH和CFHRP1、5的濃度水平與IgAN患者的臨床特征的分析Tab.4 Analysis of CFH and CFHRP1，5 Concentration Levels and the clinical characteristics of IgAN patients x± s

表5 CFH和CFHRP1、5濃度水平與IgAN患者牛津分級MEST評分的分析Tab.5 Analysis of CFH and CFHRP1，5 Concentration Levels and MEST Score of Oxford Classification in IgAN patients x± s

2.5 CFH和CFHRP1、5濃度水平與IgAN患者的慢性腎臟病分期的分析在血漿中，CFH濃度水平隨CKD分期呈反比，而CFHRP5濃度水平隨CKD分期呈正比，并且兩者在CKD分期中存在的差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在尿液中，CKD分期級別越高，CFH濃度越高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表6。

3 討論

CFH及CFHRP是一種在補體激活途徑中的起調(diào)節(jié)作用的血漿蛋白，其中CFH在補體活化過程中發(fā)揮抑制作用，而CFHRP則通過競爭性結(jié)合CFH表面配體影響CFH的抑制功能。補體活化是IgAN發(fā)生及發(fā)展的重要機制，CFH的這種抑制作用可能阻止IgAN的發(fā)生或者延緩其病程的進展。

表6 CFH和CFHRP1、5濃度水平與IgAN患者的慢性腎臟病分期的分析Tab.6 Analysis of CFH and CFHRP1，5 Concentration Levels and stages of chronic renal disease in IgAN patients ±s

表6 CFH和CFHRP1、5濃度水平與IgAN患者的慢性腎臟病分期的分析Tab.6 Analysis of CFH and CFHRP1，5 Concentration Levels and stages of chronic renal disease in IgAN patients ±s

注：與組間比較，*P＜0.05

慢性腎臟病分期血漿濃度水平CFH（μg/mL）*CFHRP1（μg/mL）CFHRP5（μg/mL）*尿液濃度水平CFH（ng/mL）*CFHRP5（pg/mL）CKD1期（41例）102.21±50.49 203.44±87.91 35.34±16.37 691.42±347.12 502.31±246.73 CKD2期（49例）76.56±47.31 241.67±112.38 63.78±22.89 945.57±389.54 579.64±287.44 CKD3期（37例）51.79±27.87 275.42±143.62 90.97±65.13 1 733.76±465.90 638.73±326.89 CKD4/5期（26例）25.46±13.52 332.07±159.13 132.72±69.52 2 430.83±677.81 673.89±312.54

本研究結(jié)果表明IgAN患者血漿中CFH、CFHRP1、5濃度水平明顯高于健康對照組，這與已有的相關(guān)研究結(jié)果接近一致［5-6］。血漿中CFH濃度水平與MEST評分呈反比，而CFHRP5濃度水平與MEST評分呈正比。另外血漿中CFH濃度隨CKD分期級別增高而降低，而CFHRP5濃度隨CKD分期級別增高而升高，提示血漿中CFH和CFHRP5濃度水平的高低可能與IgAN疾病病程的進展有關(guān)。同時，MEDJERAL?THOMAS 等［5］研究結(jié)果表示：IgAN患者血漿中CFHRP1、5濃度水平與CFH濃度比值的大小與疾病的活動性有關(guān)，與本研究結(jié)果相似。TORTAJADA等［6］亦發(fā)現(xiàn)IgAN患者血漿中CFH濃度水平相對較低，這與本次研究結(jié)果亦接近一致。但也發(fā)現(xiàn)由IgAN導致CKD患者的血漿中CFHRP1水平是升高的，并且CFHRP1濃度水平的高低可對IgAN的進展及預(yù)后進行評估。另一項小樣本的研究發(fā)現(xiàn)IgAN患者血清中的CFHRP1的水平是顯著升高的，并與其疾病的進展有關(guān)［7］。本研究并沒發(fā)現(xiàn)血漿中CFHRP1濃度水平與疾病進展存在關(guān)聯(lián)，故與研究結(jié)果存在差異，需進一步的研究來闡明。

本研究還發(fā)現(xiàn)，IgAN患者尿液中CFH濃度水平隨MEST評分和CKD分期增高而升高，這與ZHANG等［8］的研究結(jié)果一致，并且發(fā)現(xiàn)尿液中CFH水平有可能是評價腎損傷的有效生物標志物之一。楊夢等［9］曾對283例IgAN患者的病理結(jié)果研究發(fā)現(xiàn)，腎組織中CFH沉積陽性的患者其尿蛋白排泄增多、血尿酸升高，并且腎臟病理提示系膜細胞增生、節(jié)段硬化、腎小管萎縮及間質(zhì)纖維化更嚴重。此外，還發(fā)現(xiàn)CFH沉積陽性患者臨床病理表現(xiàn)較沉積陰性患者嚴重而且預(yù)后差，CFH沉積陽性患者的疾病無進展時間較陰性患者明顯縮短。因此，腎臟組織CFH沉積有可能是IgAN進展的獨立危險因素，并且可作為IgAN進展的重要標志物。本研究沒有分析CFH和CFHRP沉積在腎臟組織中的情況，使得研究不夠全面。另外本次研究也還存在樣本量偏小，會使得在分析數(shù)據(jù)時產(chǎn)生一定的誤差等不足之處。下一步的研究將從CFH和CFHRP1、5在IgAN診斷中的價值以及預(yù)后等方面進行研究，為IgAN的診斷和活動性乃至預(yù)后尋找新的生物學指標提供依據(jù)。