腎纖維化中醫(yī)病機(jī)與Wnt/β-catenin 信號通路的關(guān)系?

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(江西中醫(yī)藥大學(xué)，南昌 330006)

腎纖維化是多細(xì)胞因子介導(dǎo)、多信號通路傳導(dǎo)、多因素驅(qū)動(dòng)的慢性腎臟疾病，它包括腎間質(zhì)纖維化、腎小球硬化、腎小管硬化，最終發(fā)展成為慢性腎衰竭[1]。其病理變化主要是正常腎單位的丟失，大量成纖維細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞的增生，致使細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生和堆積而導(dǎo)致腎小球硬化、腎小管萎縮及腎間質(zhì)纖維化等主要特征。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)在抗腎纖維化方面進(jìn)行了諸多研究，但研發(fā)藥物較少，且治療手段較為單一。諸多研究發(fā)現(xiàn)，腎纖維化的發(fā)生發(fā)展與Wnt/β-catenin信號通路密切相關(guān)，進(jìn)一步深入探討腎纖維化中醫(yī)病機(jī)與Wnt/β-catenin信號通路有著重要意義。本文將Wnt/β-catenin信號通路、Wnt/β-catenin信號通路與腎纖維化的關(guān)系、腎纖維化的病因病機(jī)、腎纖維化中西醫(yī)病理形成過程及關(guān)系與中藥圍繞“虛、濕、瘀、毒”病機(jī)干預(yù)Wnt/β-catenin信號通路、延緩腎纖維化進(jìn)展等方面進(jìn)行了論述。

1 Wnt/β-catenin信號通路

Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)通路是一條在生物進(jìn)化中重要的信號通路，與胚胎的生長、形態(tài)發(fā)育、組織穩(wěn)定、能量代謝的平衡以及干細(xì)胞的維持密切相關(guān)[2]。在正常的體細(xì)胞中，β-catenin只是作為一種細(xì)胞骨架蛋白在胞膜處與E-cadherin形成復(fù)合體，對維持同型細(xì)胞的黏附、防止細(xì)胞的移動(dòng)發(fā)揮作用。只有當(dāng)細(xì)胞外Wnt信號分子與細(xì)胞膜上特異性受體Frizzled蛋白結(jié)合激活胞內(nèi)的dishevelled蛋白導(dǎo)致GSK3B失活，使β-catenin避免被磷酸化而遭降解的命運(yùn), β-catenin才能在胞質(zhì)中積累起來。當(dāng)胞質(zhì)中B-catenin的濃度達(dá)到一定水平時(shí)就可向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移，進(jìn)入細(xì)胞核的β-catenin調(diào)節(jié)靶基因TCF/LEF啟動(dòng)cyclinD1、anDl、c-myc等靶基因的轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)胞的增殖、分化、成熟，致使腫瘤等疾病的發(fā)生[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，Wnt/β-catenin信號通路不僅參與腫瘤發(fā)生發(fā)展,而且還與多囊腎、IgA腎病等腎系疾病發(fā)生發(fā)展密切聯(lián)系[4]。

2 Wnt/β-catenin信號通路與腎纖維化關(guān)系

腎纖維化的形成和發(fā)展是一個(gè)動(dòng)態(tài)病理過程，涉及多種細(xì)胞因子和信號通路的異常表達(dá)調(diào)控[5]，如TGF-β1、IGF及JAK/STAT通路[6]、PI3K通路、Wnt/β-catenin通路等，目前以Wnt/β-catenin信號通路的研究較為深入。在腎纖維化病變中，β-catenin大量積聚，激活纖維化相關(guān)基因的表達(dá)[7]，如基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)、纖溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等介導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的過程，而上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化是腎纖維化形成的重要過程，當(dāng)發(fā)生ETM時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)增多，細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積而致腎纖維化形成。既然腎纖維化的發(fā)生發(fā)展受Wnt/β-catenin信號通路及介導(dǎo)的靶基因影響，通過干預(yù)Wnt/β-catenin 信號通路，有可能成為延緩腎纖維化進(jìn)展的一個(gè)新靶點(diǎn)。

3 腎纖維化的病因病機(jī)

在中醫(yī)古籍中并無“腎纖維化”病名或病癥記載。據(jù)其發(fā)展過程中的臨床表現(xiàn)及發(fā)病特點(diǎn)，屬于中醫(yī)學(xué)“關(guān)格”“虛勞”“水腫”“溺毒”“尿血”等范疇，其病因多為正氣不足、復(fù)感外邪為主。主要病機(jī)為“虛、濕、瘀、毒”四大方面，在四者之中“虛”是腎纖維化的始動(dòng)因素，濕、瘀是形成腎纖維化的病理基礎(chǔ)，而毒是加重腎纖維化不可忽視的方面。近幾年來，許多醫(yī)家提出腎纖維化腎絡(luò)微癥理論，進(jìn)一步加深對腎纖維化病機(jī)的認(rèn)識[8]。微型癥積的形成與氣滯、血瘀、痰凝、毒邪內(nèi)積密切相關(guān)。若氣虛推行無力或氣運(yùn)不暢，氣虛致瘀，氣滯致瘀，腎絡(luò)瘀阻，久瘀成積。腎主水，腎臟受損必導(dǎo)致水液代謝失衡，津液不暢，濕毒內(nèi)停，日久煉津成痰，痰伏腎絡(luò)，久聚生成痰毒、瘀毒，終致微型癥積形成。

4 腎纖維化中西醫(yī)病理形成過程及關(guān)系

現(xiàn)代病理觀察發(fā)現(xiàn)，腎纖維化形成是在多種因素作用下Wnt/β-catenin信號通路被激活，導(dǎo)致肌成纖維細(xì)胞過度增殖，膠原基質(zhì)表達(dá)過多，腎小球毛細(xì)血管損傷，腎血流量減少，腎小球缺血缺氧，基質(zhì)細(xì)胞增生，系膜增厚，細(xì)胞外基質(zhì)沉積，腎小球毛細(xì)血管硬化，微循環(huán)出現(xiàn)障礙及腎小管萎縮、壞死、擴(kuò)張，腎臟萎縮、腎實(shí)質(zhì)變硬，腎表面凹凸不平，最終腎臟萎縮。其微循環(huán)病變與中醫(yī)絡(luò)病的病理極其相似，腎纖維化發(fā)生發(fā)展也與上述提及的微型癥積形成過程極其相同。中醫(yī)認(rèn)為，腎纖維化形成是病邪侵入腎絡(luò)-腎絡(luò)致絡(luò)脈瘀阻-濕瘀毒互結(jié)凝滯-久積微型癥積形成，這與西醫(yī)因損傷因子作用下Wnt/β-catenin信號通路激活后-成纖維細(xì)胞增生、細(xì)胞外基質(zhì)沉積、微循環(huán)持續(xù)受損、腎纖維化形成的病理過程極其相似。

5 中醫(yī)藥干預(yù)腎纖維化病機(jī)及與Wnt/β-catenin信號通路關(guān)系

中醫(yī)藥可以延緩腎纖維化的進(jìn)展，而腎纖維化的發(fā)生發(fā)展與Wnt/β-catenin信號通路密切相關(guān)。那么中醫(yī)藥是否能通過干預(yù)Wnt/β-catenin信號通路延緩腎纖維化呢？答案是肯定的。既然腎纖維化的微型癥積病機(jī)以“虛、瘀、濕、毒”四大方面為核心，那么依據(jù)“治病求本”“謹(jǐn)守病機(jī)”的原則，應(yīng)重點(diǎn)抓住腎纖維化“虛、濕、瘀、毒”四大病機(jī)進(jìn)行施治。

5.1 補(bǔ)虛

正氣存內(nèi)，邪不可干”“邪之所湊，其氣必虛”。正虛是其腎纖維化發(fā)生的關(guān)鍵，治療當(dāng)以顧護(hù)腎元、健脾和胃、補(bǔ)益氣血、滋補(bǔ)肝腎為主。白芍具有養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛的功效，常保超等[9]發(fā)現(xiàn)白芍總苷對糖尿病大鼠腎臟損害具有保護(hù)作用，白芍總苷可通過抑制Wnt/β-catenin信號通路活化，改善糖尿病大鼠腎臟損害，延緩糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展；山茱萸具有補(bǔ)益肝腎的作用，陳燁等認(rèn)為[10]山茱萸可能是通過抑制Wnt4及β-catenin信號通路的激活，從而延緩腎纖維化。

5.2 除濕

濕濁的產(chǎn)生與肺脾腎密切相關(guān)。肺虛則宣降失司，通調(diào)水道失常；脾虛則運(yùn)化失常，水濕內(nèi)停；腎虛則蒸化無力，泌濁失常，水濕內(nèi)留，應(yīng)以健脾益肺腎、行濕化濁為主。黃芪具有補(bǔ)氣利尿消腫的功效，鄧文超等[11]發(fā)現(xiàn)黃芪可以減輕腎間質(zhì)病理損傷,下調(diào)Wnt4、β-catenin及TGF-β1在腎間質(zhì)中的表達(dá),提示黃芪可能通過下調(diào)Wnt4、β-catenin及TGF-β1在腎間質(zhì)中的表達(dá),延緩DN大鼠腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程而發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。

5.3 化瘀

久病正虛，久病致瘀，其瘀的形成與正虛密切相關(guān)。腎纖維化多為氣血陰陽具虛，氣虛則血行不暢而致瘀，陽虛則血液不溫，寒凝血府而成瘀，陰虛則津不載血而致瘀。正虛易生成濕毒等病理產(chǎn)物，水濕內(nèi)停，濕毒影響氣機(jī)可致血瘀；若濕邪內(nèi)蘊(yùn)，蘊(yùn)久生熱，熱煎熬津血也可致瘀。瘀血貫穿于腎纖維化始終，治療當(dāng)不離活血化瘀。丹參具有活血化瘀的功效，王曼等[12]發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B可能通過介導(dǎo)Wnt/β-catenin 通路的關(guān)鍵組分調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路，從而抑制UUO所致小鼠腎間質(zhì)纖維化。

5.4 泄毒

腎纖維化常因脾腎虧虛及三焦氣化不利，濕濁內(nèi)停，瘀血久積，蘊(yùn)釀成濕瘀痰毒，治療應(yīng)益氣化濕、活血解毒。大黃具有瀉下攻積、利濕解毒、活血散瘀的功效。張濤等[13]發(fā)現(xiàn)，大黃酸能下調(diào)Wnt/β-catenin蛋白表達(dá)，改善糖尿病腎病的癥狀，延緩腎纖維化進(jìn)展。

5.5 病機(jī)兼顧

腎纖維化進(jìn)展中“虛、濕、瘀、毒”病機(jī)交錯(cuò)，治療往往不能只顧單一病機(jī)。許多復(fù)方通過干預(yù)Wnt/β-catenin信號通路而延緩腎纖維化進(jìn)展。付旭等[14]發(fā)現(xiàn)，黃芪丹參顆粒藥對(1∶1)配伍可以干預(yù)UUO大鼠腎組織中Wnt4、β-catenin的表達(dá)，從而影響腎纖維化進(jìn)展。任克軍等[15]清腎顆粒可以改善UUO模型大鼠腎功能，抑制Wnt/β-catenin信號通路的活化，從而延緩UUO模型大鼠RIF。羅婷等[16]發(fā)現(xiàn)，清化固腎排毒顆?？梢酝ㄟ^抑制 Wnt1、β-catenin 的表達(dá)，改善腎纖維化的發(fā)生發(fā)展，起到保護(hù)腎臟的作用。

綜上所述，Wnt/β-catenin信號通路參與腎纖維化的發(fā)生發(fā)展。我們將中醫(yī)獨(dú)特的辨證論治、整體觀念思維與現(xiàn)代分子生物學(xué)相結(jié)合(圖1)，認(rèn)為腎纖維化“虛、濕、瘀、毒”病機(jī)與Wnt/β-catenin信號通路密切相關(guān)，更深入地探討腎纖維化中醫(yī)病機(jī)與腎纖維化的關(guān)系，為中醫(yī)從Wnt/β-catenin信號通路治療腎纖維化提供強(qiáng)有力的客觀證據(jù)。但目前中藥干預(yù)Wnt/β-catenin信號通路多在動(dòng)物模型時(shí)，雖然實(shí)現(xiàn)了對動(dòng)物模型的成功干預(yù)，但未能實(shí)現(xiàn)建立動(dòng)物模型中醫(yī)證型。同時(shí)我們也應(yīng)注意到，由于Wnt/β-catenin信號通路機(jī)制極其復(fù)雜，目前的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究多籠統(tǒng)地概括為一條或多條作用途徑，對于中藥復(fù)方有效成分、藥物配伍、劑量及作用時(shí)間等尚缺乏系統(tǒng)作用機(jī)制研究，更無法確定中藥復(fù)方某種有效成分的精確作用靶點(diǎn)，對于這些問題應(yīng)在今后的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中引起重視。同時(shí)應(yīng)以中醫(yī)理論為指導(dǎo)借助現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果，更加重視研制出適合臨床推廣應(yīng)用的抗腎纖維化新藥物、新劑型，擴(kuò)展新方法充分發(fā)揮中醫(yī)藥優(yōu)勢，取得防治慢性腎衰的突破性進(jìn)展。

圖1 中藥依據(jù)中西醫(yī)不同機(jī)理延緩慢性腎衰病進(jìn)展