14C尿素呼氣試驗固體閃爍法檢測幽門螺桿菌感染的安全性及有效性

時 晨 洪汝濤 章禮久 雷江軍 許建明

尿素呼氣試驗(urea breath test,UBT)是檢測幽門螺桿菌(helicobacter pylori，HP)感染最受推薦的非侵入性方法[1]，具有準確性較高、操作方便和不受HP在胃內(nèi)灶性分布影響等優(yōu)點[2-3]。當前廣泛采用的14C尿素呼氣試驗(14C-UBT)檢測方法包括液體閃爍(簡稱液閃)和卡式檢測方法，液體閃爍法探測效率高，重復(fù)性好，但操作及保存稍顯繁瑣，且閃爍液為有毒化學物質(zhì)，誤吸后易導(dǎo)致化學損傷；卡式檢測法方便、快速、環(huán)保，克服了閃爍液誤吸后易導(dǎo)致的化學損傷，但檢測效能不如液體閃爍法[4]。新型14C-UBT固體閃爍(簡稱固閃)檢測HP感染的方法，采用干式瓶子采集氣體，即呼出氣中14C標記的CO2被采樣瓶中的吸收片收集固定，后使用光子湮滅探測，從而結(jié)合上述兩種方法的優(yōu)點，但目前臨床應(yīng)用較少。因此，本研究采用此新型檢測方法，對2017年11月份因上消化道癥狀門診就診100例患者進行14C-UBT HP檢測，以14C-UBT液體閃爍法作為“金標準”，評價14C-UBT固體閃爍法檢測HP感染的安全性和可靠性，為新型14C-UBT固體閃爍法檢測HP感染臨床應(yīng)用提供科學資料。

1 資料與方法

1.1 一般資料 連續(xù)納入2017年11月1～31日因上消化道癥狀就診安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院和安徽醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院內(nèi)鏡中心的門診患者100例(兩家醫(yī)院各50例)為研究對象，其中男性63例，女性37例，年齡18～74歲。納入標準：因上腹不適、腹痛、腹脹等上消化道癥狀就診的門診患者。排除標準：近4周內(nèi)服用質(zhì)子泵抑制劑、抗生素及鉍劑；胃大部切除術(shù)后；急性上消化道大出血；消化道腫瘤、幽門梗阻；嚴重心、肺、肝、腎等器官功能障礙；近1周內(nèi)服用抗凝藥物；孕婦、兒童、嚴重精神障礙者等不宜或不能配合檢查者。所有納入對象先后采用14C-UBT液體閃爍法和14C-UBT固體閃爍法檢測HP感染。所有患者檢查前均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 檢測儀器 采用YH01A型14C液體閃爍計數(shù)儀(安徽養(yǎng)和醫(yī)療器械設(shè)備有限公司提供)進行固閃樣本的測量；采用HUBT-01幽門螺桿菌測試儀(深圳市中核海得威生物科技有限公司提供)進行液閃樣本的測量。

1.2.2 樣本采集 受試者于早上空腹時受試，受試之前漱口，用20 mL涼飲用水送服14C尿素膠囊一粒，靜坐等待25 min后采集標本。液閃樣本采集：囑受試者深呼吸后，通過插入捕集液內(nèi)的吹氣管徐徐向瓶內(nèi)呼氣，直至捕集液由紫紅色變?yōu)闊o色為止(1～3 min)，若超過3 min褪色不全，亦停止吹氣，此時捕集液已吸收飽和，加入4.5 mL稀釋閃爍液并搖勻即可。固閃樣本采集：在采集液閃樣本后，緊接著使用YH10型固體閃爍采樣瓶采集固閃樣本，囑受試者深呼吸后，通過吹氣管向采樣瓶內(nèi)呼氣，重復(fù)深呼吸后再次呼氣，直至采樣瓶內(nèi)的指示片由藍色變?yōu)榘咨珵橹?，時間25 min，指示片上容許留有少量藍色斑點，即為固閃樣本。

1.2.3 HP感染檢測方法 液閃法：將液閃樣本置入測量儀器，測量樣本的放射性活度，同時記錄樣本測量的每分鐘衰變率(dpmdisimteyrations per minute,dpm)值，如果樣本受到強光照射，避光30 min后再進行測量，測量完畢后，記錄和打印樣本的測量結(jié)果及陰性/陽性判斷結(jié)果；固閃法：將固閃樣本置入測量儀器，測量樣本的dpm值，如果樣本受到強光照射，避光30 min后再進行測量，測量完畢后，記錄和打印樣本的測量結(jié)果。

1.2.4 評價方法 安全性：操作人員通過感官觀察，并使用YH10型固體閃爍采樣瓶安全性能評價表評價受試采樣瓶在機械損傷、化學損傷、電擊損傷、火災(zāi)損傷等各方面是否存在不安全的現(xiàn)象，是否對操作人員及患者造成傷害。并與對照組進行比較。

有效性：采用受試固體閃爍采樣瓶與對照(以液閃采樣瓶的有效性為標準)進行對比，以驗證固閃采樣瓶與液閃采樣瓶是否具有同樣的有效性，并用診斷結(jié)果符合率來進行評價。診斷結(jié)果陽性表示受試者存在HP感染，陰性表示受試者沒有感染HP。液閃標本的放射性活度≥100 dpm時判定為陽性；以100 dpm為固閃標本判斷陽性和陰性的分界值，最終根據(jù)以下公式計算診斷結(jié)果符合率。

診斷結(jié)果符合率(%)=與對照組判斷結(jié)果項符合的對象例數(shù)/可被納入統(tǒng)計的總對象例數(shù)×100%

2 結(jié)果

2.1 YH10型固體閃爍采樣瓶安全性能評價 100例患者在采用YH10型固體閃爍采樣瓶進行試驗過程中，均沒有對受試者和操作人員造成機械、化學、電擊、火災(zāi)等任何方面的傷害。詳見表1。

表1 YH10型閃爍采樣瓶安全性能評價表

2.2 固閃樣本的dpm值分布及與液閃法診斷符合情況比較 100例患者固閃樣本的dpm值分布見圖1。圖1可見，當固閃樣本以100 dpm作為判斷HP感染的分界值時，100例受試者的固閃樣本HP陽性的病例數(shù)為59例，陰性的病例數(shù)為41例，與液閃樣本的判斷結(jié)果全部符合，即此時診斷結(jié)果符合率為100%。

圖1 100例固閃樣本的dpm值分布

注：形點標記表示液閃樣本結(jié)果為陰性的病例，其對應(yīng)固閃標本的dpm值，形點標記表示液閃樣本結(jié)果為陽性的病例，其對應(yīng)固閃標本的dpm值。

3 討論

HP感染與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌、MALT淋巴瘤等上消化道疾病密切相關(guān)，并與難治性缺鐵性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜等胃外疾病相關(guān)，目前我國HP感染率約50%[5-6]，因此，如何快速、價廉、高效、安全的進行HP感染檢測，對于診斷HP感染和根除HP后療效評估尤為重要。UBT是臨床最為常用的非侵入性檢測HP方法的推廣使用[8]。當前廣泛應(yīng)用的是價格相對便宜、操作檢測均較為簡便的14C-UBT。傳統(tǒng)的14C-UBT包括液體閃爍法和卡式檢測法，液閃法檢測效能高、重復(fù)性好，但存在閃爍液誤吸致化學損傷風險；卡式法只需向吹氣卡中吹氣即可，收集、測量均較簡便，克服了閃爍液倒吸入口和潑灑風險，但收集時年老患者略有吃力，重復(fù)測量誤差也略大[4]。新型固體閃爍檢測方法，綜合了液閃法和卡式法的優(yōu)勢，方便、快速、重復(fù)性好，從而為臨床HP檢測提供更為簡單、有效、安全的方法。

本研究中，采用14C-UBT液體采樣瓶和YH10型固體閃爍采樣瓶分別對100例患者進行HP檢測，在使用固閃法對患者檢測過程中，均無一例發(fā)生機械、化學、電擊、火災(zāi)等傷害，具有很好的安全性。其原因在于受試產(chǎn)品采用了固體閃爍技術(shù)，在操作使用過程中不涉及有毒易燃的液體吸收劑和閃爍劑，完全避免了受試者吸入液體吸收劑的風險，采樣后可將樣本直接放入儀器進行測量，省去了加入閃爍劑的繁瑣過程，完全避免了污染和潑灑的風險，更加便捷和可靠。

本組資料顯示，固閃法與液閃法檢測HP感染的診斷符合率為100%，表明固閃法檢測HP感染與液閃法具有等效性，這與其吸收采納了液閃法中探測效率高、重復(fù)性好且準確度高的光子湮滅探測技術(shù)有關(guān)，同時提示固閃樣本的放射性活度100 dpm作為判斷HP感染的分界值科學、可靠。

綜上所述，新型固體閃爍檢測方法檢測HP安全有效，可滿足臨床診斷的要求，是值得臨床推廣應(yīng)用的14C-UBT新型檢測方法。