飲料中維生素C含量的測定

□ 周寧菱 景德鎮(zhèn)市市場和質(zhì)量監(jiān)督管理綜合檢驗(yàn)檢測中心

維生素C（VC）又稱抗壞血酸，是人體生長發(fā)育及維持健康不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)，但是人體內(nèi)不能貯存VC，同時自身也無法合成VC，且人體若嚴(yán)重缺乏VC易引起壞血病[1]。中國營養(yǎng)學(xué)會推薦的成人每日VC攝入量為100mg，最高為1000mg，攝入過多或過少都會引起身體的病變，故了解日常飲食，如各種飲料中的VC含量十分必要。

目前，定量VC的方法有2,6-二氯靛酚鈉法[2]、碘量法[3]、分光光度法[4]和高效液相色譜法（HPLC）[5]等。本文選擇高效液相色譜-二極管陣列檢測器法（HPLCPDA）[6]測定常見飲料中VC的含量，此法根據(jù)不同物質(zhì)有不同光譜的特性來定性，通過峰面積來定量。本實(shí)驗(yàn)以8種不同品牌的飲料為檢測樣本，對其VC含量進(jìn)行測定，并討論開蓋后環(huán)境溫度和放置時間對VC含量的影響，以期為人們科學(xué)補(bǔ)充VC提供參考建議。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：Waters e2695型（配置Waters 2998型二極管陣列檢測器）、超純水機(jī)（Millipore EXPRESS40）、紫外分光光度計（島津UV 2550型）、VC標(biāo)準(zhǔn)品（中國食品藥品檢定研究院）。

1.2 方法

1.2.1 樣品中VC的測定方法

采用HPLC-PDA法測定飲料中的VC含量[6]，色譜條件分別是：色譜柱為ODS C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相為0.1%醋酸溶液，流速為1.0mL/min，柱溫為28℃。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取25.00mg VC標(biāo)準(zhǔn)品，用超純水定容于100mL棕色容量瓶中，配制成250mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別精密量取不同體積的250mg/L VC標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成200mg/L、150mg/L、100mg/L、50mg/L、10mg/L 的VC標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.2.3 樣品中VC含量的測定

在超市購買不同品牌的不同種飲料，分別有綠茶（編號1、2）、紅茶（編號3）、功能飲料（編號4）、茉莉茶（編號5）、橙汁（編號6、7）、果蔬汁（編號8）。吸取適量經(jīng)不同處理后的樣品，經(jīng)0.45μm針頭過濾，待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

在200～400nm范圍內(nèi)測定VC標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外吸收光譜圖（見圖1），由圖1可知，VC在243nm處有最大吸收，故選擇243nm作為檢測波長。

圖1 VC光譜圖

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

在1.2.1的色譜條件下，吸取不同濃度的VC標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣分析。VC標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖（見圖2），再以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，峰面積（微伏×秒）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從圖3可知，VC線性回歸方程為y=53278x-263819，R2=0.999，線性關(guān)系良好。

2.3 常溫下8種飲料中VC含量的比較

在1.2.1的色譜條件下測定8種飲料中的VC含量（見圖1和表1）。從表1可知，被測定的8種飲料中，VC含量最高的是茉莉花茶，為494.6±0.5mg/L（N=3）；最低的是功能性飲料，為52.3±1.3mg/L（N=3），前者是后者的9倍。不同飲料中含有的VC含量差值較大，李儀等[7]也有類似結(jié)果。同一品種飲料之間VC含量也相差較大，如編號1的綠茶是編號2的2.0倍，編號7的橙汁是編號6的4.7倍。

另外，編號8的果蔬汁VC檢測含量為0，在色譜圖中未出現(xiàn)目標(biāo)峰，利用二極管也排除了其他峰為目標(biāo)峰的可能性。同時，經(jīng)不同后續(xù)處理的果蔬汁中也未檢測出VC，但果蔬汁的配料表中顯示為添加了VC，這可能是因?yàn)楣咧瓋?nèi)還有較多的果肉，樣品前處理方法不能簡單的過濾處理，具體原因還有待于深入研究。

圖2 VC標(biāo)準(zhǔn)品（A）和樣品（B）高效液相譜圖

圖3 VC標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖

2.4 開蓋后放置時間對VC含量的影響

將8種飲料開蓋取樣后，擰緊瓶蓋，置于常溫下，分別于12h和24h后各取樣一次，各飲料中VC含量變化結(jié)果見表1。從表1可知，開蓋12h后，VC含量降低了16.2%～52.2%，而茉莉花茶只降低了6.1%；開蓋24h后，VC含量降低了30.8%～66.4%，茉莉花茶為16.3%，因此建議飲料開蓋后盡快飲用。

2.5 開蓋后溫度對VC含量的影響

將8種飲料開蓋后，分別于0℃冷凍12h、常溫放置12h、45℃水浴12h、65℃水浴12h，經(jīng)不同處理后的飲料中VC含量見表2。從表2可知，經(jīng)0℃、常溫、45℃和65℃放置12h，各飲料中VC含量變化分別是8.5%～24.6%、16.2%～52.2%、44.0%～79.7%和47.4%～81.6%，但茉莉花茶中VC含量變化不大?？梢?，隨著溫度升高，飲料中VC含量大幅下降，因此不建議將飲料加熱飲用，若有剩余，可放于冰箱中冷凍。

3 結(jié)論

目前，市場上銷售的飲料品種繁多，VC也已被添加在各類飲料中，測定飲料中VC的含量可為人們的每日VC攝入量提供參考。本文通過HPLC-PDA法對8種飲料中VC的含量進(jìn)行測定，同時探究了開蓋后環(huán)境溫度和放置時間對各飲料中VC含量的影響。結(jié)果表明，開蓋后隨著環(huán)境溫度的升高或放置時間的延長，飲料中的VC含量均出現(xiàn)了顯著的降低。因此，飲料開蓋后建議盡快飲用完，若有剩余，可置于0℃冷凍；高溫更易加快VC的流失，盡量不要加熱飲用。

表1 存放時間對飲料中VC含量的影響

表2 溫度對飲料中VC含量的影響