人附睪蛋白4、CA125和卵巢惡性腫瘤風(fēng)險模式在卵巢癌診斷中的應(yīng)用

陶紹能，王瑩瑩，戴云海，程光華，阮 昊

(皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院 核醫(yī)學(xué)科，安徽 蕪湖 241001)

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)病死率較高的惡性腫瘤。在我國，卵巢癌的發(fā)病率為7.91/10萬，經(jīng)年齡調(diào)整后發(fā)病率5.35/10萬[1]，嚴(yán)重威脅到女性的生命和健康。隨著我國人口老年化，卵巢癌將成為我國醫(yī)療的一個沉重負(fù)擔(dān)。CA125是臨床常用的血清學(xué)輔助診斷指標(biāo)，但其診斷敏感性低，特異性差，限制了其在臨床的應(yīng)用。近年來人附睪分泌蛋白4(human epididymissecretory protein 4,HE4)作為生物標(biāo)志物用于對卵巢癌的診斷和監(jiān)測成為研究熱點，結(jié)合患者的絕經(jīng)狀態(tài)，利用HE4和CA125濃度可計算出卵巢惡性腫瘤風(fēng)險模式(risk of ovarian malignancy algorithm，ROMA)值并評價其危險性。本研究回顧性分析了卵巢良惡性患者的HE4、CA125和ROMA的水平變化及臨床應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集在我院住院的卵巢癌患者56例，年齡29～75歲，平均年齡(51.9±10.1)歲。絕經(jīng)前患者34例，年齡29～55歲，平均年齡(45.6±5.8)歲，其中漿液性癌24例，黏液性癌2例，透明細胞癌3例，其他類型惡性卵巢癌5例。絕經(jīng)后患者22例，年齡51～75歲，平均年齡(61.7±7.1)歲，其中漿液性癌15例，黏液腺癌2例，透明細胞癌2例，其他類型惡性卵巢癌3例。良性腫瘤患者113例，絕經(jīng)前患者70例，年齡26～59歲，平均年齡(42.5±6.6)歲，其中黏液性囊腺瘤4例，漿液性囊腺瘤4例，成熟性畸胎瘤30例，卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫30例，混合性上皮性囊腺瘤1例，卵巢卵泡膜細胞瘤1例；絕經(jīng)后患者43例，年齡44～81歲，平均年齡(60.2±9.6)歲，其中卵巢卵泡膜纖維瘤1例，卵巢卵泡膜細胞瘤1例，混合性囊腺瘤1例，黏液性囊腺瘤9例，漿液性囊腺瘤9例，成熟性畸胎瘤18例，卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫4例。兩組年齡具有可比性。臨床分期按照國際婦產(chǎn)科聯(lián)合會(the international federation of gynaecology and obstetrics，F(xiàn)IGO)標(biāo)準(zhǔn)進行。

1.2 血清HE4、CA125檢測及ROMA的計算 在研究對象未進行相關(guān)治療前采集患者血液4 mL，置于分離膠離心管中，1 h后3000 r/min離心10 min，采用雅培i2000化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法檢測,ROMA由儀器攜帶的軟件自動生成結(jié)果。HE4、CA125檢測前進行室內(nèi)質(zhì)控檢測，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件。首先進行正態(tài)分布檢驗，發(fā)現(xiàn)其不符合正態(tài)分布。兩組之間比較采用非參數(shù)Mann-Whitney U檢驗。記數(shù)資料采用中位數(shù)(P25～P75)表示。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者絕經(jīng)前后HE4、CA125及ROMA水平比較 良惡性卵巢腫瘤患者HE4、CA125及ROMA水平無論在絕經(jīng)前還是絕經(jīng)后差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，卵巢癌組HE4、CA125及ROMA均高于卵巢良性腫瘤組，見表1。

表1 良惡性卵巢腫瘤絕情前后HE4、CA125及ROMA水平比較[中位數(shù)(P25～P75)]

組別絕經(jīng)前絕經(jīng)后HE4/(pmol/L)CA125/(U/mL)ROMA/%HE4/(pmol/L)CA125/(U/mL)ROMA/%卵巢癌組295.2(96.3^723.3)461.0(111.0^1000)86.8(30.5^99.7)320.0(81.2^1049.5)811.7(186.7^1000)91.0(67.2^99.9)卵巢良性腫瘤組39.7(33.8^47.1)18.2(11.1^53.4)4.6(3.1^7.1)50.5(42.1^67.0)12.2(8.8^20.4)9.8(7.7^18.9)Z6.4866.3236.4535.2345.8685.867P0.0000.0000.0000.0000.0000.000

2.2 HE4、CA125及ROMA水平在卵巢癌診斷中的價值 根據(jù)患者絕經(jīng)狀態(tài)的不同得出絕經(jīng)前后各自的ROC曲線(見圖1)，絕經(jīng)前HE4、CA125及ROMA的曲線下面積分別為0.893、0.883、0.891，理想界值分別為69.6 pmol/L、120.0 U/mL、15.9%，其靈敏度分別為79.4%、76.5%、79.4%，特異度分別為100%、91.4%、100%；絕經(jīng)后HE4、CA125及ROMA的曲線下面積分別為0.899、0.947、0.947,理想界值分別為93.2 pmol/L、57.5 U/mL、40.6%，其靈敏度分別為72.7%、90.9%、72.7%，特異度分別為88.4%、95.3%、93.0%。我們采用臨床常用cut-off值(絕經(jīng)前CA125為35.0 U/mL，HE4為70 pmol/L，ROMA為7.4%；絕經(jīng)后CA125為35.0 U/mL，HE4為140 pmol/L，ROMA為25.3%)和ROC曲線計算的最佳cut-off值分別計算其靈敏度和特異度，發(fā)現(xiàn)CA125無論絕經(jīng)前后臨床常用cut-off值較最佳cut-off值其特異度偏低，而靈敏度相對高；HE4主要影響絕經(jīng)后患者，臨床常用cut-off值較最佳cut-off值其特異度更高，靈敏度低。ROMA采用最佳cut-off值在絕經(jīng)前后顯示了較好的靈敏度(79.4%、90.9%)和特異度(100%、93.0%)，但是其cut-off值較臨床常用cut-off值偏高。

2.3 HE4、CA125及ROMA水平與卵巢癌患者臨床分期之間的關(guān)系 無論在絕經(jīng)前還是絕經(jīng)后，HE4、CA125及ROMA在Ⅲ～Ⅳ期水平均比Ⅰ～Ⅱ期高(見表2)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。說明HE4、CA125及ROMA與卵巢癌的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可能與卵巢癌的發(fā)展與預(yù)后具有一定的關(guān)系。

A.絕經(jīng)前;B.絕經(jīng)后。

圖1 HE4、CA125及ROMA檢測卵巢癌ROC曲線圖

表2 CA125、HE4及ROMA與卵巢癌患者臨床分期之間的關(guān)系

nCA125/(U/mL)HE4/(pmol/L)ROMA/%中位數(shù)ZP中位數(shù)ZP中位數(shù)ZP絕經(jīng)前FIGO分期Ⅰ^Ⅱ期17126.1(24.9^715.3)2.9230.003113.3(47.7^358.3)3.0140.00339.2(6.9^94.5)2.9380.003Ⅲ^Ⅳ期17937.2(411.0^>1000.0)547.5(175.1^1116.1)99.0(85.0^99.97)絕經(jīng)后FIGO分期Ⅰ^Ⅱ期9247.3(47.5^619.6)2.8840.00470.6(53.1^98.1)3.9110.00063.3(32.5^71.1)3.8410.000Ⅲ^Ⅳ期13895.1(595.8^>1000.0)710.7(397.0^1497.8)98.6(95.1^99.3)

3 討論

目前臨床上對于卵巢癌診斷和監(jiān)測的首選腫瘤標(biāo)志物是CA125，它是由19號染色體上的MUC16基因編碼的糖蛋白，其分子量為200～1000 ku。研究表明CA125與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有明顯相關(guān)性。但是，CA125在臨床應(yīng)用中仍有許多缺陷[2-3]，主要體現(xiàn)在：①特異性低，許多組織器官良惡性疾病如肺癌、肝硬化、心功能衰竭等均可出現(xiàn)升高；②受月經(jīng)期或妊娠等生理性因素影響大；③在許多婦科良性疾病患者中也可升高。這些因素造成了CA125在診斷和監(jiān)測卵巢癌過程中誤診率較高。

HE4是由WFDC2基因編碼的糖蛋白，1991年由德國的Kirchhoff 等通過cDNA篩查方法從人的附睪組織中克隆發(fā)現(xiàn)，其編碼的蛋白由124個氨基酸組成。它是一個分子量為20～25 ku的小分子分泌型糖蛋白，定位于染色體20q12-q13.1上的14個同源基因之一，全長12 kb左右，由5個外顯子和4個內(nèi)含子組成。據(jù)推測，它參與了免疫反應(yīng)，但其作用尚未準(zhǔn)確確定[4]。它存在于輸卵管上皮、子宮內(nèi)膜、子宮頸內(nèi)腺中，但卵巢表面上皮細胞中未見。卵巢癌組織可分泌HE4，由于其分子量較CA125更小，因此在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，能更快地分泌到外周血中。有文獻報道[5]HE4從正常卵巢、卵巢良性腫瘤到卵巢癌組織中逐漸升高。據(jù)報道，與CA125相比，HE4在鑒別良性和惡性卵巢腫塊方面提供了更好的特異度[6]，因此HE4可能是鑒別惡性和良性卵巢腫瘤的有價值的補充。通過聯(lián)合HE4與CA125結(jié)合患者絕經(jīng)狀態(tài)，Moore等[7]提出了ROMA預(yù)測卵巢癌發(fā)病風(fēng)險概率的數(shù)學(xué)模型，并發(fā)現(xiàn)其診斷卵巢癌的準(zhǔn)確率高達93.8%。

鑒于上述研究結(jié)論，本文選擇卵巢癌患者作為研究對象，發(fā)現(xiàn)HE4、CA125及ROMA在卵巢惡性腫瘤組高于卵巢良性腫瘤組(P<0.05)，表明在卵巢癌的診斷中具有一定的鑒別價值。進一步分析其靈敏度和特異度，發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)前患者HE4和ROMA曲線下面積高于CA125，說明其診斷價值更高。然而在絕經(jīng)后卵巢癌患者中，我們發(fā)現(xiàn)CA125和ROMA診斷曲線下面積高于HE4，與文獻報道[8]不太一致，究其原因可能與本研究中絕經(jīng)后患者大部分為較晚期患者有關(guān)，此時多數(shù)患者CA125出現(xiàn)了明顯升高，從而影響了統(tǒng)計結(jié)果，但是ROMA診斷價值仍然最高。CA125和ROMA采用臨床建議的cut-off值較最佳cut-off值偏低，突出的問題是在臨床診斷中其特異性偏低，而HE4臨床建議的cut-off值較最佳cut-off值在絕經(jīng)后患者偏高，這與文獻報道基本一致[9]。3項指標(biāo)的cut-off值與臨床建議的cut-off值有一定的出入，這可能需要增加研究病例數(shù)進行大樣本的研究以確定最佳cut-off值。另外，我們還研究了CA125、HE4及ROMA在絕經(jīng)前后與卵巢癌的臨床FIGO分期之間的關(guān)系，Ⅰ～Ⅱ期3項指標(biāo)水平明顯低于Ⅲ～Ⅳ期患者，說明其可以反映患者的分期狀況，對于卵巢癌患者的治療評估具有一定的潛在價值[10]。

通過上述研究，我們認(rèn)為CA125、HE4及ROMA在卵巢癌臨床診斷、分期中具有重要價值，尤其以ROMA臨床價值為最大，有利于卵巢癌的臨床鑒別診斷并有助于判斷卵巢癌的臨床分期。