不明原因反復(fù)自然流產(chǎn)患者外周血凝血相關(guān)因子水平及臨床意義

周偉

（上饒市婦幼保健院，江西 上饒 334000）

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（recurrent spontaneous abortion，RSA）是妊娠常見的并發(fā)癥之一，是指孕齡婦女連續(xù)2次及2次以上12周妊娠以內(nèi)自然流產(chǎn)的情況，發(fā)生率約為1%，占所有妊娠丟失的15%～20%[1]。反復(fù)自然流產(chǎn)的發(fā)病原因較為復(fù)雜，包括染色體因素、解剖因素、內(nèi)分泌因素、免疫因素、炎癥因素及病因不明因素，臨床上將這部分病因不明的RSA稱為原因不明反復(fù)自然流產(chǎn)（URSA）[2]。有研究表明，高凝狀態(tài)可能是RSA發(fā)病的原因之一[3]。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，國內(nèi)外目前關(guān)于URSA與外周血凝血相關(guān)因子關(guān)系的報道較少。本課題擬對此進(jìn)行探究，旨在探討URSA患者外周血凝血相關(guān)因子的水平情況，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年3月～2017年2月本院收治的53例反復(fù)自然流產(chǎn)患者作為試驗(yàn)組，選取健康早孕女性作為早孕組，另選取同期本院體檢科查體至少有一次活產(chǎn)史的非妊娠健康女性作為正常未孕組。試驗(yàn)組53例，其中年齡21～39歲，平均年齡為（28.52±5.14）歲，孕周6～12周，自然流產(chǎn)次數(shù)≥2次；早孕組50例，其中年齡22～36歲，平均年齡為（27.28±4.72）歲，孕周＜12周；正常未孕組50例，其中年齡20～37歲，平均年齡為（28.16±5.21）歲，有2次或2次以上妊娠史（至少有1次正常妊娠史）。3組患者臨床基本資料對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 所選患者均于入院后禁食禁水12 h后，于次日凌晨在本院檢驗(yàn)科抽取肘部淺靜脈血5 ml。將抽取的靜脈血置于無菌含3.8%枸櫞酸鈉抗凝管中，以3 000 r/min的離心速度離心10 min，取上清液，置-80℃冰箱冷凍保存，待測。

1.2.2 檢驗(yàn)方法 通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者外周血凝血相關(guān)因子水平，通過發(fā)色底物法檢測患者AT-Ⅲ水平。檢測儀器是由奧地利公司提供的型號為ANTHOSHT11的全自動酶標(biāo)儀，試劑盒均由武漢默沙克生物科技有限公司提供，AT-Ⅲ發(fā)色底物法測定試劑盒由天津市美德太平洋科技有限公司提供，所有具體操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察記錄3組受試者外周血凝血酶片段（Prothrombin fragment 1+2，F(xiàn)1+2）、凝血酶－抗凝血酶（Thrombin-antithrombin,TAT）、纖溶酶原激活物抑制劑－1（Plasminogen activator Inhibitor-1，PAI-1）及抗凝血酶（AntithrombinⅢ,AT-Ⅲ）的水平，同時比較3組受試者F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平間的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選用SPSS 21.0軟件對研究資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)推斷。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗(yàn)組外周血F1+2、TAT、PAI-1水平均高于早孕組與正常未孕組，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；試驗(yàn)組外周血AT-Ⅲ水平低于早孕組與正常未孕組，3組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

反復(fù)自然流產(chǎn)是指孕齡婦女連續(xù)2次及2次以上12周妊娠以內(nèi)自然流產(chǎn)的情況。大量研究資料表明，自然流產(chǎn)易反復(fù)發(fā)生于同一個體，RSA患者流產(chǎn)次數(shù)越多，復(fù)發(fā)率也會隨之升高[4]。隨著分子生物學(xué)研究的發(fā)展，血液高凝狀態(tài)與原因不明復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的關(guān)系已引起了國內(nèi)外大量學(xué)者的關(guān)注。有研究發(fā)現(xiàn)，部分URSA患者存在單純的高凝狀態(tài)，排除遺傳性及獲得性血栓傾向，沒有凝血因子及相關(guān)凝血酶和蛋白的缺乏或變異[5-6]。

表1 3組受試者外周血F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平的比較情況（±s）

表1 3組受試者外周血F1+2、TAT、PAI-1及AT-Ⅲ水平的比較情況（±s）

注：與試驗(yàn)組比較，aP＜0.05

組別試驗(yàn)組早孕組正常未孕組F值P值A(chǔ)T-Ⅲ（ng/ml）255.74±51.61 315.43±41.53a 287.52±48.86a 20.280 0.000例數(shù)53 50 50 F1+2（mg/L）142.16±8.07 40.22±5.19a 38.71±4.93a 15.711 0.000 TAT（ng/ml）4.47±0.55 2.50±0.41a 2.41±0.36a 9.749 0.008 PAI-1（mg/L）9.74±0.84 5.83±0.41a 5.77±0.45a 32.570 0.000

高凝狀態(tài)是指由于人體內(nèi)血中促聚集和促凝因子均增加，而凝血-纖溶系統(tǒng)平衡機(jī)制受損的臨床和病理狀態(tài)。RSA患者的高凝狀態(tài)可通過相關(guān)標(biāo)志物進(jìn)行檢測判斷，其中F1+2就是這種檢測標(biāo)志物[7]。F1+2是一種由因子Xa復(fù)合物水解凝血原后所生成的凝血酶原片段，是凝血酶原激活特異性分子標(biāo)志物[8]。本次研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組外周血F1+2水平均高于早孕組與正常未孕組，從結(jié)果可以看出，外周血F1+2水平的升高會造成凝血酶的過度激活及凝血功能的過度增強(qiáng)，使URSA患者處于高凝狀態(tài)，增加流產(chǎn)的概率。

AT-Ⅲ是一種由血管內(nèi)皮細(xì)胞、肝臟、巨噬細(xì)胞合成的重要抗凝物質(zhì)，可以抑制活化的蛋白酶，包括FIXa、FXa和凝血酶。有研究表示，AT-Ⅲ的活性在妊娠期間沒有明顯變化，但AT-Ⅲ缺乏妊娠婦女出現(xiàn)早中期流產(chǎn)的風(fēng)險是正常妊娠婦女的2倍，發(fā)生死產(chǎn)的風(fēng)險增加了5倍左右[9]。TAT是凝血酶形成后與AT-Ⅲ以1:1比例結(jié)合形成的復(fù)合物，是反映凝血酶已形成的敏感指標(biāo)。當(dāng)機(jī)體內(nèi)TAT水平出現(xiàn)增加時，此時機(jī)體凝血系統(tǒng)處于被激活狀態(tài)[10]。本次研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組外周血TAT水平高于早孕組與正常未孕組，外周血AT-Ⅲ水平低于早孕組與正常未孕組。從本次研究結(jié)果可以看出，當(dāng)URSA孕婦處于高凝狀態(tài)時，凝血酶水平會隨之增高，而外周血AT-Ⅲ會被大量消耗生成TAT，增加TAT水平。

PAI-1是一種多功能絲氨酸蛋白抑制物，是纖溶酶激活物主要的生理抑制因子。正常情況下，妊娠期母-胎界面血管網(wǎng)絡(luò)的雙向物質(zhì)交換的血流灌注依賴于凝血與纖溶間的平衡，滋養(yǎng)細(xì)胞通過表達(dá)和產(chǎn)生一些重要物質(zhì)來維持這種平衡，PAI-1就位于滋養(yǎng)細(xì)胞中。當(dāng)這種平衡被打破，則可導(dǎo)致胎盤床血流不暢，發(fā)生血栓栓塞，出現(xiàn)胎兒供血、供氧不足，從而引發(fā)流產(chǎn)。本次研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組外周血PAI-1水平均高于早孕組與正常未孕組，提示當(dāng)URSA患者體內(nèi)凝血與纖溶間的平衡被打破后，胎盤床局部的PAI-1水平會呈現(xiàn)增高狀態(tài)，直接導(dǎo)致胎盤組織發(fā)生血栓。

綜上所述，不明原因RSA患者外周血F1+2、TAT、PAI-1、AT-Ⅲ水平處于異常狀態(tài)，說明URSA患者血液處于一種高凝狀態(tài)，妊娠后胎盤床微血管易發(fā)生血栓，導(dǎo)致流產(chǎn)。