中國(guó)人群HBV基因型及亞型與肝細(xì)胞癌相關(guān)性的Meta分析

吳玲紅 黃天壬， 鄧偉 黃志碧 國(guó)嬌 黃月瑩

肝細(xì)胞癌（以下簡(jiǎn)稱“肝癌”）是常見(jiàn)的惡性腫瘤，研究顯示HBsAg攜帶者肝癌發(fā)生率較HBsAg陰性者高24.21倍，其中70%～80%的肝癌發(fā)生與HBV感染有關(guān)［1］。HBV基因型及亞型的差異與HBV感染者的臨床癥狀、預(yù)后、抗病毒治療療效及肝癌的疾病譜有關(guān)。近年關(guān)于HBV基因型及其亞型與肝癌關(guān)系的研究較多，但由于各研究的人群、年齡、地域、研究設(shè)計(jì)、樣本量等不同，導(dǎo)致研究結(jié)果不一致。本研究通過(guò)Meta分析方法，系統(tǒng)評(píng)價(jià)HBV基因型及亞型與肝癌的相關(guān)性，以期為肝癌的防治工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 資料來(lái)源

通過(guò)計(jì)算機(jī)檢索（PubMed、Embase、中國(guó)知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)科技期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）及萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)）和文獻(xiàn)追溯法，收集公開(kāi)發(fā)表的關(guān)于中國(guó)人群HBV基因型、亞型與肝癌相關(guān)性的病例對(duì)照研究，語(yǔ)種為中文和英文。檢索時(shí)間為2007年1月至2017年2月。英文檢索詞包括“HCC/liver cancer/hepatocellular carcinoma/CA liver”“HBV/hepatitis B virus”“genotype”“subgenotype”等，中文檢索詞包括“原發(fā)性肝癌/肝癌/肝細(xì)胞癌”“HBV/乙型肝炎”“基因型”“基因亞型”等。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴研究類型為病例對(duì)照研究，病例組為確診的肝癌患者，對(duì)照組為確診的HBV感染非肝癌患者（包括HBV無(wú)癥狀攜帶者、慢性HBV感染者、肝硬化者等）；⑵研究對(duì)象為中國(guó)人群；⑶研究?jī)?nèi)容為中國(guó)人群攜帶HBV基因型及亞型與肝癌的相關(guān)性；⑷對(duì)樣本量有明確規(guī)定，病例組及對(duì)照組均大于50例；⑸能獲取各組HBV基因型與亞型的頻數(shù)分布，或有足夠的信息計(jì)算基因型及亞型的頻數(shù)分布。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴研究?jī)?nèi)容重復(fù)；⑵數(shù)據(jù)不完整；⑶研究對(duì)象重復(fù)感染或因其他原因?qū)е赂闻K疾病；⑷研究對(duì)象涉及動(dòng)物的研究、綜述或摘要；⑸慢性HBV感染相關(guān)疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)描述不清。

1.3 文獻(xiàn)篩選與數(shù)據(jù)提取

由2名研究員分別獨(dú)立根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)，提取文獻(xiàn)的第一作者、發(fā)表年份、病例組與對(duì)照組例數(shù)、病例組與對(duì)照組基因型及亞型的頻數(shù)等信息。

1.4 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)

2名研究員參考英國(guó)牛津循證醫(yī)學(xué)中心文獻(xiàn)嚴(yán)格評(píng)價(jià)項(xiàng)目（CASP）獨(dú)立評(píng)價(jià)納入文獻(xiàn)的質(zhì)量，評(píng)價(jià)條目有以下方面：⑴病例選擇方法是否合適；⑵對(duì)照選擇方式是否合適；⑶病例與對(duì)照診斷方式是否合適；⑷對(duì)照與病例是否具有可比性；⑸樣本量是否充足；⑹是否準(zhǔn)確測(cè)量暴露因素以減少偏倚；⑺數(shù)據(jù)是否充分；⑻研究結(jié)果是否適用當(dāng)?shù)厝巳?；⑼基因型及亞型的結(jié)果是否合理。之后核查，如意見(jiàn)不一致，則通過(guò)討論或由第3位研究者決定是否納入。上述9項(xiàng)，滿足1項(xiàng)得1分，若總分≥7分，則判定文獻(xiàn)質(zhì)量較好。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用RevMan 5.3軟件分析。計(jì)算OR合并值及95%可信區(qū)間（CI）。異質(zhì)性檢驗(yàn)采用Q檢驗(yàn)，異質(zhì)性程度判定用I2值，若異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果P＜0.10且I2＞50.00%，表明研究結(jié)果間存在異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析；若異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果P≥0.10且I2≤50.00%時(shí)，則采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。以雙側(cè)P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 納入研究基本特征及質(zhì)量評(píng)價(jià)

最終檢索到符合標(biāo)準(zhǔn)的研究共38篇，其中HBV基因型與肝癌相關(guān)性研究37篇［2-38］、HBV基因亞型與肝癌相關(guān)性研究 8 篇［3，26，34-39］。質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，所有最終納入的研究評(píng)分均≥7分，提示納入的研究質(zhì)量較好。納入研究基本特征見(jiàn)表1、表2。

表1 納入HBV基因型與肝癌相關(guān)研究的基本特征

表2 納入HBV基因型亞型與肝癌相關(guān)性研究的基本特征

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 HBV基因型與肝癌的相關(guān)性 經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，HBV C基因型和HBV B基因型各納入文獻(xiàn)間存在異質(zhì)性（P＜0.001，I2=73.00%），故采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示HBV C基因型罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)較HBV B 基因型高（OR=2.35，95%CI：1.93～2.87，P＜0.001），見(jiàn)圖1A。經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，HBV C基因型和HBV A/D基因型各納入文獻(xiàn)間存在異質(zhì)性（P＜0.001，I2=82.00%），故采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示HBV C基因型罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)與HBV A/D基因型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=1.25，95%CI：0.20～7.82，P=0.81），見(jiàn)圖 1B。

圖1 HBV基因型與肝癌相關(guān)性的Meta分析

2.2.2 HBV基因亞型與肝癌的相關(guān)性 經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，HBV C1亞型和HBV C2亞型各納入文獻(xiàn)間的異質(zhì)性可忽略（P=0.69，I2=0%），故用固定效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示，HBV C1亞型、HBV C2亞型者罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（OR=1.05，95%CI：0.66～1.68，P=0.82），見(jiàn)圖2A。經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，HBV基因C2亞型和HBV B2亞型各文獻(xiàn)間異質(zhì)性可忽略（P=0.35，I2=10.00%），故用固定效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示，HBV C2亞型罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)較 HBV B2亞型高（OR=1.77，95%CI：1.38～2.27，P＜0.001），見(jiàn)圖2B。

2.3 敏感性分析

采用固定效應(yīng)模型及隨機(jī)效應(yīng)模型分別合并后，再用比較其結(jié)果是否逆轉(zhuǎn)的方法進(jìn)行敏感性分析，可在一定程度上反映結(jié)果的可靠程度。本研究采用兩種效應(yīng)模型分別計(jì)算，各合并結(jié)果未見(jiàn)逆轉(zhuǎn)，說(shuō)明結(jié)果可靠。

3 討論

HBV基因型及其亞型與HBV感染者抗病毒治療效果以及肝癌的發(fā)生發(fā)展等有關(guān)［40］。根據(jù)HBV全基因組序列差異程度（以≥8%的序列差異為分型標(biāo)準(zhǔn)），HBV基因型至少被分為10個(gè)基因型，其中A、B、C、D為主要基因型。東南亞地區(qū)以B和C基因型最常見(jiàn)，北美和歐洲則以A和D基因型常見(jiàn)。攜帶不同HBV基因型、亞型患者肝癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)目前存在較大爭(zhēng)議。Chan［41］研究顯示，攜帶HBV C基因型者罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)較B基因型者增加2～3倍。而多項(xiàng)橫斷面研究［42-43］顯示，攜帶HBV B基因型與HBV C基因型者罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)差異不大。一項(xiàng)病例對(duì)照研究［44］表明，攜帶HBV A基因型者發(fā)生肝癌的風(fēng)險(xiǎn)較HBV D基因型者增加了5倍，但Madan等［45］研究并未觀察到同樣結(jié)論。Meta分析是針對(duì)多個(gè)同類研究結(jié)果進(jìn)行定量合并分析，以提高統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)效能，使研究結(jié)論更加可信。本研究通過(guò)Meta分析結(jié)果顯示，攜帶HBV C基因型者罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)是HBV B基因型的2.35倍，HBV C基因型罹患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)是HBV A/D基因型的1.25倍，說(shuō)明攜帶HBV C基因型者與HBV A、B、D基因型者相比，罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)更高，HBV C基因型感染的患者較易轉(zhuǎn)化為活躍的肝臟疾病及嚴(yán)重肝硬化，因此應(yīng)密切監(jiān)測(cè)，預(yù)防肝癌發(fā)生發(fā)展。HBV亞型分析結(jié)果顯示，攜帶HBV C1亞型、HBV C2亞型者罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但攜帶HBV C2亞型者罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)較攜帶HBV B2亞型者高，與Wong等［46］研究結(jié)果相似，但本次研究OR值可信區(qū)間更窄，因此估計(jì)結(jié)果更可靠。

圖2 HBV基因型亞型與肝癌相關(guān)性的Meta分析

本次Meta分析發(fā)表偏倚可忽略，納入文獻(xiàn)質(zhì)量較優(yōu)，但由于納入的研究均為病例對(duì)照研究，屬回顧性調(diào)查，其結(jié)果真實(shí)性較前瞻性研究差，可能影響分析結(jié)果。目前HBV基因型及其亞型與肝癌的相關(guān)性尚缺乏前瞻性研究，在罕見(jiàn)疾病中，病例對(duì)照效應(yīng)值OR值與隊(duì)列研究效應(yīng)值RR值近似相等，故認(rèn)為本次病例對(duì)照研究的Meta分析對(duì)進(jìn)一步探討HBV基因型及亞型與肝癌的相關(guān)性仍具有參考價(jià)值。

綜上所述，攜帶HBV C基因型較攜帶HBV A、B、D基因型者罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)更高，攜帶HBV C2亞型者罹患肝癌風(fēng)險(xiǎn)較HBV B2亞型高，因此應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)感染HBV C基因型患者，預(yù)防肝癌發(fā)生發(fā)展，這一結(jié)論對(duì)篩選肝癌高危人群及肝癌的預(yù)防工作具有一定參考價(jià)值。