狼瘡抗凝物質(zhì)檢測在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的意義

吳惠潔，朱佩武，陳靜超，侯玲玲，金艷慧，王明山

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，浙江 溫州 325000）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因不明的自身免疫性疾病，多見于中年女性[1]。RA患者體內(nèi)凝血功能存在異常[2]，狼瘡抗凝物質(zhì)（Lupus anticoagulant material，LA）是抗磷脂抗體之一，可促進血栓形成，導(dǎo)致反復(fù)發(fā)生的動靜脈血栓[3]。本研究通過比較RA及體檢健康者血LA水平和凝血水平，探討LA的變化對RA的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月-2015年8月在本院初次確診的78例RA為RA組，入組患者均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會及歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟（ACR/EULAR）制定的分類診斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5]，其中男12例，女66 例，年齡 13-84 歲，平均（53.6±17.5）歲；另按照年齡、性別相匹配同期隨機選取體檢健康者60例作為正常對照組，男15例，女45例，年齡22-78歲，平均（52.6±14.8）歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），本研究通過醫(yī)院倫理委員會審查，且所有對象試驗前均未服用影響凝血功能的藥物，并對本研究知情同意。

1.2 方法 采集兩組足量靜脈血置入含0.109 mol/L枸櫞酸鈉抗凝劑的真空采血管中，顛倒混勻后3000r/min離心10分鐘，得乏血小板血漿（PPP），及時上機檢測各指標(biāo)。采用血漿蝰蛇毒時間進行狼瘡抗凝物質(zhì)（LA）篩選試驗和確診試驗，并計算LA比值（LAR）；采用一期凝固法檢測血漿凝血酶原時間（PT）及活化部分凝血活酶時間（APTT）；采用凝固法檢測纖維蛋白原含量（FIB）；采用免疫比濁法檢測D-二聚體含量（D-D）；采用發(fā)色底物法檢測抗凝血酶活性 （AT:A）。上述各指標(biāo)檢測均在法國STAGO STA-R自動血凝儀上進行，使用原裝配套試劑和質(zhì)控品，并嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行。以各檢測指標(biāo)超過正常對照組的為陽性，分別計算各指標(biāo)的敏感度、特異度、陽性似然比和陰性似然比、陽性和陰性預(yù)測值及曲線下面積（AUC）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，血漿各檢測結(jié)果以（±s）表示，對各檢測數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗，組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗，并進行ROC曲線下面積分析。

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果 與正常對照組比較，RA組LAR、APTT、FIB及D-D明顯升高，AT:A顯著降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），兩組在PT上比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 詳見表 1。

2.2 診斷效能 對RA組各項指標(biāo)進行診斷效能分析。其中D-D的敏感度最高，為97.4%，PT和APTT的特異度最高，均為85%；LAR的敏感度及特異度分別為78.2%及83.3%。與其他指標(biāo)比較LAR的陽性預(yù)測值及陽性似然比最高，分別為85.9%及4.69，其預(yù)測分界值為1.115，其曲線下面積最高，AUC為0.935（圖1）。 詳見表2。

表1 RA組與正常對照組各項參數(shù)結(jié)果比較（±s）

表1 RA組與正常對照組各項參數(shù)結(jié)果比較（±s）

與正常對照組比較*P＜0.05

組別 n L A R P T（s） A P T T（s） F I B（g/L） D-D（m g/L） A T:A（%）R A 組 7 8 1.2 5 4±0.1 6 7* 1 3.6 3±0.7 9 4 0.7 6±6.1 6* 4.5 2±1.4 0* 2.6 0 6±2.1 5 7* 8 4.8±1 0.1 1 5*正常對照組 6 0 1.0 1 9±0.0 7 5 1 3.6 2±0.6 0 3 6.0 1±4.5 3 3.0 3±0.5 7 0.3 9 6±0.0 9 7 1 0 4.8±9.1 1 9

表2 RA組LAR與凝血指標(biāo)結(jié)果的診斷效能

3 討論

在自身免疫性疾病及心、腦、血管疾病中，抗磷脂抗體（APA）的作用逐漸受到重視，APA包括狼瘡抗凝物質(zhì)（LA）和抗心磷脂抗體（ACA）等。狼瘡抗凝物質(zhì)是一種磷脂依賴性病理性的循環(huán)抗凝物質(zhì)，為免疫球蛋白IgG、IgM或兩者混合型的抗磷脂抗體[6]，主要存在于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、膠原性疾病等自身免疫性疾病及腫瘤中，還可見于動、靜脈血栓及習(xí)慣性流產(chǎn)患者中。狼瘡抗凝物質(zhì)具有干擾凝血酶原反應(yīng)、引起凝血系統(tǒng)異常的作用，在體內(nèi)主要通過抑制生理性抗凝物質(zhì)蛋白C的激活和干擾外周血血栓烷A2和前列環(huán)素的變化，促進血栓形成。

D-D是繼發(fā)性纖溶亢進的特征性產(chǎn)物，F(xiàn)IB是凝血的基礎(chǔ)物質(zhì)，這些物質(zhì)升高表示機體凝血功能增強，血液處于高凝狀態(tài)?？鼓福ˋT）是機體生理性抗凝系統(tǒng)的重要成分，主要由肝臟合成，是凝血過程所產(chǎn)生的絲氨酸蛋白酶的主要抑制劑，正常情況下機體凝血、抗凝血系統(tǒng)處于動態(tài)平衡，當(dāng)受到某種刺激激活了凝血系統(tǒng)時，抗凝系統(tǒng)也同時會被激活而消耗[7]。本研究結(jié)果顯示，RA組LAR、APTT、D-D、FIB水平均顯著高于正常對照組，AT:A水平顯著低于正常對照組（均P＜0.05），提示RA患者凝血功能增強，相應(yīng)的血栓風(fēng)險增加，而APTT延長則可能與LA增多對APTT實驗的干擾有關(guān)。對狼瘡患者LAR的診斷效能進行分析發(fā)現(xiàn)，LAR的診斷敏感度為78.2%，特異度為83.3%，相對其他實驗室指標(biāo)，LAR具有最佳的陽性預(yù)測值及陽性似然比，通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，LAR的ROC曲線下面積最高，AUC為0.935，具有一定的輔助診斷價值。

綜上，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血液總狼瘡抗凝物質(zhì)增多，凝血功能增強，提示較高的血栓風(fēng)險，臨床聯(lián)合檢測LAR有助于RA的診斷。