肺癌患者血清TNF-α、IL-6與凝血功能的相關(guān)性研究

李少昆 安生花 郭鳳龍 崔麗萍

目前，肺癌是全世界發(fā)病率與病死率最高的惡性腫瘤，有報(bào)道顯示全球范圍內(nèi)肺癌的發(fā)生率及死亡率分別為12.7%、18.2%，嚴(yán)重威脅患者身心健康和生活質(zhì)量[1-2]。肺癌患者常伴隨全身性炎癥反應(yīng)，活化的炎癥細(xì)胞釋放各種炎癥因子，參與肺組織損傷和疾病進(jìn)程。有研究[3]表明呼吸系統(tǒng)疾病患者體內(nèi)存在凝血平衡失調(diào)、紊亂，而炎癥因子在凝血系統(tǒng)中發(fā)揮重要的作用，其不僅能介導(dǎo)和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，還能誘導(dǎo)凝血系統(tǒng)表達(dá)炎癥因子，進(jìn)一步擴(kuò)大炎癥反應(yīng)和凝血過程[4]。TNF-α和IL-6是重要的炎癥因子，通過NF-κB信號(hào)通路參與腫瘤相關(guān)慢性炎癥過程[5]，而APTT、PT、FIB、DD、PLT是凝血功能中的主要指標(biāo)，本研究通過對不同臨床分期的肺癌患者及健康體檢者體內(nèi)血清炎癥因子TNF-α、IL-6 和凝血指標(biāo)APTT、PT、FIB、DD、PLT水平的分析與對比，探討二者的關(guān)系，為臨床診治提供參考。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2012年1月至2016年12月在我院診治的肺癌患者65例作為觀察組，選取我院健康體檢人員50例作為對照組。對照組男性36例、女性14例，平均年齡(57.5±9.1)歲；觀察組男性41例、女性24例，平均年齡(56.9±8.4)歲，2組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核并批準(zhǔn)。

1.2 觀察組納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床癥狀、病理組織學(xué)、臨床影像學(xué)確診為原發(fā)性肺癌；②確診后6個(gè)月內(nèi)未受過任何化療、放療以及生物免疫治療等抗腫瘤治療；③根據(jù)2009年國際肺癌研究學(xué)會(huì)公布的第7版肺癌TNM分期系統(tǒng)，將觀察組病例按臨床分期分組，其中Ⅰ期15例，Ⅱ期13例，Ⅲ期20例，Ⅳ期17例；④活動(dòng)狀態(tài)KARNOFSKY評分(KPS)≥60分；⑤對本研究知情且已簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期使用磺胺類、利尿劑等藥物及抗凝藥物者；②近期有出血性疾病史；③合并有其他內(nèi)分泌、免疫和代謝性疾病者；④嚴(yán)重心、肝、腎等器官及骨髓功能異常者。

1.3 觀察指標(biāo)

對血清炎性因子的水平及凝血指標(biāo)進(jìn)行檢測，其中血清炎性因子包括TNF-α、IL-6，凝血指標(biāo)包括APTT、PT、FIB、DD、PLT水平。

1.4 檢測方法

所有受試人員均于清晨空腹采集靜脈血5 ml，將血液標(biāo)本置于肝素抗凝管中，以3 000 r/min 速度離心10 min，避免溶血，取血清置于EP管，后保存于-80 ℃冰箱。

待標(biāo)本收集齊后，所有受試人員均使用TNF-α試劑盒(Genzyme，美國)、IL-6試劑盒(Genzyme，美國)通過酶聯(lián)反應(yīng)吸附測定法(anzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清TNF-α、IL-6水平；APTT、PT、FIB、DD的測定使用Sysmex CA7000全自動(dòng)凝血分析儀，其中APTT、PT、FIB的檢測采用凝固法，DD的檢測采用免疫比濁法，PLT計(jì)數(shù)使用Sysmex XT-2000i 全自動(dòng)血液分析儀。測定步驟嚴(yán)格按照儀器及試劑盒使用說明書的操作規(guī)程進(jìn)行并由我院檢驗(yàn)科同一組工作人員執(zhí)行，同一指標(biāo)檢測所用監(jiān)測儀器型號(hào)相同，試劑盒放入-20 ℃冰箱保存。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組血清炎性因子水平的比較

對照組血清TNF-α、IL-6水平顯著低于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)；觀察組Ⅰ期血清TNF-α、IL-6水平顯著低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期(P均<0.05)，觀察組Ⅱ期血清TNF-α、IL-6水平顯著低于Ⅲ、Ⅳ期(P均<0.05)，觀察組Ⅲ血清TNF-α、IL-6水平顯著低于Ⅳ期(P<0.05)。見表1。

表1 2組血清炎性因子水平的比較

注：*為與對照組比，P<0.05；a為與Ⅰ期比，P<0.05；b為與Ⅱ期比，P<0.05；c為與Ⅲ期比，P<0.05。

2.2 2組凝血指標(biāo)的比較

對照組FIB、DD濃度顯著低于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)；對照組APTT、PLT水平顯著高于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)；對照組PT水平顯著低于觀察組Ⅲ、Ⅳ，但與觀察組Ⅰ、Ⅱ無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見表2。

表2 2組凝血指標(biāo)的比較

注：*為與對照組比，P<0.05；a為與Ⅰ期比，P<0.05；b為與Ⅱ期比，P<0.05；c為與Ⅲ期比，P<0.05。

2.3 肺癌患者血清TNF-α與凝血指標(biāo)的相關(guān)性分析

血清TNF-α水平與APTT、PLT呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.963，P=0.009；γ=-0.963，P=0.009)，TNF-α與PT、FIB、DD呈正相關(guān)(γ=0.940，P=0.017；γ=0.996，P=0.000；γ=0.987，P=0.002)。

2.4 肺癌患者血清IL-6與凝血指標(biāo)的相關(guān)性分析

血清IL-6水平與APTT、PLT呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.986，P=0.002；γ=-0.993，P=0.001)，IL-6與FIB、DD呈正相關(guān)(γ=0.979，P=0.004；γ=0.993，P=0.001)，IL-6與PT無相關(guān)性(P>0.05)。

3 討論

大量研究顯示肺癌患者體內(nèi)存在炎癥反應(yīng)，許多炎癥因子參與這一過程。TNF-α是由活化巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和T 細(xì)胞等產(chǎn)生的具有多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，可以激活人體的炎癥細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)炎癥細(xì)胞對炎癥因子、氮基團(tuán)與氧自由基的釋放。IL-6 主要由單核、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可作用于多種靶細(xì)胞，參與炎癥等多種病理生理過程[6]。王菀菀等[7]研究顯示，肺癌患者體內(nèi)血清TNF-α、IL-6水平顯著高于正常對照組，與本研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果還顯示，隨著肺癌患者的病情加重，血清TNF-α、IL-6水平呈上升趨勢，提示血清TNF-α、IL-6水平可作為檢測肺癌嚴(yán)重程度的診斷指標(biāo)。

肺癌患者癌組織可以分泌促凝血、促血小板凝聚物質(zhì)，使機(jī)體處于高凝狀態(tài)，嚴(yán)重的可以導(dǎo)致血栓的形成，癌癥患者凝血異?？烧T發(fā)癌灶轉(zhuǎn)移,使患者病情加劇[8]。APTT、PT、FIB、DD、PLT是反應(yīng)凝血系統(tǒng)狀態(tài)的重要指標(biāo)，其中APTT是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和最常用的指標(biāo)，PT是外源凝血系統(tǒng)最常用的指標(biāo)，APTT和PT主要用來反映內(nèi)外源凝血系統(tǒng)是否正常[9]。本研究結(jié)果顯示，對照組APTT水平顯著高于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)，并隨著臨床分期的增加，APTT水平顯著降低(P<0.05)，對照組PT水平顯著低于觀察組Ⅲ、Ⅳ期，但與觀察組Ⅰ、Ⅱ期差異不顯著，以上結(jié)果說明肺癌患者體內(nèi)存在凝血功能紊亂。FIB可以促進(jìn)血小板的聚集，促進(jìn)平滑肌和內(nèi)皮細(xì)胞的生長、增殖和收縮，增加血液粘滯性和外周阻力，引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷[10]。本研究結(jié)果顯示，對照組FIB水平顯著低于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)，并隨著臨床分期的增加，F(xiàn)IB水平顯著升高(P<0.05)，說明肺癌患者血液處于高凝狀態(tài)，血液粘滯性增加。DD的測定對于診斷與治療纖溶系統(tǒng)疾病及與之相關(guān)的疾病有重要的意義，血小板具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生化組成，在止血、傷口愈合、炎癥反應(yīng)等生理病理過程中有重要作用[11]，本研究結(jié)果顯示，對照組DD水平顯著低于各個(gè)時(shí)期的觀察組(P均<0.05)，并隨著臨床分期的增加，DD水平顯著升高(P<0.05)。以上結(jié)果說明肺癌患者體內(nèi)存在凝血功能紊亂，并隨臨床分期的增加，紊亂加劇，本研究中肺癌患者FIB、DD水平的變化與王會(huì)芳等[12]研究結(jié)果一致。

炎癥因子在凝血、抗凝和纖溶系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，不僅可以直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞，而且能誘導(dǎo)凝血系統(tǒng)表達(dá)炎癥因子，炎癥因子會(huì)增加細(xì)胞表面黏附分子的表達(dá)，誘導(dǎo)炎性趨化，中性粒細(xì)胞聚集于炎癥部位并產(chǎn)生大量自由基、活性氧和一氧化氮等，抑制血管內(nèi)皮修復(fù)，導(dǎo)致血管高通透性，加劇凝血異常[13]。施益挺等[14]研究顯示，健康者、肺癌患者、肺部感染患者3組受試人員的血清IL-6水平與PT呈線性負(fù)相關(guān)，與本研究結(jié)果顯示的肺癌患者體內(nèi)血清IL-6水平與PT無相關(guān)性不一致，可能與兩研究的研究對象不同有關(guān)。另外本研究結(jié)果還顯示，肺癌患者血清TNF-α水平與APTT、PLT呈負(fù)相關(guān)，與PT、FIB、DD呈正相關(guān)；血清IL-6水平與APTT、PLT呈負(fù)相關(guān)，與FIB、DD呈正相關(guān)，說明肺癌患者體內(nèi)血清TNF-α、IL-6水平與凝血指標(biāo)具有相關(guān)性。

綜上所述，肺癌患者體內(nèi)存在炎癥反應(yīng)和凝血功能紊亂，且隨著臨床分期的增加反應(yīng)加劇，并且其血清炎癥因子和凝血指標(biāo)之間具有相關(guān)性。