上皮性卵巢癌患者血漿中化療耐藥相關(guān)蛋白標(biāo)志物的臨床表達(dá)意義

張惠淵

卵巢惡性腫瘤發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌，列居第3位，其中以上皮性卵巢癌最常見，占卵巢腫瘤的50%～70%。目前治療上皮性卵巢癌的主要方法是早期進(jìn)行全面手術(shù)，術(shù)后進(jìn)行化療。但是惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥常常最終導(dǎo)致化療失敗，進(jìn)而影響患者恢復(fù)[1]。在治療卵巢癌的過程中，使用生物標(biāo)志物，預(yù)測(cè)卵巢癌的化療耐藥，對(duì)于治療此種惡性腫瘤具有重要意義。本次研究通過對(duì)比分析化療敏感和化療耐藥2組上皮性卵巢癌患者的血漿蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)差異蛋白質(zhì)表達(dá)點(diǎn)，預(yù)測(cè)與上皮性卵巢癌化療耐藥相關(guān)的蛋白標(biāo)志物，進(jìn)而指導(dǎo)化療用藥，為卵巢癌患者探索新的治療方法。

1 材料與方法

1.1 一般資料

本次研究選取2014年12月至2016年12在本院接受治療的上皮性卵巢癌患者169例，均采用手術(shù)與化療聯(lián)合治療，化療4～6個(gè)療程。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。采集患者術(shù)后化療的血漿標(biāo)本，根據(jù)NCCN卵巢癌診療指南[2]，將患者標(biāo)本分為2組。對(duì)照組85例，F(xiàn)/M為47/38例(化療敏感：初期予以基礎(chǔ)化療，病情緩解，停止化療半年后復(fù)發(fā))，年齡45～55歲28例，年齡55～65歲33例，年齡65～75歲24例。試驗(yàn)組84例(化療耐藥：初期予以基礎(chǔ)化療，病情緩解，停止化療半年內(nèi)復(fù)發(fā))，年齡45～55歲29例，年齡55～65歲37例，年齡65～75歲18例。2組患者年齡基本資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 患者納入排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均為上皮性卵巢癌患者；②其他器官無惡性腫瘤且無相關(guān)惡性腫瘤疾病的病史；③均采用手術(shù)與化療的聯(lián)合治療方法，化療4～6療程；④根據(jù)卵巢惡性腫瘤手術(shù)病理分期(FIGO)[3]分為Ⅰ～Ⅳ期。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他病理類型的卵巢癌患者；②未進(jìn)行手術(shù)與化療的聯(lián)合治療；③患有其他部位惡性腫瘤或有過相關(guān)疾病病史；④不符合FIGO病理分期。

1.3 上皮性卵巢癌復(fù)發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

①腫瘤標(biāo)志物水平升高；②影像學(xué)檢查提供依據(jù)；③其他檢查出現(xiàn)異常；④腹脹、腹痛、排便異常等消化道癥狀，部分患者陰道出血[4]。出現(xiàn)以上任一情況，可根據(jù)臨床表現(xiàn)、癥狀及以上檢查予以診斷復(fù)發(fā)。

1.4 檢測(cè)方法

采集患者血漿標(biāo)本，分為2組即對(duì)照組(化療敏感)和試驗(yàn)組(化療耐藥)，運(yùn)用雙向凝膠電泳的技術(shù)，篩選2組患者的差異蛋白質(zhì)表達(dá)點(diǎn)，并對(duì)其進(jìn)行圖像掃描分析并鑒定[5]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié)果

2.1 上皮性卵巢癌患者化療耐藥與手術(shù)病理分期的關(guān)系

本次研究中，對(duì)照組(化療敏感)患者病例85例，其中Ⅰ期42例，Ⅱ期34例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例；試驗(yàn)組(化療耐藥)患者病例84例，其中Ⅰ期20例，Ⅱ期 31例，Ⅲ期 28例，Ⅳ期5例。2組對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(C=0.67，P=0.04)，說明化療耐藥與手術(shù)病理分期存在一定的相關(guān)性。

2.2 2組患者血漿2-DE結(jié)果比較及蛋白質(zhì)鑒定

將2組血漿標(biāo)本分為上皮性卵巢癌對(duì)照組(化療敏感)和試驗(yàn)組(化療耐藥)，使用2-DE技術(shù)篩選出差異蛋白點(diǎn)并進(jìn)行鑒定，蛋白質(zhì)表達(dá)用灰度值表示，灰度值均值相除得到差異倍數(shù)，蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)或下調(diào)>200%，發(fā)現(xiàn)其中明顯上調(diào)的有：凝集素、碳酸酐酶、補(bǔ)體 C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 鏈；明顯下調(diào)的有：補(bǔ)體 C3、觸珠蛋白、載脂蛋白 E、β-2-糖蛋白、甲狀腺素運(yùn)載蛋白、補(bǔ)體因子I輕鏈、Igγ-2 鏈C區(qū)、Igγ-1鏈C區(qū)、Igκ鏈C區(qū)，見表1。

表1 2組患者結(jié)果對(duì)比及蛋白質(zhì)鑒定

3 討論

卵巢癌是僅次于子宮頸癌和子宮體癌的女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，早期難以發(fā)現(xiàn)，致死率位居?jì)D科惡性腫瘤首位。上皮性卵巢癌更是其中的典型，對(duì)婦女患者身體健康造成嚴(yán)重威脅[6]。目前治療上皮性卵巢癌的大多數(shù)方法是手術(shù)基礎(chǔ)上輔助化療，聯(lián)合治療。化療是目前治療惡性腫瘤重要的手段之一，但是惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥常常最終導(dǎo)致化療失敗，進(jìn)而影響患者恢復(fù)，這也是卵巢癌患者的致死率居高不下的原因[7-10]。對(duì)于婦科腫瘤臨床而言，及早發(fā)現(xiàn)并診斷化療耐藥有利于進(jìn)一步改善上皮性卵巢癌的預(yù)后。生物標(biāo)志物是指可以標(biāo)記系統(tǒng)、器官、組織、細(xì)胞及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)或功能的改變或可能發(fā)生的改變的生化指標(biāo)，應(yīng)用廣泛，目前多用于疾病診斷、判斷疾病分期或新療法在目標(biāo)人群中的安全性及有效性[11-12]。本次研究通過篩選差異蛋白表達(dá)點(diǎn)，探討蛋白質(zhì)標(biāo)志物對(duì)于治療卵巢癌是否具有重要的臨床應(yīng)用意義。

本次研究中，運(yùn)用雙向凝膠電泳技術(shù)，分析對(duì)比上皮性卵巢癌患者的血漿，篩選出對(duì)照組(化療敏感)與試驗(yàn)組(化療耐藥)不同患者的血漿中存在差異蛋白質(zhì)表達(dá)點(diǎn)32個(gè)，其中試驗(yàn)組較對(duì)照組上調(diào)的蛋白質(zhì)表達(dá)點(diǎn)共有20個(gè)，其中表現(xiàn)明顯的有：凝集素、碳酸酐酶、補(bǔ)體C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 鏈；試驗(yàn)組較對(duì)照組下調(diào)的蛋白質(zhì)表達(dá)點(diǎn)共有12個(gè)，其中表現(xiàn)明顯的有：補(bǔ)體C3、觸珠蛋白、載脂蛋白E、β-2-糖蛋白、甲狀腺素運(yùn)載蛋白、補(bǔ)體因子I輕鏈、Igγ-2鏈C區(qū)、Igγ-1鏈C區(qū)、Igκ鏈C區(qū)。這些差異蛋白質(zhì)的下調(diào)或上調(diào)，可以反映患者的機(jī)體情況或者某些病情的改變，有利于在婦科腫瘤臨床中篩選化療耐藥的生物標(biāo)志物，對(duì)于卵巢癌的預(yù)測(cè)、預(yù)后及診斷復(fù)發(fā)有重要意義。

綜上所述，上皮性卵巢癌患者中，化療耐藥與化療敏感不同患者的血漿中存在差異蛋白表達(dá)點(diǎn)，其中表達(dá)明顯的α1-抗胰蛋白酶、β-2-糖蛋白、觸珠蛋白、甲狀腺素運(yùn)載蛋白等可能通過不同的機(jī)制影響了上皮性卵巢癌的化療耐藥，研究中標(biāo)記出來的差異蛋白表達(dá)點(diǎn)有可能成為上皮性卵巢癌化療耐藥相關(guān)的蛋白質(zhì)標(biāo)志物，在臨床應(yīng)用中具有重要研究價(jià)值。