紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液對(duì)結(jié)腸癌療效及對(duì)細(xì)胞增殖和免疫系統(tǒng)的影響

佟 柳，李玉蘭，郭 星，付曉麗，張惠卿，陳學(xué)謙

隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快及飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)腸癌發(fā)病率逐年上升，目前該病的治療仍以手術(shù)和化療為主[1]，化療藥物的多種不良反應(yīng)給結(jié)腸癌患者帶來(lái)了極大的痛苦[2]。復(fù)方苦參注射液是中藥注射劑，含有苦參、土茯苓、白茯苓等多味中藥，經(jīng)現(xiàn)代技術(shù)加工制成，其具多種抗腫瘤活性而被廣泛應(yīng)用于臨床惡性腫瘤的治療中[3]。中醫(yī)藥的運(yùn)用能有效減緩化療帶來(lái)的不良反應(yīng)，對(duì)結(jié)腸癌生存質(zhì)量及預(yù)后都極為有利[4-5]。本研究觀察了紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖及免疫系統(tǒng)的影響?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取保定市第一中心醫(yī)院2015年5月—2017年6月收治的結(jié)腸癌術(shù)后化療患者60例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理學(xué)診斷符合結(jié)腸癌；②預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月；③首次入院手術(shù)并行術(shù)后化療；④患者及其家屬對(duì)研究知情并簽署同意書(shū)；⑤對(duì)本研究所用藥物不過(guò)敏；⑥無(wú)肝腎功能及血液系統(tǒng)嚴(yán)重疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心腦血管、肝腎、血液、神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾??；②結(jié)腸癌復(fù)發(fā)及發(fā)生癌癥轉(zhuǎn)移者；③有化療禁忌證或已停用化療藥物；④對(duì)本研究使用藥物過(guò)敏或認(rèn)知功能障礙者。⑤伴有糖尿病、甲狀腺疾病及胃腸道疾病等影響研究療效及預(yù)后者。按化療方法分為觀察組和對(duì)照組，每組30例。觀察組男18例，女12例；年齡33～67(47.67±7.31)歲；病理類型：未分化癌8例，腺癌7例，黏液腺癌15例；對(duì)照組男20例，女10例；年齡32～68(47.51±7.23)歲；病理類型：未分化癌7例，腺癌6例，黏液腺癌17例。2組在性別、年齡、病理類型方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2治療方法 對(duì)照組采取常規(guī)化療方案：紫杉醇注射液(哈藥集團(tuán)生物工程有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20059962 )135～175 mg/m2，腹腔灌注，1次/d，每2周為1個(gè)周期，共治療2個(gè)周期。觀察組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液(山西振東制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z14021230)20 ml溶于生理鹽水100 ml中，靜脈滴注，1次/d，應(yīng)用于整個(gè)化療周期。2組化療期間均給予保肝、止吐及對(duì)癥處理。

1.3觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.3.1臨床療效判定： 近期療效評(píng)定按WHO 實(shí)體瘤客觀療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[6]。完全緩解(CR)：所有病灶消失；部分緩解(PR)：病灶縮小50%；進(jìn)展(PD)：病灶增加25%；無(wú)效(SD)：非CR、PR、PD患者。治療有效率=(CR+PR)/總例數(shù)×100%。

1.3.2化療不良反應(yīng)判定：根據(jù)WHO抗癌藥物毒性反應(yīng)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)[6]分為0級(jí)、I級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅳ級(jí)，分別評(píng)價(jià)2組血液毒性和胃腸道反應(yīng)情況：血液毒性包括白細(xì)胞異常，血小板減少或全身、顱內(nèi)出血。胃腸道反應(yīng)包括惡心嘔吐、腹痛腹瀉、便秘。

1.3.3外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：分別于化療前和化療2個(gè)療程完成后，抽取2組空腹靜脈血5 ml，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群(試劑盒由南京建成生物工程研究所提供)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3.4細(xì)胞轉(zhuǎn)移增殖情況：于化療2個(gè)療程完成后第3天，采集2組的淋巴細(xì)胞PBS洗滌制成單細(xì)胞懸濁液，加入試劑反應(yīng)后上機(jī)檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移增殖情況。記錄2組干擾素-γ(IFN-γ)增殖水平及淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞介素-2(IL-2)表達(dá)水平、T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移率及淋巴細(xì)胞凋亡率。

2 結(jié)果

2.12組療效比較 觀察組總有效率高于對(duì)照組(χ2=5.454，P=0.0195)。見(jiàn)表1。

表1 2組結(jié)腸癌療效比較[例(%)]

注：對(duì)照組采用常規(guī)化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與對(duì)照組比較，aP<0.05

2.22組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 2組化療前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；熀驝D3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞水平均低于治療前，CD8+水平高于治療前(P<0.05)。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK水平高于對(duì)照組，CD8+水平低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.32組化療不良反應(yīng)程度比較 觀察組化療后不良反應(yīng)總發(fā)生率為13.33%，對(duì)照組不良反應(yīng)總發(fā)生率為50.00%；觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組(χ2=9.319，P=0.0023)。見(jiàn)表3。

2.42組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移和增殖情況比較 觀察組IFN-γ、IL-2 水平及T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移率高于對(duì)照組，淋巴細(xì)胞凋亡率低于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表2 2組結(jié)腸癌化療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

注：對(duì)照組采用常規(guī)化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與治療前比較，aP<0.05

表3 2組結(jié)腸癌化療不良反應(yīng)發(fā)生情況比較[例(%)]

注：對(duì)照組采用常規(guī)化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液；與對(duì)照組比較，aP<0.05

表4 2組結(jié)腸癌化療后淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移和增殖情況

注：對(duì)照組采用常規(guī)化療，觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用復(fù)方苦參注射液

3 討論

結(jié)腸癌發(fā)病率居我國(guó)惡性腫瘤第4位。目前該病的治療方式為結(jié)腸癌根治術(shù)結(jié)合術(shù)后化療，但化療易引起消化道反應(yīng)及骨髓抑制等多種不良反應(yīng)，采用化療藥物引發(fā)的耐藥性及毒副作用一直是相關(guān)學(xué)者重點(diǎn)關(guān)注的難題[7-8]。因而尋求高效低毒的結(jié)腸癌治療方式，積極治療化療相關(guān)的不良反應(yīng)，可提高該類患者生存率、改善其生活質(zhì)量及預(yù)后[4]。

結(jié)腸癌常用的化療藥物包括順鉑、紫杉醇、卡培他濱、欖香烯等，均具有化療作用[9]。紫杉醇是從紅豆杉樹(shù)皮中分離提純的天然次生代謝產(chǎn)物，具有良好的抗腫瘤效果[10-12]。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，紫杉醇可顯著降低T淋巴細(xì)胞、IFN-γ的水平，抑制淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、增殖,該藥還能促進(jìn)體內(nèi)CD8+細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的活化，增強(qiáng)癌癥患者T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞的抗腫瘤活性。紫杉醇可阻止細(xì)胞分裂，激活巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的抗癌作用[13]。紫杉醇通過(guò)結(jié)合微管蛋白的α及β端，形成無(wú)功能且不解聚的多聚體，消耗細(xì)胞內(nèi)的微管蛋白，阻止紡錘體形成，細(xì)胞有絲分裂由此中止而起到抗腫瘤細(xì)胞的作用。文獻(xiàn)報(bào)道，紫杉醇能降低淋巴細(xì)胞溶解靶細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)和淋巴細(xì)胞的再生能力[14-16]。

體外基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)顯示,復(fù)方苦參注射液所含的苦參堿及氧化苦參堿可作用于結(jié)腸癌細(xì)胞端粒酶，具有殺傷腫瘤細(xì)胞作用[17]?？鄥A可通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞的有絲分裂來(lái)阻止腫瘤細(xì)胞的增殖和分化，同時(shí)其對(duì)腫瘤細(xì)胞具有直接殺傷作用[18]。氧化苦參堿可抑制腫瘤和血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂增殖，但對(duì)正常細(xì)胞不產(chǎn)生破壞作用,并通過(guò)升高白細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)提高機(jī)體免疫力來(lái)對(duì)抗癌細(xì)胞。復(fù)方苦參注射液所含的中藥能發(fā)揮清熱解毒、和胃止嘔之效，對(duì)于化療后出現(xiàn)的血白細(xì)胞異常、惡心嘔吐等癥狀具有良好的緩解作用[19-20]。文獻(xiàn)報(bào)道,復(fù)方苦參注射液在晚期結(jié)腸癌患者的治療中可起到延長(zhǎng)腫瘤中位擴(kuò)散時(shí)間并提高其生存率的作用[16]。本研究結(jié)果顯示，觀察組有效率及不良反應(yīng)發(fā)生率均較對(duì)照組得到明顯的改善，與上述文獻(xiàn)一致。

化療會(huì)抑制機(jī)體的免疫功能，從而使其對(duì)腫瘤的抑制作用降低，T、B淋巴細(xì)胞亞群在抗腫瘤免疫功能中有著重要作用。苦參堿與化療藥物合用，能促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞的分化、增殖，從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[21-22]。本研究結(jié)果顯示，觀察組化療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ 和NK水平顯著高于對(duì)照組，CD8+水平則明顯低于對(duì)照組，提示聯(lián)合復(fù)方苦參注射液能顯著改善免疫功能。與相關(guān)文獻(xiàn)一致[23-24]。

綜上所述，紫杉醇聯(lián)合復(fù)方苦參注射液治療結(jié)腸癌具效果滿意，能有效抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖，改善患者免疫系統(tǒng)功能，并減少化療的毒副反應(yīng)，值得臨床推廣。