柴立平
(中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所,北京 100081)
臭氧是一種強氧化物,氧化能力僅次于氟氣,高于氯氣和二氧化氯[1],具有消毒、殺菌、快速分解有機質(zhì)、阻擋紫外線防護大氣層等諸多優(yōu)點。目前,臭氧主要應(yīng)用在水質(zhì)處理、化學氧化、食品加工保鮮、醫(yī)療衛(wèi)生、畜禽養(yǎng)殖等領(lǐng)域[2-3],且各個領(lǐng)域的應(yīng)用研究與相關(guān)的設(shè)備研發(fā)已初具規(guī)模[4-7]。
臭氧殺菌力較強,殺菌速度極快,不產(chǎn)生殘余污染,將臭氧溶解于水,利用臭氧水殺菌,可降解農(nóng)藥殘留,替代在消毒過程中無法克服環(huán)境污染問題的傳統(tǒng)化學消毒劑,更顯示出其巨大的優(yōu)越性[8]。近年來,隨著對臭氧研究的不斷深入,臭氧在蔬菜生產(chǎn)上也得到了越來越廣泛的應(yīng)用。臭氧作為一種高效、廣譜、快速的殺菌劑,能破壞分解細菌的細胞壁,快速擴散滲透進細胞內(nèi),氧化分解細菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的葡萄糖氧化酶等[9],也可以直接與細菌、病毒發(fā)生作用,破壞細胞核糖核酸,分解脫氧核糖核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)類和多糖等大分子聚合物,使細菌的代謝和繁殖過程遭到破壞[10-11],從而控制溫室病害的發(fā)生、防治土傳病害,還能在一定程度上增加作物的產(chǎn)量。也有報道指出,過量的臭氧能夠破壞作物體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng),加速脂質(zhì)過氧化反應(yīng),破壞膜的防御系統(tǒng),嚴重影響植株生長,甚至導(dǎo)致植株死亡[12-13]。
由于日光溫室的特殊環(huán)境,特別是黃瓜的生產(chǎn),受到多種病害的危害,嚴重制約了黃瓜產(chǎn)量和質(zhì)量的提高。由于物理及生物防控手段的不完善,目前黃瓜生產(chǎn)仍然過分依賴化學藥劑,致使病菌的抗藥性越來越強,迫使種植者加大用藥量,導(dǎo)致農(nóng)藥殘留逐漸突出,嚴重影響了黃瓜的出口和國內(nèi)市場的銷售。隨著人們生活水平的提高,對黃瓜的品質(zhì)的要求也越來越高,為進一步探索黃瓜的綠色生產(chǎn)技術(shù),在河北省饒陽縣冠志園區(qū)進行了臭氧發(fā)生器對黃瓜白粉病抑制作用的研究。
品種:參試黃瓜品種為中農(nóng)26,由中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所提供。
儀器:臭氧發(fā)生器(YLO3-10W)和臭氧濃度測定儀(aeroQUAL,Series200)由南京益隆高科技有限公司提供。
試驗于2017年在河北冠志農(nóng)業(yè)科技有限公司農(nóng)業(yè)園區(qū)進行,設(shè)臭氧發(fā)生器應(yīng)用的試驗溫室和常規(guī)管理的對照溫室,溫室坐北朝南,規(guī)格均為東西長70 m,南北寬10 m,總面積700 m2。
1.2.1 臭氧防病效果試驗
試驗溫室中的儀器于黑暗條件下開機運行,植株健康情況下,每3 d使用1次,發(fā)病情況下每天使用1次,使用時間為從太陽落山至揭開遮陽被前。當病情嚴重至失去控制時應(yīng)及時噴施化學藥劑進行防治,對照溫室正常生產(chǎn)管理,具體實施方案如表1。除去病害防治外,整枝打杈、水肥、收獲等管理均一致。
1.2.2 臭氧發(fā)生器應(yīng)用試驗
在臭氧處理溫室內(nèi),研究了溫室內(nèi)各點臭氧濃度對白粉病和灼燒病發(fā)生情況的影響。
在黃瓜發(fā)病和燒苗的時期,根據(jù)棚內(nèi)黃瓜發(fā)病和燒苗情況,共設(shè)定了7個小區(qū),分別為X-1、X0、X1、X2、X3、X4、X5,具體操作為:將臭氧發(fā)生器位置作為原點,安裝于距東墻20 m處,設(shè)為X0,臭氧發(fā)生器東側(cè)7 m處為X-1,西側(cè)每隔7 m均為取樣點,依次設(shè)為X1、X2、X3、X4、X5,取樣點兩側(cè)3.5 m內(nèi)同屬一個小區(qū),每個小區(qū)70 m2。臭氧發(fā)生器懸掛高度距地面4 m,臭氧的擴散方向為自東向西。
臭氧發(fā)生器參數(shù)設(shè)置:棚長、棚寬和高,臭氧發(fā)生濃度設(shè)定為苗期和成熟期(黃瓜植株高度1.5 m以下作為苗期,1.5 m以上作為成熟期)。開機情況同1.2.1。
表1 不同處理溫室黃瓜用藥情況
1.3.1 減藥統(tǒng)計測定
試驗采用無公害標準用藥,藥品多為市面上主流藥劑。常規(guī)溫室與安裝有YLO3-10W智能臭氧發(fā)生器的溫室用藥種類、品牌、濃度、藥量及操作者均保持一致。設(shè)對照溫室黃瓜整個生育期使用殺菌劑次數(shù)為M1,安裝YLO3-10W智能臭氧發(fā)生器的溫室大棚使用殺菌劑次數(shù)設(shè)為M2,減藥率為M。
1.3.2 臭氧濃度
從臭氧發(fā)生器開機開始計時,在每個小區(qū)的中心位置運用臭氧濃度測定儀測定發(fā)生器順、逆2個方向的臭氧濃度,從X-1→X5方向依次循環(huán)測定,直至臭氧發(fā)生器停止工作。整個試驗的測定階段全程保持黑暗(08:00—09:25,且未掀開溫室遮陽被)。
1.3.3 黃瓜白粉病
取樣位置與臭氧濃度一致,小區(qū)內(nèi)隨機取10株統(tǒng)計單株葉片數(shù)及白粉病發(fā)病情況。
根據(jù)溫室內(nèi)白粉病發(fā)病情況制定了如下分級標準:
0級:葉面無病斑;
1級:葉面病斑面積占整個葉面面積不足5%;
3級:葉面病斑面積占整個葉面面積6%~10%;
5級:葉面病斑面積占整個葉面面積11%~25%;
7級:葉面病斑面積占整個葉面面積26%~50%;
9級:葉面病斑面積占整個葉面面積50%以上。
1.3.4 葉片灼燒情況
取樣位置與臭氧濃度一致,小區(qū)內(nèi)隨機取10株統(tǒng)計單株葉片數(shù)及葉片灼傷情況。
參考病葉分級標準,先對臭氧發(fā)生器造成的葉面灼燒進行分級如下。
0級:葉面無燒葉;
1級:葉面燒葉面積占整個葉面面積不足10%;
3級:葉面燒葉面積占整個葉面面積11%~50%;
5級:葉面燒葉面積占整個葉面面積50%以上。
試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Office Excel 2007軟件進行整理和分析,圖片采用Origin 8進行繪制。
由表1和表2可知,秋冬季溫室黃瓜病害以白粉病、霜霉病、細菌性角斑病等為主。對照溫室從9月15日定植到11月13日共噴施殺菌劑9次;而應(yīng)用臭氧發(fā)生器的試驗溫室僅噴施了2次殺菌劑,從使用次數(shù)上來看共減少了約77.8%的殺菌劑。更進一步分析可以得出,對照溫室進行了2次廣譜性預(yù)防,7次藥物防治,其中,針對白粉病防治次數(shù)高達5次;而使用臭氧發(fā)生器的試驗溫室僅治療了2次霜霉病,沒有針對白粉病使用殺菌劑。
表2 不同處理溫室用藥情況分析
2.2.1 溫室內(nèi)不同位置黃瓜白粉病發(fā)病情況
病情指數(shù)是反應(yīng)病害的一個重要指標,由表3可知,X5位置的黃瓜植株病情指數(shù)最大,為47,且與X-1、X0、X1、X2位置相比差異達到了極顯著水平;X0位置的病情指數(shù)最小,為17,X1、X2與之相近,差異未達極顯著水平;X0、X1、X2與其他位置相比,病情指數(shù)差異均達到了極顯著水平。觀察不同位置的黃瓜白粉病發(fā)病級數(shù)下的葉片數(shù),可以發(fā)現(xiàn):整體上來看,距離臭氧發(fā)生器較遠的X3、X4、X5小區(qū),5、7、9級的發(fā)病葉片數(shù)多于距離臭氧發(fā)生器較近的X0、X1、X2,且X3、X4、X5的1級和3級的葉片數(shù)略少于X0、X1、X2,0級的發(fā)病葉片數(shù)較為接近;另外,距離臭氧發(fā)生器較遠位置的X3、X4、X5的病情指數(shù)明顯大于較近位置的X0、X1、X2。在生物學上,病情指數(shù)越大,反應(yīng)植株病害越嚴重;因此,距離臭氧發(fā)生器較近位置的植株病害較輕,而距離較遠的植株病害較重。
2.2.2 溫室內(nèi)不同位置黃瓜葉片灼燒情況
大量研究表明,高濃度的臭氧在滅菌時,會對植株的氣孔、膜系統(tǒng)、酶活性、蛋白質(zhì)和光合作用產(chǎn)生影響,造成植株葉片萎蔫,稱之為“葉片灼燒”。參考病情調(diào)查方法,制定了植株葉片灼燒情況調(diào)查方案,灼燒指數(shù)越大,植株葉片被灼燒越嚴重。由表4可以得出:距離為X1位置的灼燒指數(shù)最大,且與X2之間不存在極顯著性差異;而距離較遠的X5灼燒指數(shù)為0,即沒有燒葉情況發(fā)生;X-1的位置,灼燒指數(shù)較小,為8,燒苗情況較輕;灼燒指數(shù)較大的X0、X1、X23個位置的3、5級葉片數(shù)占總?cè)~片數(shù)比例較其他位置較大,0、1級的灼燒葉片數(shù)較其他位置較少。綜合來看,距離臭氧發(fā)生器越近的位置,葉片灼燒越嚴重,發(fā)生器后方(X-1小區(qū))例外;距離發(fā)生器越遠的地方,葉片受害越小。
表3 不同區(qū)域內(nèi)黃瓜植株白粉病的發(fā)病情況
表4 不同區(qū)域內(nèi)黃瓜植株葉片灼傷情況
2.2.3 溫室內(nèi)不同位置臭氧濃度分布情況
該臭氧發(fā)生器采用的是“氣流組織法”,使得臭氧隨著氣流散布在溫室的各個角落而達到殺菌效果。所謂氣流組織,就是強制性地讓氣流沿溫室的縱向上下形成一個氣流環(huán),高濃度臭氧在溫室的上方,該氣流運行幾十米后向下折返,此時的濃度已降到植物可接受的安全濃度,并且隨著時間的推移,使棚內(nèi)的臭氧濃度逐漸達到均勻一致,并且有效殺菌濃度在0.20 mg/m3以上。
由表5可以看出,X2位置在開機時的T1至T4時間段臭氧濃度都是最高的;在剛開始開機的T1時間段內(nèi),只有X1、X2達到了有效濃度;隨著開機時間的推移,在T4時間段內(nèi),所有位置(除X0)臭氧濃度達到最大,T5時間的濃度開始有所下降,說明T4時間段臭氧濃度相對穩(wěn)定,溫室臭氧分布情況最為均勻;在棚內(nèi)臭氧濃度穩(wěn)定的T4時間段內(nèi),有X0、X1、X2、X34個位置濃度達到了有效濃度,但是發(fā)生器背后的X-1和距離較遠的X4、X5位置濃度只在有效濃度的一半左右??傮w來說棚內(nèi)的濃度不能保證均勻一致,發(fā)生器背后、距離較遠的位置濃度偏低,X1、X2位置濃度偏高,X3位置濃度相對較適宜。
2.2.4 病情指數(shù)、灼燒指數(shù)和臭氧濃度三者之間的關(guān)系
由圖1可以看出,臭氧濃度的變化與灼燒指數(shù)表現(xiàn)出相似的規(guī)律,均呈現(xiàn)出先增加后減小的規(guī)律。臭氧濃度的變化與病情指數(shù)表現(xiàn)出相反的規(guī)律,臭氧濃度表現(xiàn)為先升后降的拋物線形狀,而病情指數(shù)表現(xiàn)為先降后升的規(guī)律。在X2位置時,臭氧濃度有最大值0.38 mg/m3,灼燒指數(shù)也存在較大值57,而病情指數(shù)存在較小值20。當臭氧濃度低于0.10 mg/m3時,灼燒指數(shù)為0,而病情指數(shù)達到最大值47,即沒有葉片因為臭氧而造成傷害,但植株發(fā)病最嚴重。系統(tǒng)來看,在X0、X1、X23個位置上臭氧濃度和灼燒指數(shù)都相對較大,而病情指數(shù)都相對較小。
表5 不同時間段內(nèi)各個小區(qū)的臭氧濃度 mg/m3
圖1 病情指數(shù)、灼燒指數(shù)和臭氧濃度三者之間的關(guān)系
臭氧作為一種安全、綠色、低廉的強氧化劑,早于20世紀在水果、蔬菜的貯藏和保鮮行業(yè)已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。研究表明,適宜濃度的臭氧處理草莓,能夠減少草莓香味和VC含量散失,顯著增長了草莓的保鮮期[14];而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上,也早就有關(guān)于臭氧土壤消毒、空氣殺菌的研究,比如臭氧可作為土壤消毒劑[15-16],代替甲基溴化物,控制病蟲害的發(fā)生;溫室番茄種植中,還可以有效防控灰霉病和葉霉病,且效果優(yōu)于速克靈煙劑、百菌清煙劑、滅克粉塵劑[4]。試驗表明,當臭氧濃度大于0.20 mg/m3時,能夠有效控制病菌的發(fā)生,而且適宜濃度的臭氧能夠有效控制白粉病的發(fā)生,大幅減少化學藥劑的使用。
由于臭氧殺菌是利用臭氧的強氧化性來滅殺細菌、真菌和病毒,不具有選擇性的殺菌能力,高濃度的臭氧在殺菌的同時也會破壞植株葉片組織,影響植株光合作用和坐果率[17-19],這也是與普通殺菌劑直接的區(qū)別;因此,選擇適宜濃度的臭氧進行殺菌尤為重要。試驗表明,當臭氧濃度小于0.20 mg/m3時,植株發(fā)病程度大于臭氧濃度大于0.20 mg/m3位置的植株;而當臭氧濃度長時間維持在0.24 mg/m3時,又會對黃瓜葉片造成傷害;當臭氧濃度范圍控制在0.20~0.24 mg/m3時,既能有效地控制黃瓜病害的發(fā)生,大幅減少化學藥劑的投入,同時對植株的傷害也相對最小,這與前人[20-21]試驗結(jié)果有些差異,可能是由于臭氧的使用方法存在差異。
試驗中,黃瓜發(fā)病和灼傷現(xiàn)象同時存在,主要是由于溫室東西方向臭氧濃度分布不均導(dǎo)致的。在發(fā)生器前方30 m范圍內(nèi)超過了有效殺菌濃度,控制白粉病的同時造成了一定的灼燒;在發(fā)生器背后及前方30 m外只能達到有效殺菌濃度的一半?yún)s不能很好控制白粉病發(fā)生;因此,如何進一步均勻分配臭氧在溫室內(nèi)的濃度是臭氧發(fā)生器下一步需要改進的重要方面,管道氣體輸送、滴灌臭氧水擴散等方式值得探討研究,使臭氧達到更適宜的濃度以滿足生產(chǎn)實踐的應(yīng)用。
相比對照溫室,使用臭氧發(fā)生器的溫室能大幅度減少殺菌劑的使用,但從使用次數(shù)上對比,使用臭氧發(fā)生器的溫室減藥率高達77.8%,且進一步對比可以發(fā)現(xiàn),使用臭氧發(fā)生器的溫室僅噴施了2次治療霜霉病的菌劑,沒有噴施治療白粉病的殺菌劑,大大減少了殺菌劑的種類和用量;因此,臭氧發(fā)生器有著一定的應(yīng)用前景,需要更進一步探索。