舒心湯對(duì)心律失常和心肌缺血模型大鼠的治療效果

張 宇 陳文生 (唐山工人醫(yī)院心內(nèi)一科，河北 唐山 063000)

心律失常在是心血管系統(tǒng)疾病患者常見(jiàn)的臨床表現(xiàn)，心搏頻率、節(jié)律、沖動(dòng)傳導(dǎo)等發(fā)生紊亂，因而能加重原有的心臟疾病，導(dǎo)致心力衰竭甚至發(fā)生心源性猝死。心律失?？捎绊懝跔顒?dòng)脈對(duì)心肌細(xì)胞的供血供氧，進(jìn)而導(dǎo)致心肌功能障礙及結(jié)構(gòu)破壞〔1〕。有研究發(fā)現(xiàn)，心肌缺血再灌注中，誘發(fā)心律失常的主要原因與心臟的損傷有關(guān)。在心肌缺血時(shí)，可能會(huì)引起心肌內(nèi)部組織壞死，血管內(nèi)皮和微血管都會(huì)受到損傷。心肌缺血后心肌組織的再灌注有可能加劇損傷，加重心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，最終誘發(fā)心律失常。心律失常在中醫(yī)角度上屬于胸悶、氣短無(wú)力、心悸的范圍，治療方法是活血通經(jīng)絡(luò)、清心安神為法〔2〕。本研究分析了舒心湯對(duì)心律失常和心肌缺血模型大鼠的治療效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取健康Wistar大鼠240只，體重250～290 g，在每12 h有光和黑暗環(huán)境交替，自由進(jìn)食和飲水喂養(yǎng)。

1.2 造模方法和分組

1.2.1 大鼠心律失常造模方法及分組 取實(shí)驗(yàn)大鼠120只隨機(jī)分為6組，每組20只，①空白對(duì)照組，不做造模處理，給予等量純水灌胃14 d;②模型組，造模處理后給予等量純水灌胃14 d;③舒心湯高劑量組，造模處理后給予舒心湯(黃芪∶丹參∶當(dāng)歸∶麥冬為5∶4∶2∶2)1.70 g/kg灌胃14 d;④舒心湯中劑量組，造模處理后給予舒心湯0.85 g/kg灌胃14 d;⑤舒心湯低劑量組，造模處理后給予舒心湯0.42 g/kg灌胃14 d;⑥冠心丹參組，造模處理后給予冠心丹參膠囊(長(zhǎng)春國(guó)奧藥業(yè)有限公司)0.35 g/kg灌胃14 d。

1.2.2 大鼠心肌缺血造模方法 取實(shí)驗(yàn)大鼠120只隨機(jī)分為6組，每組20只，分組同1.2.1。給藥7 d后于末次給藥后1 h腹腔注射20%烏來(lái)糖1 g/kg麻醉。仰位固定后行氣管切開(kāi)并通氣，要保持呼吸率在60～70次/min。首先，將左胸肋骨上的毛發(fā)剔除，經(jīng)過(guò)消毒后，在胸肋骨左側(cè)跳動(dòng)最明顯地方將皮膚剪開(kāi)(第3和4肋骨之間)，然后把組織與肌肉分離到肋間隙，將肋骨剪斷，從心包膜部位開(kāi)始拉破胸壁，使心臟可以完整暴露出來(lái)，在肺部及左心耳底部找尋左前降支，在左心耳下方2 mm處穿線，進(jìn)針深度1 mm，寬度2 mm，穿線后適應(yīng)5 min，將硅膠管插到穿線的部位進(jìn)行結(jié)扎，結(jié)扎時(shí)會(huì)導(dǎo)致心肌缺血。如果心電圖平穩(wěn)，結(jié)扎部位的心肌組織變白及T波與QRS波融合或R波波幅有增大的現(xiàn)象表示已結(jié)扎成功。

1.3 樣本的采集方法 在模型制成后，應(yīng)該要記錄手術(shù)前、結(jié)扎時(shí)、再灌注時(shí)、再灌注10～30 min后的心電圖表象之后處死動(dòng)物，各組大鼠分為2組，A組大鼠處死后剖取心臟，取出左心室心肌組織，采用冰生理鹽水洗凈血液，加入生理鹽水，制成10%的心肌組織勻漿液，檢測(cè)Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶活性。B組大鼠處死后剖取心臟，稱重，并用蘇木素-伊紅HE染色。剖取大鼠心臟組織塊加入10%中性甲醛固定24 h，石蠟包埋。采用石蠟切片機(jī)連續(xù)冠狀切片，切片厚度4 μm。采用二甲苯脫蠟，梯度乙醇洗，蒸餾水洗。用自來(lái)水將蘇木素染液、鹽酸乙醇分化和0.5%的伊紅染液進(jìn)行沖洗。將乙醇兌水，并用中性的樹(shù)脂片進(jìn)行封片，置于光學(xué)顯微鏡下觀察。

1.4 大鼠心律失常和心肌缺血心電圖的顯示方法采用導(dǎo)聯(lián)心電圖測(cè)試，于大鼠四肢進(jìn)行皮下肢體電極放置，記錄下大鼠在結(jié)扎前后反映，然后灌注時(shí)及灌注后10～30 min時(shí)心電圖，統(tǒng)計(jì)室性心動(dòng)過(guò)速和期前收縮的發(fā)生率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 舒心湯對(duì)心律失常大鼠室性心動(dòng)過(guò)速、室性期前收縮以及室顫的影響 空白對(duì)照組大鼠均未發(fā)生心動(dòng)過(guò)速、室性期前收縮及室顫，與模型組比較，舒心湯高、中、低劑量組和冠心丹參組心動(dòng)過(guò)速、室性期前收縮及室顫的發(fā)生率均明顯降低(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 舒心湯對(duì)心律失常大鼠室性心動(dòng)過(guò)速、室性期前收縮及室顫的影響〔n(%)，n=20〕

2.2 舒心湯對(duì)大鼠心肌ATP酶的影響 與空白對(duì)照組比較，模型組 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶的活性均明顯降低(P＜0.05);與模型組比較，舒心湯高、中劑量組和冠心丹參組Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶的活性均明顯升高(P＜0.05);舒心湯低劑量組心肌ATP酶的活性與模型組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 舒心湯對(duì)心肌缺血大鼠心肌ATP酶活性的影響(，n=20，ng/fl)

表2 舒心湯對(duì)心肌缺血大鼠心肌ATP酶活性的影響(，n=20，ng/fl)

與空白對(duì)照組比較:1)P＜0.05，與模型組比較:2)P＜0.05，下表同

組別 Na+-K+-ATP Ca2+-ATP Mg2+-ATP空白對(duì)照組 17.17±2.43 22.08±3.45 15.22±2.55模型組 6.73±2.141) 11.82±3.081) 8.20±1.851)舒心湯高劑量組 13.69±2.111)2)16.44±3.171)2)12.39±2.271)2)舒心湯中劑量組 10.72±2.421)2)15.21±2.661)2) 10.26±2.022)舒心湯低劑量組 7.65±2.511) 12.33±1.951) 9.02±1.751)冠心丹參組 15.58±2.071)2)18.62±3.151)2)12.24±1.771)2)

2.3 舒心湯對(duì)心肌缺血心肌缺血大鼠心肌組織病理學(xué)變化的影響 空白對(duì)照組心肌纖維完整，未見(jiàn)間質(zhì)水腫和炎細(xì)胞浸潤(rùn);模型組心肌纖維有灶性壞死，壞死心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整，肌質(zhì)溶解，細(xì)胞核破裂，間質(zhì)有較明顯水腫和血管充血，并可見(jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn);舒心湯中劑量和舒心湯低劑量組與空白對(duì)照組比較，心肌纖維有輕度到中度的壞死，壞死心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整，有少量間質(zhì)血管充血和炎細(xì)胞浸潤(rùn);舒心湯高劑組和冠心丹參組基本無(wú)心肌纖維壞死和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，可見(jiàn)少量間質(zhì)充血，見(jiàn)圖1。

圖1 各組心肌組織病理學(xué)變化(HE，×400)

2.4 舒心湯對(duì)心肌缺血大鼠心電圖的影響 與空白對(duì)照組比較，模型組P-R間期和QRS時(shí)限均明顯縮短，ST段顯著抬高(P＜0.05);與模型組比較，舒心湯高、中劑量組和冠心丹參組P-R間期和QRS時(shí)限顯著延長(zhǎng)，ST段顯著下降(P＜0.05);舒心湯低劑量組心電圖指標(biāo)與模型組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表3。

表3 舒心湯對(duì)心肌缺血大鼠心電圖的影響(，n=20)

表3 舒心湯對(duì)心肌缺血大鼠心電圖的影響(，n=20)

組別 P-R間期(ms)QRS時(shí)限(ms) ST段(mV)空白對(duì)照組 54.24±5.19 32.58±3.42 0.20±0.03模型組 42.08±4.391) 17.69±1.941) 0.45±0.041)舒心湯高劑量組 50.27±4.961)2)28.32±2.651)2)0.25±0.041)2)舒心湯中劑量組 47.27±4.351)2)22.41±2.321)2)0.36±0.031)2)舒心湯低劑量組 43.55±5.281) 18.24±2.101) 0.41±0.051)冠心丹參組 50.62±5.541)2)29.62±2.171)2) 0.24±0.051)2)

3 討論

心律失常臨床表現(xiàn)為心慌、胸悶、憋悶、頭暈、脈搏過(guò)快、過(guò)緩或不齊，是導(dǎo)致心血管系統(tǒng)疾病患者死亡的常見(jiàn)原因〔3〕。研究發(fā)現(xiàn)，心血管系統(tǒng)疾病患者易發(fā)生心肌缺血，使心肌細(xì)胞的供血、供氧狀況較差〔4〕。而心肌組織缺血后進(jìn)行再灌注非但不能緩解缺血性損傷，還會(huì)加重功能性障礙，導(dǎo)致心肌組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理方面紊亂，從而加重心律失常的發(fā)生〔5〕。中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，心律失常屬于“胸痹”、“心悸”、“怔忡”等范疇，與機(jī)體正氣虛弱密切相關(guān)〔6〕。本病的基本病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，以正氣虛為本，其病位在心，病程日久可導(dǎo)致心脈瘀阻、心失所養(yǎng)，心脈痹阻不暢而使心脈悸動(dòng)不安。以氣滯血瘀為標(biāo)，氣行不暢則血脈瘀阻、脈道不通，進(jìn)而出現(xiàn)脈歇止不齊癥狀〔7，8〕。治則以行氣活血、寧心安神為法。本研究的舒心湯方中以黃芪為君藥，功擅益氣行血、扶正固本，通過(guò)大補(bǔ)元?dú)舛醒，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，黃芪皂苷可增強(qiáng)心肌收縮力，改善心肌細(xì)胞功能，有利于保護(hù)缺血缺氧的心肌細(xì)胞〔9〕。以當(dāng)歸、丹參共為臣藥，當(dāng)歸養(yǎng)血和營(yíng)、活血化瘀。當(dāng)歸提取物可提高心肌細(xì)胞的耐缺氧能力，并對(duì)抗心律失?！?0〕。丹參涼血活血、清心安神。丹參提取物可增加冠狀動(dòng)脈血流量，改善心肌缺血，并調(diào)節(jié)心律〔11〕。佐以麥冬滋陰生津、潤(rùn)肺清心。諸藥合用，共奏行氣活血、寧心安神之功效〔12〕。本研究顯示，舒心湯對(duì)心律失常和心肌缺血模型大鼠的心肌細(xì)胞有明顯保護(hù)作用。