匍匐筋骨草勃艮第之光組培快繁與移栽基質(zhì)篩選

詹菁，馬廣瑩，鄭日華，毛永成，應(yīng)桃園，楊燁

(1.杭州市蕭山區(qū)高級(jí)技工學(xué)校，浙江 杭州 311202； 2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 花卉研究開(kāi)發(fā)中心，浙江 杭州 311202)

匍匐筋骨草(Ajugareptans)原產(chǎn)美國(guó)，為唇形科筋骨草屬多年生草本植物。其彩葉品種勃艮第之光與中國(guó)原產(chǎn)野生種多花筋骨草相比，株形更為低矮，匍匐生長(zhǎng)。新葉嫩紅并常伴有銀邊，輪傘花序具花多數(shù)，小花淡藍(lán)紫色或淡白色，花期3～7月。引種栽培證明，其在浙江省及周邊地區(qū)可露地栽培，能耐-8 ℃低溫和40 ℃高溫，越夏正常，保持常綠，是優(yōu)良的地被植物。

匍匐筋骨草可用分株或扦插的方式進(jìn)行繁殖，但繁殖系數(shù)相對(duì)較低，用工量較大，且短期內(nèi)大規(guī)模生產(chǎn)困難，限制了該品種的推廣速度，采用組培快繁可很好解決上述難題[1]。下地移栽是組培快繁走向應(yīng)用的關(guān)鍵技術(shù)。目前匍匐筋骨草剛引進(jìn)國(guó)內(nèi)不久，有關(guān)其組培與下地移栽關(guān)鍵技術(shù)未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以匍匐筋骨草勃艮第之光為試材，對(duì)其組培快繁技術(shù)及組培生根苗移栽的幾個(gè)主要影響因素進(jìn)行了研究，為其工廠化生產(chǎn)及育苗提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料采自浙江省農(nóng)科院花卉研究開(kāi)發(fā)中心栽植的2年生匍匐筋骨草勃艮第之光盆栽苗。取材前半個(gè)月，將材料移至大棚內(nèi)養(yǎng)護(hù)以減少菌源污染。

1.2 方法

1.2.1 外植體的選擇與處理

選取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲的枝條作外植體，從葉柄基部剪除所有葉片，將剩余裸枝剪成6 cm左右的莖段備用。用洗滌液輕輕搓洗去除表面殘物后，用流水沖選材料2 h，將外植體轉(zhuǎn)入無(wú)菌操作臺(tái)，用75%酒精漂洗20～30 s，用無(wú)菌水沖洗2次，再用0.1%升汞溶液浸泡6～10 min，期間不斷晃動(dòng)以提高植物材料與升汞的接觸面積。用無(wú)菌水沖洗3次后，將外植體轉(zhuǎn)移至濾紙上，吸取殘余液體備用。將外植體切成3 cm左右的莖段，接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 1.0 mg·L-1(培養(yǎng)基中加入蔗糖30 g·L-1，瓊脂7.5 g·L-1，pH值6.0左右)，篩選出后續(xù)增殖、生根所用的無(wú)菌繁殖材料[2]。

1.2.2 增殖培養(yǎng)基的篩選

以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加不同濃度的BA和NAA，30 d后調(diào)查接種莖段的生長(zhǎng)情況。

1.2.3 生根培養(yǎng)基的篩選

以1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的NAA，30 d后調(diào)查接種后各處理的試管苗生根情況[3]。增殖和生根培養(yǎng)基都添加蔗糖30 g·L-1，瓊脂7 g·L-1，pH值6.0左右。培養(yǎng)條件為室溫(25±1)℃，光照時(shí)間16 h/d，光照強(qiáng)度2 000～2 500 lx。

1.2.4 煉苗移栽

移栽前1周，將組培成品苗移至溫室大棚內(nèi)，松開(kāi)培養(yǎng)瓶上的塑料瓶蓋進(jìn)行煉苗。將組培苗從瓶?jī)?nèi)移出，洗凈沾附在根部的培養(yǎng)基，將其栽入不同基質(zhì)配比的穴盤中。移栽15 d后統(tǒng)計(jì)成活率，觀測(cè)植株長(zhǎng)勢(shì)，確定最適栽培基質(zhì)配方。

2 結(jié)果與分析

2.1 增殖培養(yǎng)基

將無(wú)菌化獲得的帶芽莖段接種到添加不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的增殖培養(yǎng)基中，每瓶接種5株，每處理10瓶。30 d后，依據(jù)試管苗的增殖系數(shù)和生長(zhǎng)勢(shì)篩選出最適培養(yǎng)基。

由表1可知，隨著細(xì)胞分裂素BA濃度的增高，匍匐筋骨草分化速度加快、增殖系數(shù)增高。其中處理4增殖率最高，達(dá)10以上。當(dāng)BA濃度為3.0時(shí)，植物出現(xiàn)不同程度的玻璃化，影響品質(zhì)。從增殖苗的增殖系數(shù)和生長(zhǎng)情況綜合分析，匍匐筋骨草最適的增殖培養(yǎng)基為MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。

表1 不同培養(yǎng)基對(duì)匍匐筋骨草增殖的影響

2.2 生根培養(yǎng)基

選取生長(zhǎng)健壯的匍匐筋骨草無(wú)根試管苗，接種到附加不同濃度的NAA(萘乙酸)的1/2MS培養(yǎng)基中[4]，30 d后觀察試管苗的生根情況。由表2和圖1可知，匍匐筋骨草極易生根，在不添加任何激素的1/2MS培養(yǎng)基中生根良好，平均根數(shù)為5.3條，根長(zhǎng)6.2 cm，生根率達(dá)100%。隨著生根素的加入，植株莖基和葉腋會(huì)出現(xiàn)增殖現(xiàn)象，且增殖苗細(xì)弱量少，干擾生根苗健壯。所以匍匐筋骨草適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS。

表2 不同培養(yǎng)基對(duì)匍匐筋骨草生根的影響

A、B為匍匐筋骨草在增殖培養(yǎng)基MS+BA2.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1上生長(zhǎng)20 d時(shí)，莖基和葉腋萌生新芽，同時(shí)地下部分會(huì)萌生少量新根。C為匍匐筋骨草在生根培養(yǎng)基1/2MS上生長(zhǎng)20 d生根情況圖1 匍匐筋骨草的組培苗

2.3 移栽基質(zhì)

由表3可知，不同移栽基質(zhì)對(duì)匍匐筋骨草組培苗成活及生長(zhǎng)狀況影響不一。處理3基質(zhì)配方為蛭石∶草炭∶珍珠巖為1∶1∶1時(shí)效果最佳，成活率達(dá)96%，其幼苗抽發(fā)新葉最早，長(zhǎng)勢(shì)最為強(qiáng)健。選用河沙時(shí)，幼苗移栽成活率最低為64%，且幼苗長(zhǎng)勢(shì)較慢，可能是由于基質(zhì)不保水所致。移栽小環(huán)境的高濕是移栽幼苗成活的關(guān)鍵因素。

表3 不同移栽基質(zhì)對(duì)出瓶組培苗成活及生長(zhǎng)的影響

3 小結(jié)

匍匐筋骨草以帶芽莖段為外植體進(jìn)行增殖和生根較為適宜，最佳的增殖培養(yǎng)基為MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1，增殖率可達(dá)10.6，增殖率高，能很好地滿足快繁的要求。生根階段最佳培養(yǎng)基為1/2MS，生根率高達(dá)100%，植株強(qiáng)健，根長(zhǎng)而壯。加入生根素反而會(huì)造成組培苗再度增殖，削弱生根苗的生長(zhǎng)勢(shì)。煉苗移栽的基質(zhì)為蛭石∶草炭∶珍珠巖

1∶1∶1時(shí)，移栽成活率高達(dá)96%，試驗(yàn)證明，移栽小環(huán)境的高濕是移栽幼苗成活的關(guān)鍵因素。通過(guò)觀察，匍匐筋骨草勃艮第之光通過(guò)組培繁殖方法能夠保持其特性，為以后大規(guī)模工廠化組培苗生產(chǎn)提供參考。