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    基于GC-MS的氣血雙補(bǔ)酒揮發(fā)性化學(xué)成分研究*

    2018-11-16 07:51:04陳林偉彭德熹袁成業(yè)蔡寶昌王姝梅
    天津中醫(yī)藥 2018年11期
    關(guān)鍵詞:南京中醫(yī)藥大學(xué)泰州揮發(fā)油

    陳林偉,王 琴,彭德熹,袁成業(yè),蔡寶昌,王 翼,王姝梅

    (1.南京中醫(yī)藥大學(xué)泰州附屬醫(yī)院,泰州 225300;2.南京中醫(yī)藥大學(xué),南京 210023;3.南京理工大學(xué)泰州科技學(xué)院,泰州 225300)

    氣血雙補(bǔ)酒是江蘇省中醫(yī)院名老中醫(yī)孟景春教授的臨床經(jīng)驗(yàn)方,是由人參、黃芪、當(dāng)歸、炒白芍、陳皮、玉竹、酒黃精、制何首烏、枸杞子9味中藥組成的復(fù)方制劑,具有補(bǔ)益氣血、通陽(yáng)散結(jié)、復(fù)脈固脫等功效,臨床上常用于治療心力衰竭、心肌缺血、冠心病、心絞痛、免疫力低下以及惡性腫瘤等疾病[1-2]。國(guó)內(nèi)外已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)其提取工藝、化學(xué)成分以及微量元素進(jìn)行了分析研究,該復(fù)方制劑含有大量的揮發(fā)性成分,對(duì)其治療心血管疾病有著重要的作用,但目前文獻(xiàn)中并未見(jiàn)對(duì)本方所含揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)報(bào)道,因此本研究采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)分析研究氣血雙補(bǔ)酒中的揮發(fā)性化學(xué)成分,為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究和質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    儀器型號(hào)為Agilent5975CMSDGC-MS,包括7693自動(dòng)進(jìn)樣器;乙酸乙酯(分析純,批號(hào):20140201,南京維之誠(chéng)化學(xué)試劑有限公司);無(wú)水硫酸鈉(分析純,批號(hào):20140501,南京化學(xué)試劑有限公司);娃哈哈純凈水;氣血雙補(bǔ)酒樣品來(lái)自南京中醫(yī)藥大學(xué)泰州附屬醫(yī)院制劑室;復(fù)方中各單味藥經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)蔡寶昌教授鑒定。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 揮發(fā)油的提取 稱取氣血雙補(bǔ)酒1 000 mL,置于2 000 mL圓底燒瓶中,水蒸氣蒸餾提取10 h,至揮發(fā)油不再增加,經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后得到揮發(fā)油,同法提取人參、黃芪、當(dāng)歸、炒白芍、陳皮、玉竹、酒黃精、制何首烏、枸杞子,得到各藥材的揮發(fā)油,本實(shí)驗(yàn)揮發(fā)油提取率為5.1%。以上揮發(fā)油溶液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水,通過(guò)0.45μm有機(jī)濾膜制備即得。

    2.2 色譜條件 BP5-5%苯基二甲基聚硅氧烷柱(30 m×250μm×0.25μm),初始溫度為 60℃,進(jìn)樣口的溫度設(shè)置為270℃;以5℃/min升溫速度慢慢升至200℃,保持6 min;然后再以5℃/min升溫速度緩慢升至240℃,保持5 min。高純氦氣為載氣,分流比例為20∶1,流速設(shè)置為30 mL/min,每次進(jìn)樣2 μL,Gassaver:關(guān)閉。

    2.3 質(zhì)譜條件 離子源的溫度為230℃,設(shè)置接口溫度為270℃,電子的能量設(shè)置為70 eV,四級(jí)桿的溫度設(shè)置為50℃,質(zhì)量掃描的方式選擇為全部掃描范圍:50~550 amu,設(shè)置電子倍增器的電壓值為1 553 V。每次進(jìn)樣為2μL,樣品進(jìn)樣2針,使用Nist 11.0標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫(kù)進(jìn)行檢索分析。

    3 結(jié)果與數(shù)據(jù)分析

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)質(zhì)譜軟件Chem Station和NIST 11.0標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)譜檢索庫(kù)進(jìn)行檢索分析,并比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜譜圖進(jìn)而鑒定化學(xué)成分一共得到39種揮發(fā)性成分,且各揮發(fā)性成分匹配率均在90%以上,成分鑒定的結(jié)果詳情見(jiàn)表1。通過(guò)優(yōu)化的色譜質(zhì)譜條件,對(duì)氣血雙補(bǔ)酒中含有的揮發(fā)性成分進(jìn)行全面的GC-MS分析,采用面積歸一化法來(lái)測(cè)定揮發(fā)性各成分的含量,并分析得到氣血雙補(bǔ)酒揮發(fā)性成分的總離子流圖,見(jiàn)圖1。

    表1 GC-MS鑒定氣血雙補(bǔ)酒中的揮發(fā)性成分Tab.1 Componentsidentified of QXSBJ by GC-MS

    圖1 氣血雙補(bǔ)酒揮發(fā)油的總離子流圖Fig.1 GC-MSchromatogram of QXSBJ

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)水蒸氣蒸餾的方法提取出氣血雙補(bǔ)酒中的揮發(fā)性化學(xué)成分,同時(shí)采用GC-MS技術(shù)對(duì)揮發(fā)油提取物進(jìn)行揮發(fā)性化學(xué)成分分析研究,利用譜庫(kù)檢索結(jié)合藥材色譜峰歸屬對(duì)氣血雙補(bǔ)酒揮發(fā)油進(jìn)行定性分析,應(yīng)用峰面積百分比法計(jì)算相對(duì)量,另對(duì)各色譜峰進(jìn)行藥材歸屬研究[3-4]。GC-MS分析結(jié)果顯示,Ethyl acetate為溶劑峰,其含量最高,其次氣血雙補(bǔ)酒中富含Isocetic acid(10.24%)、Terpineol(10.01%)、Gamma.-Terpinene(9.95%)、(+)-2-carene(9.74%)、D-Limonene(9.67%)等揮發(fā)性成分。色譜峰歸屬研究表明,來(lái)源于人參的揮發(fā)性成分有9個(gè)、來(lái)源于黃芪的揮發(fā)性成分有11個(gè)、來(lái)源于當(dāng)歸的揮發(fā)性成分有25個(gè)、來(lái)源于炒白芍的揮發(fā)性成分有5個(gè)、來(lái)源于陳皮的揮發(fā)性成分有20個(gè)、來(lái)源于玉竹的揮發(fā)性成分有7個(gè)、來(lái)源于酒黃精的揮發(fā)性成分有6個(gè)、來(lái)源于制何首烏的揮發(fā)性成分有8個(gè)、來(lái)源于枸杞子的揮發(fā)性成分有2個(gè)。

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)GC-MS法能夠快速有效地分析氣血雙補(bǔ)酒中的揮發(fā)性成分,為氣血雙補(bǔ)酒藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究和質(zhì)量控制提供參考。

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