甲砜霉素在鯉魚中的藥代動(dòng)力學(xué)研究*

潘明軒 李兆新 邢麗紅 孫曉杰 彭吉星 董 曉

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甲砜霉素在鯉魚中的藥代動(dòng)力學(xué)研究*

潘明軒1,2,3李兆新1,3①邢麗紅1,3孫曉杰1,3彭吉星1,3董 曉1,2,3

(1. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所 青島 266071；2. 上海海洋大學(xué)食品學(xué)院 上海 201306；3. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室 青島 266071)

本實(shí)驗(yàn)在(26±2)℃的養(yǎng)殖水溫下，采用高效液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)研究了以30 mg/(kg·bw)的劑量對(duì)鯉魚()進(jìn)行單次投喂藥餌后甲砜霉素(Thiamphenicol, TAP)在鯉魚體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。通過(guò)DAS 2.0動(dòng)力學(xué)軟件分析TAP在鯉魚體內(nèi)的藥–時(shí)數(shù)據(jù)，結(jié)果表明符合一級(jí)吸收二室模型。TAP在肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓、脾臟和血漿各組織的藥物達(dá)峰時(shí)間(peak)分別為16、2、16、8、0、2和16 h，達(dá)峰濃度(max)分別為15.6、35.3、12.4、9.0、33.0、11.6 mg/kg和21.0 mg/L；藥–時(shí)曲線下面積(AUC)分別為1084.5、1578.1、777.3、541.1、0.1、478.1 mg/(kg·h)和485.1 mg/(L·h)，消除半衰期(1/2β)分別為11.4、100.2、54.2、41.1、69.5、38.0和71.9 h。TAP在鯉魚體內(nèi)各組織的分布和消除速率相差較大；在腎臟中的藥物達(dá)峰時(shí)間短且達(dá)峰濃度高于其他組織，其消除半衰期也明顯高于其他組織，推測(cè)腎臟是鯉魚體內(nèi)TAP蓄積和代謝的主要器官。按照農(nóng)業(yè)部《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》文件規(guī)定，TAP在水產(chǎn)動(dòng)物中最高殘留限量(MRL)不得高于50 μg/kg，本研究中，肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、脾臟和血漿的TAP殘留量低于MRL的時(shí)間分別從第16、16、12、12、12、10和12天開始，將肌肉和腎臟作為TAP藥物殘留的靶組織，建議休藥期不得低于16 d。

甲砜霉素；代謝殘留；鯉魚；藥代動(dòng)力學(xué)

甲砜霉素(Thiamphenicol, TAP)又稱為甲砜氯霉素、硫霉素等，是氯霉素類第二代廣譜抗菌藥。其抗菌機(jī)理與抗菌譜、氯霉素基本相似，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌均有較強(qiáng)的抑制作用，但毒性有所降低(Yoo, 2003; Park,2004)。TAP作為氯霉素替代物，抗菌效果佳且物美價(jià)廉，常用于治療細(xì)菌性爛鰓病、白皮病、白頭白嘴病等水產(chǎn)養(yǎng)殖病害(陳玉露, 2009)。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)甲砜霉素藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究已有開展，畜禽動(dòng)物主要集中在牛()、羊()、豬()和雞()等動(dòng)物中(Al-Nazawi, 2005; Gamez, 1992; Mestorino, 1993；Haritova, 2002; 唐海蓉等, 2013)；在水產(chǎn)動(dòng)物中，對(duì)松浦鏡鯉(Songpu mirror carp)、鯽魚()、鱸魚()、紅笛鯛()、凡納濱對(duì)蝦()、眼斑擬石首魚()、羅非魚(spp)等均有報(bào)道(楊洪波等, 2013a、b; Castells, 2000; 秦青英等, 2013; 陳玉露, 2009; 黃郁蔥等, 2017; 馮敬賓等, 2005)。鯉魚()，別稱鯉拐子、鯉子和紅魚等，是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)魚類。近年來(lái)，鯉魚的高密度養(yǎng)殖在帶來(lái)高經(jīng)濟(jì)效益的同時(shí)也引發(fā)多種魚類病害問題，致使養(yǎng)殖戶在養(yǎng)殖過(guò)程中存在過(guò)度使用或?yàn)E用甲砜霉素和其他抗生素藥物現(xiàn)象(蔡林宏, 2016)，對(duì)環(huán)境污染和人類健康都有很大影響。因此，進(jìn)行有關(guān)TAP在鯉魚體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究十分有必要。然而，目前有關(guān)TAP在鯉魚體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究尚未見報(bào)道，僅楊洪波等(2013a)對(duì)鯉魚的雜交亞種松浦鏡鯉進(jìn)行了口灌TAP的代謝動(dòng)力學(xué)研究。不同于其他研究學(xué)者對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的口灌和肌注給藥方法，本實(shí)驗(yàn)采用投喂藥餌方法模擬實(shí)際養(yǎng)殖中的用藥過(guò)程。實(shí)驗(yàn)在(26±2)℃的養(yǎng)殖水溫下，以30 mg/(kg·bw)的投喂劑量對(duì)鯉魚進(jìn)行單次投喂藥餌給藥，研究了TAP在鯉魚體內(nèi)的組織分布和藥物代謝隨時(shí)間的變化規(guī)律，以期為水生動(dòng)物疾病防治和藥物休藥期制定提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑 TAP標(biāo)準(zhǔn)品的純度為99.0% (Dr. Ehrenstorfer GmbH公司, 德國(guó))；TAP原料藥純度98.0%(Macklin公司)，氘代氯霉素(d5-氯霉素)純度為99.0%(Dr. Ehrenstorfer GmbH公司, 德國(guó))。乙酸乙酯(色譜純, CNW公司)；氨水(優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；正己烷(色譜純，CNW公司)；甲醇(色譜純, Merck公司)；無(wú)水硫酸鈉(分析純, 天津博迪化工股份有限公司)；水為超純水。

1.1.2 儀器設(shè)備 TSQ Endura液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜儀(Thermo Fisher)，CR 22G冷凍離心機(jī)(日立)，小型高速離心機(jī)(1-14, Sigma)，GHG-9203J干燥箱(上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司)，HR2014均質(zhì)機(jī)(珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)飛利浦家庭電器有限公司)，KQ-600DE超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，渦旋混合器(TAlBOYS)，N-EVAP氮吹儀(24孔，Organomation公司)，Gradient A10Mill-Q超純水器(Millipore)。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康鯉魚150條，平均規(guī)格為(1000±50) g，由贛榆佳信水產(chǎn)開發(fā)有限公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 本實(shí)驗(yàn)2016年8月1日~9月 7日于江蘇省連云港市贛榆佳信水產(chǎn)開發(fā)有限公司進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)以體重為(1000±50) g的健康鯉魚為對(duì)象，實(shí)驗(yàn)前經(jīng)檢測(cè)無(wú)TAP殘留，暫養(yǎng)在內(nèi)設(shè)淡水循環(huán)設(shè)備的水池中，池長(zhǎng)7 m、寬5 m、水深1.5 m，養(yǎng)殖密度為150尾/池。實(shí)驗(yàn)期間的水溫保持在(26±2)℃，每天換水1次，持續(xù)充氧。以30 mg/(kg·bw)的劑量對(duì)鯉魚進(jìn)行單次投喂藥餌。正式投喂前1 d禁食并采集鯉魚肌肉、肝臟、腎臟、脾臟、血漿和鰓的空白組織樣品。藥餌停喂后分別在1、2、4、6、8、12、16、20、24、36、48、96、144、192、240、288、384、480、576、672和768 h采樣。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各采集鯉魚6尾作為1組平行樣，取鯉魚尾靜脈血5 ml，放置預(yù)先涂抹肝素鈉的玻璃離心管中，4500 r/min離心8 min，取上層血漿，保存于4℃冷藏箱中，取血后快速取鯉魚軀體兩側(cè)背鰭處的肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓和脾臟放入樣品袋中，保存于–20℃的冰箱中。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制備 稱取10.0 mg甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液溶解并定容至100 ml的棕色容量瓶中，濃度為100 μg/ml，–20℃冰箱中避光冷凍保存，有效期1年。

1.2.3 氘代內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制備 稱取10.0 mg內(nèi)標(biāo)物d5-氯霉素，用甲醇溶液溶解并定容至100 ml的棕色容量瓶中，濃度為100 μg/ml，–20℃冰箱中避光冷凍保存，有效期1年。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線制備 移取1.2.2中的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相稀釋成10 ng/ml、100 ng/ml和1 μg/ml標(biāo)準(zhǔn)液，待用。在6個(gè)進(jìn)樣瓶中分別加入適量工作液，并分別加1.0 μg/ml氘代內(nèi)標(biāo)工作液50 μl，用流動(dòng)相定容至1.0 ml，配制成流動(dòng)相空白溶液、2、5、10、20、50和100 ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)液。系列標(biāo)準(zhǔn)液用液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)，以外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度作為橫坐標(biāo)()，以外、內(nèi)標(biāo)物的峰面積(響應(yīng)值)比值作為縱坐標(biāo)()，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。

1.3 樣品處理

1.3.1 樣品制備和提取 將血漿和各組織樣品放置室溫解凍，用均質(zhì)機(jī)將各組織部位均質(zhì)，待用。稱取各組織樣品[(1.0±0.1) g]和血漿[(1.0±0.1) ml]于15 ml聚丙烯離心管中，加入1.2.3中氘代內(nèi)標(biāo)工作液50 μl，再加入5 ml乙酸乙酯，1 g無(wú)水硫酸鈉，100 μl氨水，渦旋提取5 min，超聲提取5 min，以4500 r/min離心5 min，上清液轉(zhuǎn)移至15 ml比色管中。殘?jiān)性俜謩e加入3 ml的乙酸乙酯，重復(fù)上述操作，合并上清液至15 ml的比色管中，在溫度為40℃下氮吹至干。

1.3.2 凈化 將比色管中的殘?jiān)? ml的超純水溶解，超聲5 min，加入3 ml正己烷，渦旋混合1 min，靜置分層，棄掉上層的正己烷，再加入3 ml的正己烷，渦旋混合30 s，靜置分層。最后移取1 ml的水相于1.5 ml的聚丙烯離心管中，以12000 r/min離心10 min，取上清液過(guò)0.22 μm水相濾膜，供液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。

1.4 儀器條件

1.4.1 色譜條件 色譜柱：MGⅡ C18(2.0 mm × 100 mm, 3 μm)；流動(dòng)相：流動(dòng)相A為甲醇，流動(dòng)相B為超純水；流速：200 μl/min，柱溫：40℃，進(jìn)樣量：10 μl；梯度洗脫條件見表1。

1.4.2 質(zhì)譜條件 離子源：電噴霧離子源(ESI)；掃描方式：負(fù)離子模式；電噴霧電壓：2500 V；鞘氣壓力：40 Arb；輔助氣壓力：25 Arb；碰撞氣壓：2 mTorr；離子傳輸毛細(xì)管溫度：340℃；檢測(cè)方式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM)；選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)母離子、子離子和碰撞能見表2。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫條件

Tab.1 Gradient elution conditions of mobile phase

1.5 回收率和精密度

實(shí)驗(yàn)用各組織空白樣進(jìn)行加標(biāo)回收，在空白樣中加入TAP標(biāo)準(zhǔn)液，使其藥物濃度為20.0、50.0和100.0 μg/kg的3個(gè)添加水平，每個(gè)水平5個(gè)平行，連續(xù)3 d，計(jì)算回收率、日內(nèi)和日間精密度。

表2 SRM監(jiān)測(cè)模式下目標(biāo)物質(zhì)譜參數(shù)

Tab.2 Spectral parameters of target material under SRM monitoring model

1.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用Excel 2007和DAS 2.0數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)TAP在鯉魚體內(nèi)各組織藥物濃度進(jìn)行藥–時(shí)數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢測(cè)限

采用內(nèi)標(biāo)法定量，以TAP濃度()為橫坐標(biāo)，以TAP標(biāo)準(zhǔn)物和氘代內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值()為縱坐標(biāo)作圖，如圖1所示。TAP標(biāo)準(zhǔn)液在2.0~100.0 ng/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(2)為0.99703，線性回歸方程為=0.03+0.09，該法最低檢測(cè)限為0.3 μg/kg (信噪比/=3)。結(jié)果表明，該方法靈敏度高，能夠滿足實(shí)驗(yàn)要求。

2.2 回收率與精密度

取鯉魚的肌肉、魚皮、腎臟、肝臟、鰓、脾臟和血漿為測(cè)回收率與精密度的組織，每份稱取(1.00±0.05) g/ml，加入TAP標(biāo)準(zhǔn)液，使其藥物濃度為20.0、50.0和100.0 μg/kg，每個(gè)水平5個(gè)平行，連續(xù)進(jìn)行3 d，結(jié)果見表3。

圖1 TAP標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.3 TAP在鯉魚體內(nèi)的藥–時(shí)曲線(Ci-Ti)

本實(shí)驗(yàn)在(26±2)℃的養(yǎng)殖水溫下，以30 mg/(kg·bw)的劑量對(duì)鯉魚進(jìn)行模擬投餌給藥，研究TAP在鯉魚體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)。采用高效液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法分析TAP在鯉魚體內(nèi)各組織的殘留量隨時(shí)間變化的藥–時(shí)曲線，見圖2(內(nèi)嵌0~50 h藥時(shí)曲線圖)。如圖2顯示，鯉魚腎臟和鰓中的TAP殘留達(dá)峰濃度分別為35300.1和33009.5 μg/kg，且明顯高于其他組織；脾臟和腎臟中藥物達(dá)峰時(shí)間一致，均在給藥后2 h達(dá)到峰值，后隨著時(shí)間變化逐漸降低；肌肉、肝臟和血漿的藥物達(dá)峰時(shí)間較接近，在給藥后16 h達(dá)到峰值，隨后TAP濃度持續(xù)下降；魚鰓中藥物濃度給藥后即達(dá)到峰值，分析可能是由于鰓是鯉魚主要呼吸器官，血液灌流量較大，且鰓絲表面布滿微細(xì)血管，部分溶解于水中的藥物極易在短時(shí)間內(nèi)通過(guò)微血管進(jìn)入鰓中，雙重效果下出現(xiàn)鰓中的即時(shí)藥物濃度達(dá)最大值。

表3 回收率與精密度

Tab.3 Recovery and precision

圖2 TAP藥–時(shí)曲線

2.4 TAP在鯉魚體內(nèi)各組織的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

TAP在鯉魚各組織中的藥–時(shí)殘留數(shù)據(jù)通過(guò)DAS 2.0軟件分析及房室模型嵌和計(jì)算得出符合動(dòng)力學(xué)最佳模型：一級(jí)吸收二室模型，TAP在鯉魚各組織的殘留濃度隨時(shí)間變化的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表4。

3 討論

3.1 TAP在鯉魚體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征

在(26±2)℃的養(yǎng)殖水溫下，對(duì)鯉魚進(jìn)行模擬投餌給藥30 mg/(kg·bw)的劑量，體內(nèi)各組織藥–時(shí)數(shù)據(jù)經(jīng)DAS 2.0軟件和Excel軟件擬合，符合一級(jí)吸收二室模型。此結(jié)果與紅笛鯛、鯽魚、凡納濱對(duì)蝦、大菱鲆 ()、中華絨螯蟹()和日本鰻鱺()(秦青英等, 2013; 楊洪波等, 2013a、b; 陳玲珍等, 2010; 林茂等, 2011; 梁俊平等, 2015)等動(dòng)物的房室模型基本一致，但與肉雞、家兔()、牛和羊(郭桂芳等, 2010; 邢曉玲等, 2009; Mengozzi, 2002; Abdennebi, 1994)等動(dòng)物的研究結(jié)果存在差異，這可能和研究動(dòng)物的種屬、給藥方式、給藥劑量和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的差異有關(guān)。

表4 TAP在鯉魚體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

Tab.4 Pharmacokinetic parameters of TAP in carp

注：α為分布速率常數(shù)；β為消除速率常數(shù)；a為藥物吸收速率常數(shù)；1/2α為分布相半衰期；1/2β為消除相半衰期；1/2Ka為吸收相半衰期；10為藥物在中央室的消除速率；12為藥物自中央室到周邊室的一級(jí)轉(zhuǎn)運(yùn)速率；21為藥物自周邊室到中央室的一級(jí)轉(zhuǎn)運(yùn)速率；1/F為表觀分布容積；L/F為藥物自體內(nèi)消除的總清除率，AUC(0–t)為0~t時(shí)的藥時(shí)曲線下總面積；AUC(0–∞)為0~m時(shí)的藥時(shí)曲線下總面積；peak為最大達(dá)峰時(shí)間；max為藥物最大達(dá)峰濃度

Note: α denoted distribution rate constant; β denoted elimination rate constant;adenoted the drug absorption rate constant;1/2denoted alpha phase half-life;1/2βdenoted elimination half-life;1/2Kadenoted absorption half-life;10denoted drugs from the central chamber of the towel eliminating rate;12denoted transport rate for the drugs from the central compartment to the surrounding room;21denoted the drug from the periphery room to a central compartment;1/Fdenoted transport rate;L/Fdenoted apparent volume of distribution; AUC(0-t)denoted total area under the time curve of 0~t; AUC(0–∞)denoted the total area under the curve of 0~∞;peakdenoted peak time;maxdenoted drug peak concentration

3.2 吸收和分布特征

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用經(jīng)典房室模型和統(tǒng)計(jì)矩原理分析TAP在鯉魚體內(nèi)各組織的藥時(shí)動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。達(dá)峰時(shí)間peak和達(dá)峰濃度max是衡量藥物吸收速度和程度的重要參數(shù)。本實(shí)驗(yàn)中，TAP在鯉魚的肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓、脾臟和血漿的達(dá)峰時(shí)間peak分別為16、2、16、8、0、2和16 h，達(dá)峰濃度max分別為15.6、35.3、12.4、9.0、33.0、11.6 mg/kg和21.0 mg/L。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，TAP進(jìn)入鯉魚體內(nèi)后迅速在各組織擴(kuò)散并在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到峰值；魚鰓的peak最短，為零，但不符合實(shí)際，分析可能是由于鰓是鯉魚主要呼吸器官且表面布滿微細(xì)血管，因此，部分溶解于水中的藥物在短時(shí)間內(nèi)極易通過(guò)微血管進(jìn)入鰓中；腎臟中TAP含量達(dá)峰時(shí)間短且峰值明顯高于其他組織，TAP在血管豐富、滲透性好的組織中吸收量較大(Wu, 2006)，因此，推測(cè)TAP在組織中分布速率與殘留濃度和血流量有關(guān)。

藥–時(shí)曲線下面積(AUC)是反應(yīng)藥物進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)藥量的多少，是衡量藥物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)各組織器官吸收的重要指標(biāo)。結(jié)果顯示，TAP在鯉魚體內(nèi)肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓、脾臟和血漿的AUC分別為1084.5、1578.1、777.3、541.1、0.1、478.1 mg/(kg·h)和485.1 mg/(L·h)。結(jié)果表明，TAP在腎臟中的吸收量明顯高于在肌肉、肝臟、魚皮、鰓和脾臟中的吸收量。此結(jié)果與楊洪波(2013a)以30 mg/(kg·bw)的劑量單次口灌松浦鏡鯉的藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果一致。

3.3 消除特征

結(jié)果表明，停藥后前期TAP在鯉魚各組織的下降速度較快，后期的消除速率較為緩慢。消除半衰期(1/2β)是衡量藥物在研究對(duì)象體內(nèi)消除速率的一個(gè)重要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)。TAP在不同研究對(duì)象中的消除半衰期差異較大。本研究TAP在鯉魚體內(nèi)肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓、脾臟和血漿各組織的1/2β分別為11.4、100.2、54.2、41.1、69.5、38.0和71.9 h。結(jié)果表明，TAP在腎臟中的消除半衰期較長(zhǎng)，推測(cè)TAP可能是通過(guò)血液吸收分布在各組織中，再經(jīng)腎臟代謝排出。另外，消除相速率常數(shù)β宏觀體現(xiàn)從中央室向外消除的濃度變化速率。TAP各組織在鯉魚體內(nèi)各組織消除速率常數(shù)大小為β腎臟0.061＞β脾臟0.018＞β魚皮0.017＞β肝臟0.013＞β血漿0.01＞β肌肉0.007＞β鰓0，本實(shí)驗(yàn)符合Ingebrigtsen(1991)的研究結(jié)果。Ingebrigtsen(1991)在研究影響魚藥藥效中提出藥物在魚腎臟的消除相速率常數(shù)高于其他組織，這可能與腎臟血液灌流量較大有關(guān)(Ingebrigtsen, 1991; Kowalski, 2007)。

綜上所述，TAP在鯉魚體內(nèi)吸收迅速且分布廣泛，不同組織間的差異較大。按照農(nóng)業(yè)部《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》文件規(guī)定TAP在水產(chǎn)動(dòng)物中最高殘留限量(MRL)不得高于50 μg/kg。休藥期通常以代謝較為緩慢的組織作為殘留靶組織，以此來(lái)確定休藥期。本研究中肌肉、腎臟、肝臟、魚皮、鰓、脾臟和血漿的TAP殘留量低于MRL的時(shí)間分別從16、16、12、12、12、10和12 d開始，因此，建議以鯉魚肌肉和腎臟作為靶組織確定休藥期。在(26±2)℃養(yǎng)殖水溫下，以30 mg/(kg·bw)劑量對(duì)鯉魚進(jìn)行單次投喂TAP藥餌時(shí)，建議休藥期不低于16 d。

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Drug Pharmacokinetic Study of Thiamphenicol in

PAN Mingxuan1,2,3, LI Zhaoxin1,3①, XING Lihong1,3, SUN Xiaojie1,3, PENG Jixing1,3, DONG Xiao1,2,3

(1. Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071; 2. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306; 3. Laboratory of Quality & Safety Risk Assessment for Aquatic Products, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Qingdao 266071)

In this experiment, the water temperature was raised at (26±2)℃. The experiment used high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry(HPLC-MS/MS) to study thiamphenicol in pharmacokinetics of carp with 30 mg/(kg·bw) single dose of carp feed. Data were analyzed using DAS 2 dynamics software, and the experimental results suggest a two-compartment model of primary absorption. The peak of thiamphenicol (TAP) in muscles, kidneys, liver, skin, gills, spleen, and plasma were 16, 2, 16, 8, 0, 2, 16 h; themaxwere 15.6, 35.3, 12.4, 9.0, 33.0, 11.6 mg/kg, and 21.0 mg/L; the area under curve (AUC) was 1084.5, 1578.1, 777.3, 541.1, 0.1, 478.1 mg/(kg·h), and 485.1 mg/(L·h); the1/2βwas 11.4, 100.2, 54.2, 41.1, 69.5, 38.0, and 71.9 h. The results showed that the distribution and elimination rate of TAP in carp tissues varied greatly; the peak time of renal drugs is shorter; the peak concentration is higher than in other tissues, and the elimination half-life is higher than that in other tissues, which suggested that kidneys are the main organ of TAP accumulation and metabolism. In accordance with the Ministry of Agriculture, Animal Food in Veterinary Drugs Maximum Residue Limit document provides that the maximum of TAP in aquatic animal residue limit (MRL) shall not be higher than 50 μg/kg. In this experiment, the amounts of TAP residues in muscle, kidney, liver, skin, spleen, and plasma were lower than MRL, starting from 16, 16, 12, 12, 12, 10, and 12 d respectively. It is recommended that the period of withdrawal should be no less than 16 d.

Thiamphenicol; Metabolic residue; Carp; Pharmacokinetics

* 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2016HY-ZD1204)和2017國(guó)家水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估(GJFP201700901)共同資助 [This work was supported by Central Public-Interest Scientific Institution Basal Research Fund, CAFS (2016HY-ZD1204), and 2017 National Risk Assessment Program of Aquatic Products for Quality and Safety (GJFP201700901)]. 潘明軒, E-mail: 1054410846@qq.com

李兆新，研究員，E-mail: lizx@ysfri.ac.cn

LI Zhaoxin, E-mail: lizx@ysfri.ac.cn

2017-07-05,

2017-08-14

10.19663/j.issn2095-9869.20170705001

潘明軒, 李兆新, 邢麗紅, 孫曉杰, 彭吉星, 董曉. 甲砜霉素在鯉魚中的藥代動(dòng)力學(xué)研究. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2018, 39(5): 166–172 Pan MX, Li ZX, Xing LH, Sun XJ, Peng JX, Dong X. Drug pharmacokinetic study of thiamphenicol in. Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(5): 166–172

S917.4

A

2095-9869(2018)05-0166-07

(編輯 馮小花)