以CLSI EP15-A2指南驗(yàn)證生化分析系統(tǒng)的精密度和正確度

陳振翅 梁婉珍 彭又生

(江門市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 江門 529000)

根據(jù)CLSI EP15-A2的評(píng)價(jià)方案驗(yàn)證本科購(gòu)置的日立7600生化儀對(duì)Urea、UA、Chol三個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)精密度和正確度，探討EP15-A2指南用于驗(yàn)證配套檢測(cè)系統(tǒng)精密度和正確度的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1儀器與試劑 儀器選用日立公司生產(chǎn)的7600生化分析儀。試劑盒選擇中生北控公司生產(chǎn)的Urea測(cè)定試劑盒(批號(hào)160761)、UA測(cè)定試劑盒(批號(hào)160691)、Chol測(cè)定試劑盒(批號(hào)161441)及配套校準(zhǔn)品。

1.1.2正確度驗(yàn)證材料 選用2016年衛(wèi)生部臨檢中心常規(guī)化學(xué)室間質(zhì)評(píng)第三次活動(dòng)質(zhì)評(píng)物(批號(hào)201633,201635)凍干粉(簡(jiǎn)稱C1、C2)。

1.1.3精密度驗(yàn)證材料 選用2016年衛(wèi)生部臨檢中心常規(guī)化學(xué)室間質(zhì)評(píng)第二次活動(dòng)質(zhì)評(píng)物(批號(hào)201621,201622)凍干粉(簡(jiǎn)稱L1、L2)和2016年衛(wèi)生部臨檢中心脂類項(xiàng)目室間質(zhì)評(píng)第一次活動(dòng)質(zhì)評(píng)物(批號(hào)201612,201613)凍干粉(簡(jiǎn)稱L3、L4)。

1.2 方法

1.2.1儀器校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控 每天實(shí)驗(yàn)前對(duì)Urea、UA、Chol 3個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)，并測(cè)定質(zhì)控水平，室內(nèi)質(zhì)控合格時(shí)當(dāng)天數(shù)據(jù)方可接受。

1.2.2正確度驗(yàn)證 根據(jù)EP15-A2指南每天對(duì)同一批C1、C2按項(xiàng)目分別測(cè)定2次，重復(fù)測(cè)定5 d。

1.2.3精密度驗(yàn)證 根據(jù)EP15-A2指南每天對(duì)L1、L2、L3、L4測(cè)定3次，重復(fù)測(cè)定5 d。

1.2.4對(duì)實(shí)驗(yàn)室精密度和正確度要求 本實(shí)驗(yàn)3個(gè)項(xiàng)目的精密度和正確度指標(biāo)分別參考我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)》的偏倚(Bias)和變異系數(shù)(coefficient of variation，CV)指標(biāo)，并要求試劑商說明書指標(biāo)不能大于表1中的要求。

表1 對(duì)3個(gè)項(xiàng)目CV和偏倚的要求[3]

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

根據(jù)CLSI EP15-A2文件進(jìn)行評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室生化分析系統(tǒng)，使用昆萊公司的質(zhì)控軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。具體參考以下公式[4]：

1.3.1精密度驗(yàn)證公式 計(jì)算重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差S，按CLSI EP15-A2的公式測(cè)定L1、L2結(jié)果，計(jì)算重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差S，判斷是否符合(不大于)試劑廠家數(shù)據(jù)，是否通過驗(yàn)證。

1.3.2正確度驗(yàn)證公式

1.3.2.2計(jì)算驗(yàn)證區(qū)間 設(shè)ɑ=0.05，自由度2n-1(2次重復(fù)，n批)=2×5-1=9，臨界值t0.05，9=2.262，驗(yàn)證區(qū)間計(jì)算公式為：

2 結(jié) 果

2.1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

本科新購(gòu)置的日立7600全自動(dòng)分析生化儀測(cè)定Urea、UA、Chol濃度水平精密度均達(dá)到了廠家聲稱的性能，并且均小于我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，見表2。

2.2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

Urea、UA、Chol濃度水平測(cè)定值均落在廠家設(shè)定的范圍內(nèi)，并且均小于我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求，符合分析性能指標(biāo)。見表3。

表2 三項(xiàng)目檢測(cè)指標(biāo)的精密度驗(yàn)證結(jié)果

表3 三項(xiàng)目檢測(cè)指標(biāo)的正確度驗(yàn)證結(jié)果

3 討 論

3.1 精密度、正確性概念界定

精密度是評(píng)價(jià)隨機(jī)誤差的指標(biāo)，批內(nèi)精密度是指在時(shí)間、校準(zhǔn)、操作者、儀器等條件一致的前提下獲得的精密度，也稱之為重復(fù)性[6-7]。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度是指實(shí)驗(yàn)室、設(shè)備條件相同，但是操作者、操作時(shí)間不同獲得的精密度，也稱之為總精密度[8]。正確性是反映系統(tǒng)誤差的指標(biāo)，是多次測(cè)量(實(shí)際操作為10～15次左右的測(cè)量)均值與實(shí)際值的接近程度，又稱之為真實(shí)度，用Bia表示[9]。

3.2 據(jù)CLSI EP15-A2文件驗(yàn)證精密度和正確性方法

驗(yàn)證原因：檢測(cè)方法在首次引入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)/能力經(jīng)驗(yàn)證后未通過時(shí)并且實(shí)驗(yàn)室采取糾正措施后而實(shí)施的，具體實(shí)施步驟如下：(1)實(shí)驗(yàn)室參考我國(guó)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等列出預(yù)期的精密度和正確性[10]；(2)實(shí)驗(yàn)室所選取的新方法要保證其聲稱的性能指標(biāo)達(dá)到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)室要求[11]；(3)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室方法對(duì)聲稱性能指標(biāo)的達(dá)標(biāo)情況，若不能達(dá)標(biāo)，則需要計(jì)算達(dá)標(biāo)后是否滿足實(shí)驗(yàn)室的要求[12]。

3.3 7600生化分析儀精密度、正確性驗(yàn)證結(jié)果分析

根據(jù)CLSI EP15-A2文件驗(yàn)證7600生化分析儀精密度，測(cè)定Urea、UA、Chol濃度水平精密度均達(dá)到了廠家聲稱的性能，提示精密度驗(yàn)證通過，并且廠家聲稱的性能均小于我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。Urea、UA、Chol濃度水平測(cè)定值均落在廠家設(shè)定的范圍內(nèi)，并且均小于我國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求，符合分析性能指標(biāo)，提示正確性驗(yàn)證通過。需要注意的是據(jù)CLSI EP15-A2文件驗(yàn)證精密度和正確性僅僅是性能驗(yàn)證，并不能得到精密度和正確性的數(shù)據(jù)，若要準(zhǔn)確數(shù)據(jù)則需要進(jìn)行要求更高的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，主要依據(jù)CLSI-P5和EP9[13-15]。

綜上所述，根據(jù)CLSI EP15-A2文件驗(yàn)證7600生化分析儀精密度和正確性是較為可靠的方法，其實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單方便，適合方法的性能指標(biāo)的驗(yàn)證，建議推廣應(yīng)用。