對比分析菌落總數(shù)檢測片與國標法用于生鮮乳中菌落總數(shù)的檢測

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(河北省獸藥監(jiān)察所, 河北 石家莊 050000)

0 引言

食品安全國家標準中規(guī)定：生鮮乳中菌落總數(shù)應小于或等于 200 萬 cfu/mL。目前，生鮮乳菌落總數(shù)的測定方法主要為國標法，關于菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)的報道較少，本試驗主要通過將菌落總數(shù)檢測片法和國標法的檢測結果作為對比，以討論菌落總數(shù)檢測片方法的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器與設備

生化培養(yǎng)箱；自動壓力蒸汽滅菌器；玻璃試管；移液槍。

1.2 材料與試劑

營養(yǎng)瓊脂；生理鹽水；細菌總數(shù)檢測片(Charm)；一次性滅菌槍頭；一次性使用培養(yǎng)皿。

1.3 試驗內(nèi)容及方法

將隨機抽取的50批生鮮乳樣品分別進行檢測片法和國標法檢測，國標法檢測作為對照組，檢測片法檢測作為試驗組。對照組檢測依據(jù)國標法GB 4789.2-2010。用無菌槍頭吸取生鮮乳樣品 25 mL置 225 mL裝有無菌生理鹽水的無菌均質袋中，拍打 1～2 min，選擇三個適宜稀釋度(10-3、10-4、10-5)進行稀釋，分別將三個稀釋度樣品于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，同時作空白對照。將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，使其混合均勻。瓊脂凝固后置于(36±1)℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng) (48±2) h，記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量，菌落計數(shù)以菌落形成單位(CFU)表示。

試驗組應用菌落總數(shù)檢測片進行檢測。分別取上述對照組中三個稀釋度(10-3、10-4、10-5)的樣品1 mL加入檢測片內(nèi)，同時作空白對照。標記檢測片，提起粘合片，豎直加入樣品，重新蓋上粘合片，保持表面平整。培養(yǎng)方法與菌落計數(shù)同對照組。

1.4 結果計算

選取菌落數(shù)為30～300CFU，無蔓延菌落生長的培養(yǎng)皿計數(shù)菌落總數(shù)。若只有1個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算2個平板菌落數(shù)的平均值；若2個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按計算公式：N=ΣC/(n1+0.1n2)d。(注：N—樣品中菌落數(shù)；∑C—平板菌落數(shù)之和；n1—第1稀釋度平板個數(shù)；n2—第2稀釋度平板個數(shù)；d—稀釋因子。)

1.5 統(tǒng)計學方法

2 檢測結果

從表1可知，兩組空白對照均無菌落生長；在相同條件下，計算2組菌落總數(shù)結果顯示，試驗組的菌落總數(shù)與對照組相比較低，但差異不顯著(P>0.05)。

表1 兩種不同檢測方法對生鮮乳菌落總數(shù)檢測的結果比較

注：與對照組比較，*P<0.05

3 討論

生鮮乳的質量檢測包括理化檢驗以及菌落總數(shù)等，菌落總數(shù)是反應生鮮乳質量的一個重要指標。其檢測方法包括國標法和快速檢測方法。傳統(tǒng)的國標法檢測生鮮乳中的菌落總數(shù)較為準確，但是操作相對復雜，使用的材料也相對較多。隨著檢測技術的快速發(fā)展，不斷研發(fā)出先進的檢測方法。菌落總數(shù)檢測片是用來檢測食品中菌落總數(shù)的一種新方法，它以標準瓊脂方法為基礎，其培養(yǎng)基中含有酶的底物2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)，此種底物可以被活菌還原成紅色。所以，在經(jīng)過加樣和培養(yǎng)后，細菌菌落在檢測片上顯出紅色的菌斑，方便觀察和計數(shù)。菌落總數(shù)檢測片是一種可以代替普通培養(yǎng)皿的新型檢測產(chǎn)品，優(yōu)點包括無需配制培養(yǎng)基，方便攜帶和使用，培養(yǎng)時可疊加，節(jié)省空間。其操作和結果觀察都較為簡便可靠。綜上所述，應用菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)具有一定的應用價值，且操作方便，易于攜帶，值得推廣。