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    冰鮮鴿肉貯藏過程中的微生物菌群多樣性

    2018-10-25 03:29:26蔡教英王小玉姚麗鋒游淑珠陳海光朱楚雯
    肉類研究 2018年9期
    關(guān)鍵詞:增菌冰鮮菌門

    蔡教英,王小玉,姚麗鋒,游淑珠,丁 琦,陳海光*,朱楚雯

    (1.珠海檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,廣東 珠海 519015;2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院輕工食品學(xué)院,廣東 廣州 510225)

    “一鴿勝九雞”的俚語說明鴿子的營養(yǎng)成分非常豐富,比雞更勝一籌。粵港澳等地區(qū)素來有食用乳鴿的飲食習(xí)慣,烹調(diào)方法多種多樣,市場(chǎng)對(duì)鴿肉的需求也越來越大。但近年來,禽流感疫情嚴(yán)重影響了整個(gè)家禽產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,傳統(tǒng)的活禽銷售模式對(duì)消費(fèi)者及養(yǎng)殖戶都潛在巨大危害。隨著2014年以來廣東省倡導(dǎo)的“集中屠宰、冷鏈配送、生鮮上市”的家禽屠宰政策的實(shí)施,改變禽類食品供應(yīng)模式,以冰鮮替代活禽供應(yīng),對(duì)建立防控人感染禽流感的長效機(jī)制和促進(jìn)產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí)均具有重要意義。

    鴿肉營養(yǎng)物質(zhì)豐富且水分活度高,這使得鴿肉在生產(chǎn)、貯藏、運(yùn)輸及銷售等過程中易受微生物的污染,且在不同貯藏條件下,冰鮮肉的微生物多樣性存在一定差異[1]。冰鮮鴿是在乳鴿屠宰后將衛(wèi)生檢驗(yàn)合格的乳鴿胴體迅速冷卻至0~4 ℃,并在此溫度下對(duì)動(dòng)物胴體進(jìn)行加工、貯運(yùn)和銷售[2]。冰鮮鴿肉在0~4 ℃低溫條件下貯藏,能夠有效抑制肉中微生物的生長和酶活性,降低細(xì)菌總數(shù),減少有害毒素的產(chǎn)生,使冰鮮肉中的致病菌、生物毒素受到一定程度的抑制,延緩肉類腐敗變質(zhì)[3]。目前,關(guān)于冰鮮肉類的腐敗微生物研究大部分集中在雞肉[4-6]、豬肉[7]、蝦[8]、牛肉[9]、羊肉、鴨肉、魚[10-11]、貝等。張莉等[12]采用轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列(internal transcribed spacer,ITS)測(cè)序,大部分研究采用16S rDNA測(cè)序。孫彥雨等[13]應(yīng)用16S rDNA的變性梯度凝膠電泳指紋圖譜技術(shù)對(duì)冰鮮雞肉的微生物多樣性進(jìn)行研究。唐文靜等[14]使用16S rDNA分子鑒定對(duì)冷藏海鱸魚的優(yōu)勢(shì)腐敗菌進(jìn)行研究。岑璐伽等[15]使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)-變性梯度凝膠電泳分析冷卻牦牛肉貯藏過程中的優(yōu)勢(shì)菌。

    近年來,隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,可以進(jìn)行大規(guī)模平行測(cè)序,且能客觀反映樣本中DNA的豐度和鑒定出傳統(tǒng)培養(yǎng)條件下不可生長細(xì)菌的高通量測(cè)序技術(shù)應(yīng)用越來越廣泛,而且較傳統(tǒng)測(cè)序法成本低廉[16]。與傳統(tǒng)方法相比,細(xì)菌的高通量測(cè)序技術(shù)在微生物群落研究方面的優(yōu)勢(shì)越來越突出,目前已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)[17]、環(huán)境[18-20]、昆蟲學(xué)[21-23]、中藥[24-25]及植物[26-27]等多個(gè)方面。且近幾年來在食品領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展迅速,已廣泛應(yīng)用于乳制品[15]、發(fā)酵類食品[16,28]、肉制品[4-7]、水產(chǎn)品[8,10-11]中的細(xì)菌群落多樣性研究。

    本研究采用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)冰鮮鴿肉中的腐敗菌進(jìn)行研究,分析不同增菌溫度下冰鮮鴿肉中微生物菌群的菌相構(gòu)成情況、貯藏過程中各種微生物菌群數(shù)量的變化特點(diǎn)以及貯藏過程中肉質(zhì)新鮮度的變化規(guī)律。為了提高DNA的得率,需對(duì)細(xì)菌進(jìn)行增菌處理。目前的國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定菌落總數(shù)時(shí)的培養(yǎng)溫度為(36±1) ℃,但是該條件下培養(yǎng)時(shí)的菌落總數(shù)測(cè)定對(duì)象只包括嗜溫性需氧微生物。對(duì)于低溫貯藏冷鮮肉來說,嗜冷菌也可能是優(yōu)勢(shì)菌群,如果能對(duì)嗜冷菌和嗜溫菌進(jìn)行同時(shí)檢測(cè),綜合評(píng)價(jià)會(huì)更合理。因此,本研究選取4 ℃和37 ℃ 2 種增菌溫度,綜合分析得出冰鮮鴿肉的微生物消長規(guī)律,了解其菌相變化和品質(zhì)變化的規(guī)律,以期為冰鮮鴿的保鮮控制技術(shù)提供理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    冰鮮鴿肉由珠海市金同農(nóng)副食品有限公司提供,隨機(jī)選取18 只當(dāng)天屠宰的冰鮮鴿密封包裝后2 h內(nèi)用冰盒運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。在無菌環(huán)境下將鴿肉隨機(jī)分為9 組,每組2等份,分別收集每只冰鮮鴿的鴿肉作為樣品,每份25 g,經(jīng)取樣袋密封包裝后放置于4 ℃冰箱貯藏。

    Q5413細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 德國Tiangen公司;10855-021 LB肉湯 美國Termo Fisher Scientific公司;M0491L擴(kuò)增聚合酶 美國NEB公司;P7589熒光定量染料、75510-019瓊脂糖凝膠試劑、AM9870瓊脂糖凝膠電泳緩沖液 美國Invitrogen公司;DL2000核酸Marker 日本TaKaRa公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    2100生物分析儀 美國Agilent公司;KB400恒溫培養(yǎng)箱 德國Binder公司;Minispin小型高速離心機(jī)德國Eppendorf公司;LogicA2生物安全柜 美國Labconco公司;Synergy2全波長酶標(biāo)儀 美國Biotek公司。

    1.3 方法

    1.3.1 細(xì)菌總DNA提取

    以購買當(dāng)天為0 d,作為對(duì)照組,其余為實(shí)驗(yàn)組。在無菌環(huán)境下,分別取貯藏不同時(shí)間(0、2、4、6、8、10、12、14、16 d)的冰鮮鴿肉25 g裝入拍打袋,加入225 mL無菌生理鹽水,用拍擊式均質(zhì)器拍打后,移取1 mL菌液加入40 mL的LB培養(yǎng)基中,于4 ℃條件下增菌7 d,同時(shí)取1 mL菌液加入40 mL的LB培養(yǎng)基中,于37 ℃條件下增菌24 h。分別取1 mL增菌液至EP管內(nèi),采用Tangen細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒按照相應(yīng)操作步驟進(jìn)行。

    1.3.2 16S rDNA V3-V4區(qū)PCR擴(kuò)增

    引物序列:上游5’-A C T C C T A C G G G A GGCAGCA-3’,下游5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’。對(duì)細(xì)菌16S rDNA基因V3-V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系(25 μL):2×Mix 12.5 μL、引物(10 μmol/L)1 μL、DNA模板(30 ng)1 μL、ddH2O 10.5 μL。98 ℃預(yù)變性45 s;98 ℃變性15 s,57 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,循環(huán)20 次;72 ℃末端延伸10 min,4 ℃條件下保溫。

    1.3.3 測(cè)序文庫制備及數(shù)據(jù)分析

    高通量測(cè)序文庫的構(gòu)建和Ion Torrent PGM高通量測(cè)序的工作委托上海伯豪生物公司進(jìn)行。按97%相似性標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作分類單元(operational taxonomic unit,OTU)聚類,然后利用RDP-classifier及Silva數(shù)據(jù)庫進(jìn)行物種注釋和分類學(xué)分析?;贠TU的分析結(jié)果,采用對(duì)樣本序列進(jìn)行隨機(jī)抽樣的方法,計(jì)算常用的Alpha多樣性指數(shù),包括超Ⅰ指數(shù)、Ace指數(shù)、香農(nóng)指數(shù)(Shannon index)和辛普森指數(shù)(Simpson index),并作出相對(duì)應(yīng)的稀釋曲線。超Ⅰ指數(shù)和Ace指數(shù)用于評(píng)價(jià)微生物菌群豐富度,其數(shù)值越高,表明群落物種豐富度越高;香農(nóng)指數(shù)和辛普森指數(shù)反映物種多樣性,香農(nóng)指數(shù)與群落多樣性呈正相關(guān),辛普森指數(shù)則相反,其值越大,群落多樣性越低。通過多變量統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的主成分分析(principal component analysis,PCA),可以直觀顯示不同樣品群落間物種組成的相似性及差異性[14]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 稀釋性曲線結(jié)果分析

    為避免在高通量測(cè)序過程中由于引入錯(cuò)誤或不可靠堿基等不可控因素造成的測(cè)序錯(cuò)誤,減少對(duì)下游生物信息分析造成的不良影響,需要對(duì)測(cè)序得到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行優(yōu)化處理。通過利用QIIME軟件對(duì)測(cè)序所得原始序列數(shù)進(jìn)行過濾,去除低質(zhì)量序列片段、錯(cuò)誤序列、連接后引物序列以及無法與數(shù)據(jù)庫中序列信息比對(duì)一致的序列后,得到最終的有效序列。本次測(cè)序所得到的有效序列均可以達(dá)到后續(xù)微生物多樣性分析的要求。稀釋性曲線是通過對(duì)序列進(jìn)行隨機(jī)抽樣,以抽到的序列數(shù)與它們所代表的物種數(shù)來構(gòu)建的曲線。根據(jù)曲線走勢(shì)可以比較測(cè)序樣本的物種豐富度,同時(shí)說明測(cè)序數(shù)據(jù)的合理性以及測(cè)序量能否涉及所有菌群。

    18 個(gè)樣品經(jīng)過測(cè)序后得到的下機(jī)序列總數(shù)為589 542 個(gè),其中有效序列總數(shù)達(dá)420 154 個(gè),每個(gè)樣品的有效序列百分比均達(dá)60%以上。說明本次測(cè)序所得到的有效序列可以達(dá)到后續(xù)微生物多樣性分析的要求。

    圖 1 不同增菌溫度下各樣品的稀釋性曲線Fig. 1 Rarefaction curves for each sample under different enrichment temperatures

    利用R語言工具繪制曲線圖,由圖1可知,樣品在4 ℃增菌溫度下得到的OTU數(shù)量普遍比37 ℃多,說明在4 ℃增菌溫度下微生物的多樣性比37 ℃時(shí)更豐富。隨著測(cè)序量的不斷增加,每個(gè)樣品的稀釋性曲線都有趨向平緩的趨勢(shì),說明本研究的檢測(cè)取樣合理,測(cè)序量基本反映出樣品中絕大部分的物種信息,本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)具有很大的實(shí)際價(jià)值。

    2.2 不同增菌溫度下冰鮮鴿肉細(xì)菌群落的Alpha多樣性分析

    根據(jù)97%相似性水平下的OTU信息,采用Alpha多樣性指數(shù)對(duì)樣品微生物物種的豐富度和多樣性進(jìn)行評(píng)估。

    表 1 樣品的Alpha多樣性指數(shù)Table 1 Alpha diversity indexs for samples

    由表1可知,樣品的辛普森指數(shù)、超Ⅰ指數(shù)、Ace指數(shù)及香農(nóng)指數(shù)在4 ℃增菌溫度下的均值分別為0.039 855、862.05、869.81及7.15,在37 ℃增菌溫度下的均值分別為0.096 285、765.62、770.97及5.82,除辛普森指數(shù)外,4 ℃增菌溫度下的數(shù)值普遍高于37 ℃,表明在4 ℃增菌溫度下獲得的微生物群落多樣性與豐富度比37 ℃高。其中超Ⅰ指數(shù)和Ace指數(shù)最大的樣品為B14,其次為B4,最小的為樣品C4,說明4 ℃增菌溫度下貯藏14 d的冰鮮鴿肉物種豐富度達(dá)到最高。這可能是由于冰鮮鴿肉此時(shí)已腐敗,腐敗菌含量迅速增加,占主要優(yōu)勢(shì);而貯藏4 d時(shí)的物種豐富度也比較高,可能是由于此時(shí)冰鮮鴿肉中營養(yǎng)成分含量較高,細(xì)菌迅速生長繁殖,甚至達(dá)到細(xì)菌的對(duì)數(shù)生長期。香農(nóng)指數(shù)最大的樣品為B14,最小的為C4。辛普森指數(shù)最小的樣品為B14,最大的為C4。上述結(jié)果表明,微生物群落多樣性最高的為4 ℃條件下貯藏14 d的冰鮮鴿肉樣品,最低的為37 ℃條件下藏貯4 d的冰鮮鴿肉樣品。

    2.3 不同增菌溫度下細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析

    采用RDP-classifier對(duì)各樣品中的物種數(shù)目進(jìn)行物種注釋可以鑒定出冰鮮鴿肉貯藏過程中的細(xì)菌分屬于10 門、19 綱、28 目、39 科、53 屬。本研究就門、科分類學(xué)水平做具體分析。

    2.3.1 基于門分類水平上的分析

    圖 2 基于門分類水平上的樣品菌群分布圖Fig. 2 Bacterial community distribution at the phylum level

    由圖2可知,不同貯藏時(shí)間的冰鮮鴿肉微生物菌群在4 ℃和37 ℃增菌溫度下的菌相主要由變形菌門(Proteobacteria)、厚壁菌門(Firmicutes)和放線菌門(Actinobacteria)三大菌門組成。根據(jù)樣品在門水平上的菌群組成結(jié)果可以看出,4 ℃增菌溫度下變形菌門的總豐度為90.6%,放線菌門為5.8%,厚壁菌門為2.6%,37 ℃增菌溫度下變形菌門的豐度為66.1%,厚壁菌門為32.1%,放線菌門為1.8%。這說明不同貯藏時(shí)間的冰鮮鴿肉在不同增菌溫度下的微生物菌群組成均以變形菌門為優(yōu)勢(shì)菌門,且4 ℃增菌溫度下尤為明顯。4 ℃增菌溫度下變形菌門的生長趨勢(shì)為由低到高,貯藏10 d時(shí)達(dá)到峰值,并在16 d時(shí)降至71.9%;放線菌門總體呈下降趨勢(shì)。而在37 ℃增菌溫度下,變形菌門的生長趨勢(shì)為由低到高,在14 d時(shí)達(dá)到峰值,厚壁菌門與變形菌門的生長呈相反的趨勢(shì)。除了這些主要菌門外,還存在一些豐度較低的擬桿菌門(Bacteroidetes)、酸桿菌門(Acidobacteria)、藍(lán)藻細(xì)菌門(Cyanobacteria)、梭桿菌門(Fusobacteria)、硝化螺旋菌門(Nitrospirae)、綠彎菌門(Chloroflexi)、浮霉菌門(Planctomycetes)以及其他未能分類的菌門,有的所占百分比不足0.01%,圖中顯示不明顯。這也說明冰鮮鴿肉在貯藏過程中的微生物多樣性豐富、豐度比較集中的特點(diǎn)。

    2.3.2 基于科分類水平上的分析

    圖 3 基于科分類水平上的樣品菌群分布圖Fig. 3 Bacterial community distribution at the family level

    由圖3可知,不同貯藏時(shí)間的冰鮮鴿肉在4 ℃和37 ℃增菌溫度下總共分離得到39 個(gè)不同的科。在門水平上占主要優(yōu)勢(shì)的變形菌門(Proteobacteria)在科的分類水平上主要包括假單胞菌科(Pseudomonadaceae)、莫拉氏菌科(Moraxellaceae)、腸桿菌科(Enterobacteriaceae)、氣單胞菌科(Aeromonadaceae)、草酸桿菌科(Oxalobacteraceae)、希萬氏菌科(Shewanellaceae)、叢毛單胞菌科(Comamonadaceae)、甲基桿菌科(Methylobacteriaceae)、交替單胞菌科(Alteromonadaceae)、布魯氏菌科(Brucellaceae)、紅環(huán)菌科(Rhodocyclaceae)、食堿菌科(Alcanivoraceae)、柄桿菌科(Caulobacteraceae)及慢生根瘤菌科(Bradyrhizobiaceae)等。厚壁菌門(Firmicutes)在科水平上鑒定到的主要包括李斯特氏菌科(Listeriaceae)、疣微菌科(Ruminococcaceae)、鏈球菌科(Streptococcaceae)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、芽孢桿菌科(Bacillaceae)、消化鏈球菌科(Peptostreptococcaceae)、動(dòng)球菌科(Planococcaceae)、腸球菌科(Enterococcaceae)及葡萄乳球菌科(Staphylococcaceae)等。放線菌門(Actinobacteria)在科水平上鑒定到的主要有假諾卡氏科(Pseudonocardiaceae)、微球菌科(Micrococcaceae)、微桿菌科(Microbacteriaceae)、棒狀桿菌科(Corynebacteriaceae)、紅椿菌科(Coriobacteriaceae)、段桿菌科(Brevibacteriaceae)及雙歧桿菌科(Brevibacteriaceae)等。

    在4 ℃和37 ℃增菌溫度下,微生物菌群種類和豐度大小存在較大的差異性。在4 ℃增菌條件下,冰鮮鴿肉中的微生物菌群主要以假單胞菌科(Pseudomonadaceae)、莫拉氏菌科(Moraxellaceae)、假諾卡氏科(Pseudonocardiaceae)、腸桿菌科(Enterobacteriaceae)和氣單胞菌科(Aeromonadaceae)為主,其中假單胞菌科占比達(dá)64.6%,在4 ℃貯藏過程中呈先增長后下降的趨勢(shì),貯藏16 d時(shí)達(dá)到峰值87.3%。假單胞菌科是冰鮮鴿肉貯藏過程中的主要優(yōu)勢(shì)菌群,與目前大部分研究結(jié)果一致[15-16,29]。其次是莫拉氏菌科和假諾卡氏科,分別占14.5%和5.6%。在37 ℃增菌條件下,冰鮮鴿肉中的微生物菌群主要以氣單胞菌科(Aeromonadaceae)、動(dòng)球菌科(Planococcaceae)、腸桿菌科(Enterobacteriaceae)、假單胞菌科(Pseudomonadaceae)和假諾卡氏科(Pseudonocardiaceae)為主,其中氣單胞菌科、動(dòng)球菌科和腸桿菌科占比分別為36.7%、30.5%和24.4%。還有一部分菌群未能鑒定到具體菌科,有待進(jìn)一步研究。

    莫拉氏菌科(Moraxellaceae)和假單胞菌科(Pseudomonadaceae)在4 ℃增菌條件下的菌群豐度明顯高于37 ℃。莫拉氏菌科和假單胞菌科是典型嗜冷菌,是冰鮮鴿肉冷藏貯藏期間的優(yōu)勢(shì)腐敗菌,這與原林等[30]的研究結(jié)果一致,說明莫拉氏菌科和假單胞菌科是冷凍肉制品、冷凍水產(chǎn)品等的優(yōu)勢(shì)腐敗微生物。氣單胞菌科、動(dòng)球菌科和腸桿菌科在37 ℃增菌條件下的菌群豐度明顯高于4 ℃,且37 ℃增菌條件下氣單胞菌科、假單胞菌科和假諾卡氏科所占的比例總體上呈增加趨勢(shì),在貯藏16 d時(shí)達(dá)到最高,說明這幾類菌科是影響冰鮮鴿肉腐敗變質(zhì)的優(yōu)勢(shì)菌群。

    綜合以上分析發(fā)現(xiàn),低溫貯藏冰鮮鴿肉的主要菌群不僅包括嗜冷菌,還包括一些嗜溫菌。雖然樣本的貯藏條件為0~4 ℃,但是樣本中仍然存在一些嗜溫菌,生長溫度在30~37 ℃,如動(dòng)桿菌科、腸桿菌科、氣單胞菌科等。因此冰鮮鴿肉在貯藏過程中一定要控制好溫度,溫度波動(dòng)范圍太大會(huì)直接導(dǎo)致嗜溫菌等腐敗菌大量繁殖,促使冰鮮鴿肉腐敗。結(jié)合4 ℃低溫和37 ℃中溫2 種增菌溫度分析,可以較全面地反映冰鮮鴿肉在冷藏貯藏過程中污染的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的演替規(guī)律。

    2.4 不同增菌溫度下冰鮮鴿肉細(xì)菌群落的PCA

    依照不同貯藏時(shí)間將冰鮮鴿肉樣品分為9 組,每組由同一貯藏時(shí)間的4 ℃和37 ℃ 2 種增菌溫度的樣品組成。PCA圖中,橫軸表示第1主成分(PC1),縱軸表示第2主成分(PC2),圖中樣品之間位置越接近,表示樣品群落結(jié)構(gòu)組成越相似。

    圖 4 樣品細(xì)菌群落的PCAFig. 4 PCA of bacterial communities

    由圖4可知,在4 ℃增菌條件下,PC1與PC2的貢獻(xiàn)率分別為68.48%和16.76%,在37 ℃增菌條件下,PC1與PC2的貢獻(xiàn)率分別為95.51%和2.78%,說明2 個(gè)主成分是解釋樣品微生物群落結(jié)構(gòu)組成差異的主要因子。在4 ℃與37 ℃貯藏條件下,不同貯藏時(shí)間的各個(gè)樣品能明顯地分離,表明各個(gè)樣品間的微生物群落結(jié)構(gòu)組成具有一定差異。在PC1方向上,4 ℃和37 ℃增菌條件下的樣品能夠顯著地分布在2 個(gè)區(qū)域,說明增菌溫度在PC1水平上對(duì)樣品菌群結(jié)構(gòu)變化的影響顯著;在PC2方向上,不同貯藏時(shí)間的樣品區(qū)分明顯,說明貯藏時(shí)間在PC2水平上對(duì)樣品菌群結(jié)構(gòu)變化的影響顯著。同一增菌溫度下,貯藏前期(0~4 d)的樣品與貯藏中期(6~10 d)、貯藏后期(10~16 d)的樣品之間分布距離較大,這主要是由于冰鮮鴿肉在貯藏前期仍處于鮮肉與次鮮肉狀態(tài),而在貯藏中期開始加速腐敗,直到貯藏后期完全腐敗,進(jìn)而導(dǎo)致冰鮮鴿肉群落結(jié)構(gòu)組成發(fā)生較大變化。然而,2 種增菌溫度下,處于貯藏前期、中期、后期的各個(gè)樣品間距離較大,說明同一時(shí)期的樣品群落結(jié)構(gòu)組成發(fā)生變化。

    3 結(jié) 論

    對(duì)冰鮮鴿肉在4 ℃和37 ℃ 2 種增菌溫度下的細(xì)菌群落多樣性進(jìn)行研究,結(jié)果表明:在門水平上,4 ℃增菌溫度下變形菌門的豐度為90.6%,放線菌門為5.8%,厚壁菌門為2.6%;37 ℃增菌溫度下變形菌門的豐度為66.1%,厚壁菌門為32.1%,放線菌門為1.8%。其中,變形菌門從貯藏初期到貯藏后期的生長趨勢(shì)由低至高。在科水平上,在4 ℃增菌條件下,冰鮮鴿肉中的微生物菌群主要以假單胞菌科、莫拉氏菌科、假諾卡氏科、腸桿菌科和氣單胞菌科為主,其中假單胞菌科占比達(dá)64.6%,是冰鮮鴿肉貯藏過程中的主要優(yōu)勢(shì)菌群,生長趨勢(shì)也是隨著時(shí)間的延長而增長。在37 ℃增菌條件下,冰鮮鴿肉中的微生物菌群主要以氣單胞菌科、動(dòng)球菌科、腸桿菌科、假單胞菌科和假諾卡氏科為主,其中氣單胞菌科、動(dòng)球菌科和腸桿菌科的占比分別為36.7%、30.5%和24.4%。貯藏前期,假單胞菌科、莫拉氏菌科為主要優(yōu)勢(shì)菌科,但到后期莫拉氏菌科占比逐漸減少,而假諾卡氏科的占比逐漸增加。以上研究結(jié)果能夠幫助對(duì)冰鮮鴿肉低溫貯藏中的微生物菌群變化有較為全面的認(rèn)識(shí),要對(duì)冰鮮鴿肉進(jìn)行全面質(zhì)量管理的深入研究,基于門的水平,可以以變形菌門、厚壁菌門、擬桿菌門等優(yōu)勢(shì)菌門為重點(diǎn),基于科的水平,可以以假單胞菌科、莫拉氏菌科、假諾卡氏科、腸桿菌科和氣單胞菌科為重點(diǎn)。本研究結(jié)果對(duì)冰鮮鴿肉貯藏過程中微生物生長的抑制和延長冰鮮鴿肉貨架期方面的深入研究具有意義。

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