不同播種期對穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量的影響研究*

★ 王振 周 鵬 王章偉 張功俊 呂武清 楊小玲 謝寧 *（1.江西青峰藥業(yè)有限公司 江西 贛州 341000；.創(chuàng)新天然藥物與中藥注射劑國家重點實驗室 江西 贛州 341000）

藥材穿心蓮藥材為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees 的地上干燥部分。穿心蓮藥材藥用有效成分為穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯和新穿心蓮內(nèi)酯等二萜類內(nèi)酯化合物，具有清熱解毒，涼血，消腫功效。用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，泄瀉痢疾，熱淋澀痛，癰腫瘡瘍，蛇蟲咬傷等疾病的治療［1］。穿心蓮原產(chǎn)于印度，自引種至我國后，在長江以南的廣西、廣東、福建等省廣泛種植，筆者通過實地考察，發(fā)現(xiàn)各產(chǎn)地穿心蓮種植技術粗放，田間管理較為簡單，未對播種期進行有效控制，造成產(chǎn)品質(zhì)量不均一、波動較大。通過文獻調(diào)研，報道的穿心蓮播種期有4月上旬［2-3］、4 月中上旬［4］、5 月中上旬［5］等，時間跨度長，對穿心蓮規(guī)范化種植指導意義不大，且未對不同播種期對穿心蓮的產(chǎn)量及質(zhì)量影響做深入研究。作為國家中醫(yī)藥管理局中藥標準化項目“喜炎平注射液標準化建設”研究內(nèi)容之一，筆者在廣東湛江穿心蓮種植實驗基地開展不同播種期對穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量影響的實驗研究工作，通過考察不同播種期的穿心蓮生長量、內(nèi)酯含量及畝產(chǎn)量等指標變化情況，確定穿心蓮最佳播種期，為粵西穿心蓮規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。現(xiàn)將研究結(jié)果整理報道如下。

1 材料與儀器

穿心蓮內(nèi)酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110797-201609）；脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110854-201509）；甲醇為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。穿心蓮樣本采集于廣東湛江實驗基地，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學葛菲教授鑒定為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分。

Waters e2695 高效液相色譜系統(tǒng)，XS105DU/ML204T 電子天平（梅特勒-托利多科技有限公司），KQ-300DE 數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，250W，33KHz）。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗設計方法 文中試驗用穿心蓮種植在廣東湛江實驗基地，實驗基地前茬作物為土豆，土質(zhì)為磚紅色土壤，有機質(zhì)為7.8mg/kg（檢測單位：廣東省綠色產(chǎn)品認證檢測中心），肥力中等以上。根據(jù)文獻報道并結(jié)合湛江地區(qū)在清明前后開展穿心蓮種植的歷史背景情況，試驗設計考察3月底、4月初、4月中旬、4月底4個不同播種期，試驗區(qū)按照要求完成整地備耕后，定量施用生物有機肥，施用量為0.75 kg/m2。播種方式為機械播種（參數(shù)設置如下：行距25 cm，畦距40 cm，每畦地播種4行，畦寬120 cm），播種量0.59 g/m2，每個試驗組播種面積666.7 m2，各試驗組中耕除草、排灌、施肥、病蟲害防治等田間管理措施同當?shù)卮筇锓N植技術。

2.2 測產(chǎn)取樣方法 為保證測定的準確性必須科學的使用取點方法，因此，取點要力求做到合理，具有足夠的代表性、真實性，不應有任何主觀偏見。為了確保田間取點不出現(xiàn)人為錯誤，本次采取交叉法（梅花點）取點，地頭、周邊保護行、缺苗斷壟的地方因植株生長特殊，不具有代表性，應避免取點。每個試驗組取5個點，每個取樣點1m2左右，在播種后穿心蓮進入開花期（140天左右）開展測產(chǎn)取樣工作，記錄相關株高、分支數(shù)、鮮重、干重等參數(shù)，換算畝產(chǎn)量（畝產(chǎn)量=取樣點樣本干重平均值（kg）/樣本采集面積（m2）×666.7m2），計算每個試驗組平均值。

2.3 含量測定方法 穿心蓮藥材中穿心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測定，按2015版《中華人民共和國藥典》（一部）［1］“穿心蓮”項下“含量測定”方法進行測定，具體方法如下：

2.3.1 對照品溶液的制備 取穿心蓮內(nèi)酯對照品與脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品各10mg，精密稱定，置同一100mL棕色瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得混合對照品溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 取2.2項下測產(chǎn)樣品，粉碎，取本品粉末（過四號篩）0.5 g，精密稱定重量，精密加入40%甲醇25mL，稱定重量，浸泡1h，超聲處理（功率250W，33 KHz）30min，放冷，再稱定重量，用40%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10mL，置中性氧化鋁柱（200～300目，5g，內(nèi)徑1.5cm）上，用甲醇15mL洗脫，收集全部洗脫液，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3.3 色 譜 條 件 色 譜 柱：Ultimate?XB- C18（4.6mm×250mm，5μm）；流 動 相：甲 醇∶水（52∶48）；檢測波長：穿心蓮內(nèi)酯為225nm，脫水穿心蓮內(nèi)酯為254nm；流速0.8mL/min；柱溫30℃；進樣量5μL。理論板數(shù)按穿心蓮內(nèi)酯峰計算均應不低于6000，相鄰色譜峰分離度應大于1.5，對照品及供試品色譜圖見圖1。

圖1 HPLC色譜圖

表1 不同播種期對穿心蓮生長和產(chǎn)量的影響（n=5）

2.4 結(jié)果與分析

2.4.1 不同播種期對穿心蓮生長和產(chǎn)量的影響 通過表1數(shù)據(jù)可知，在相同田間管理條件下，不同播種期對穿心蓮生長及產(chǎn)量均有較大的影響。在平均株高方面，由高到低依次為：4月底實驗組、4月中旬實驗組、3月底/4月初實驗組；在分支數(shù)方面，由高到低依次為：4月初實驗組、4月中旬實驗組、4月底實驗組、3月底實驗組；在畝產(chǎn)量方面，由高到低依次為：4月中旬實驗組、4月底實驗組、4月初實驗組、3月底實驗組，其中4月中旬實驗組相對最低組3月底實驗組增產(chǎn)73.21 kg，增產(chǎn)率為18.80%，4月底實驗組相對最低組3月底實驗組增產(chǎn)61.38 kg，增產(chǎn)率為15.76%，四月初實驗組相對最低組3月底實驗組增產(chǎn)56.91kg，增產(chǎn)率為14.62%。結(jié)合田間觀察及播種后土壤溫度情況，3月底、4月初實驗組播種后穿心蓮種子在7天左右才能發(fā)芽，而4月中旬及4月底實驗組播種后穿心蓮種子在4天左右就開始發(fā)芽，時間較短，提示在播種時應同步考慮溫度對穿心蓮種子發(fā)芽的影響。根據(jù)不同播種期穿心蓮生長情況和產(chǎn)量實驗結(jié)果來看，播種時期在4月中旬最佳，4月底及4月初次之。

2.4.2 不同播種期對穿心蓮有效成分含量的影響 根據(jù)含量測定結(jié)果，計算穿心蓮藥材有效成分含量的平均值，詳細數(shù)據(jù)見表2，通過數(shù)據(jù)可知，在相同田間管理條件下，不同播種期穿心蓮藥效成份穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯及內(nèi)酯總量均有所變化。隨著播種期的延后，穿心蓮內(nèi)酯含量呈現(xiàn)降低趨勢，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量波動不明顯。穿心蓮內(nèi)酯含量以播種期3月底實驗組最好，高達4.74%、4月初實驗組稍次，為4.73%，兩者無明顯差異；其次為4月中旬實驗組，為4.44%，4月底實驗組穿心蓮內(nèi)酯含量最低，僅為3.73%；脫水穿心蓮內(nèi)酯含量以播種期4月初實驗組較高，為0.71%，3月底及4月底實驗組稍低，為0.51%，4月中旬實驗組最低，僅為0.43%；穿心蓮內(nèi)酯總量以播種期4月初實驗組最高，為5.44%，3月底實驗組稍低，為5.27%，4月底內(nèi)酯總量最低，僅為4.26%；通過表2數(shù)據(jù)可知，不同播種期的穿心蓮藥材，穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的總量均遠遠超過“中國藥典”該品種項下的含量標準（不得少于0.80%）。因此，從穿心蓮有效成分含量指標來看，播種期以4月初實驗組最佳。

表2 不同播種時期對穿心蓮質(zhì)量的影響（n=5）

3 討論與結(jié)論

上述結(jié)果分析可知，在相同播種量、相同田間管理條件下，不同播種期對穿心蓮產(chǎn)量及質(zhì)量均有一定的影響。穿心蓮喜溫暖濕潤氣候，怕干旱，故4月初及4月中旬播種，穿心蓮藥材的產(chǎn)量和含量均相對較高；3月底播種，由于環(huán)境溫度較低，前期生長受到抑制，植株偏矮，造成其畝產(chǎn)量較低；而4月底播種時，穿心蓮發(fā)芽后在幼苗期至快速生長階段，隨著環(huán)境溫度的升高，穿心蓮植株生長未能及時封行，水分蒸發(fā)較快，增加田間管理難度。

穿心蓮畝產(chǎn)量與穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、內(nèi)酯總量間部分呈現(xiàn)負相關，說明穿心蓮的產(chǎn)量性狀與質(zhì)量性狀是一對矛盾體。為達到效益的最大化，追求最大的經(jīng)濟產(chǎn)量，參考本研究結(jié)果并結(jié)合 “喜炎平注射液” 產(chǎn)品對原材料的要求，筆者以穿心蓮內(nèi)酯含量及畝產(chǎn)量為指標，計算畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量（畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量=穿心蓮內(nèi)酯含量×畝產(chǎn)量），以畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為主要評判指標確定穿心蓮最佳播種期。結(jié)果表明，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量以4月初播種實驗組最高，為21.11kg，4月中旬播種實驗組稍低，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為20.54kg，3月底播種實驗組畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量為18.46kg，4月底播種實驗組最低，畝產(chǎn)穿心蓮內(nèi)酯量僅為16.81kg。

綜上所述，本研究初步確定粵西地區(qū)穿心蓮最佳播種期為4月初，研究結(jié)果與廣東湛江種植歷史背景基本吻合，為實現(xiàn)穿心蓮藥用植物資源的可持續(xù)利用及發(fā)展提供技術支持，同時為后續(xù)在粵西地區(qū)開展穿心蓮規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。