董建濤
(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科,浙江 杭州 310009)
尿液分析是用儀器等方法對(duì)尿液成分質(zhì)和量的變化進(jìn)行分析,以達(dá)到對(duì)泌尿、循環(huán)、肝、膽、內(nèi)分泌等疾病進(jìn)行預(yù)防、診斷療效觀察及預(yù)后判斷。儀器的方法原理的局限性導(dǎo)致了檢測(cè)項(xiàng)目出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況[1],其中以尿膽紅素的假陽(yáng)性率最高。膽紅素主要來(lái)源于紅細(xì)胞衰老破壞后血紅蛋白的降解,部分來(lái)源于肌紅蛋白、細(xì)胞色素、過(guò)氧化物酶的降解。然后通過(guò)腸肝循環(huán)和泌尿系統(tǒng)排出體外,尿膽紅素的水平反應(yīng)血液膽紅素的水平,相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)尿液中膽紅素的升高表明血液中膽紅素的升高在冠心病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用[2]以及老年性梗阻性黃疸的治療具有指導(dǎo)意義[3]。同時(shí)尿膽紅素對(duì)于鑒別診斷黃疸的發(fā)病機(jī)制有著至關(guān)重要的作用,對(duì)于尿膽紅素假陽(yáng)性的影響因素的分析十分必要。
1.1 標(biāo)本來(lái)源 選取2017年1月至2017年12月住院和門(mén)診病人新鮮尿液標(biāo)本110例,其中尿膽紅素陽(yáng)性和尿膽原陽(yáng)性100例,男性70例,女性30例。尿膽原陰性和尿膽紅素陽(yáng)性10例,男性8例,女性2例。健康對(duì)照組尿液50例,男性30例,女性20例所有入選對(duì)象均排除惡性腫瘤、肝腎疾病、免疫系統(tǒng)疾病、6個(gè)月內(nèi)手術(shù)及創(chuàng)傷甲狀腺功能紊亂、急慢性感染、伴其他心臟病。
1.2 方法 儀器法:使用日本ARKRAY公司生產(chǎn)的型號(hào)為AX-4280尿液分析儀和日本ARKRAY公司生產(chǎn)的批號(hào)為OEA7B30試紙條對(duì)尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。手工法[4]尿膽紅素檢測(cè):⑴尿膽紅素檢測(cè):取尿液5ml,加入約2.5ml 100g/L氯化鋇溶液,混勻,15×100離心后棄去上清液,向沉淀物加入福丘特試劑 (0.9%三氯化鐵和25%三氯乙酸等比例配置)數(shù)滴并觀察結(jié)果。⑵尿膽原檢測(cè):取尿液5ml,加入100g/L氯化鋇溶液lml,混勻離心后取上清液lml加入歐氏試劑(2g的對(duì)二氨基苯甲醛溶于80ml的蒸餾水和濃鹽酸20ml配置而成)0.1ml混勻,靜置10min觀察結(jié)果。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 17.0的軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,多組間比較用Kruskal-Wallis H和t檢驗(yàn),以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
2.1 儀器法和手工法尿膽紅素檢測(cè)結(jié)果 儀器檢測(cè)的尿膽紅素陽(yáng)性和尿膽原陽(yáng)性的標(biāo)本100例和尿膽紅素陽(yáng)性和尿膽原陰性10例,經(jīng)過(guò)尿膽紅素手工檢測(cè),結(jié)果顯示尿膽紅素假陽(yáng)性率之間是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的(P<0.05),也就是表明尿膽原陽(yáng)性的標(biāo)本對(duì)尿膽紅素的測(cè)定會(huì)產(chǎn)生干擾,以至于出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況。見(jiàn)表1。
表1 尿膽紅素陽(yáng)性手工驗(yàn)證表
2.2 不同含量的尿膽原與尿膽紅素假陽(yáng)性率的關(guān)系 從表中可以得出當(dāng)尿膽原含量(++以上)時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 見(jiàn)表 2。
大多數(shù)文獻(xiàn)記載的都是尿膽紅素對(duì)尿膽原的影響[5],但是反過(guò)來(lái)尿膽原對(duì)尿膽紅素的影響卻沒(méi)有學(xué)者進(jìn)行過(guò)研究探討。儀器尿干化學(xué)的分析尿膽紅素和尿膽原都是通過(guò)與重氮鹽 (尿膽紅素的重氮鹽是2.4-二氯苯胺3鹽和尿膽原的重氮鹽是重氮四氟化硼酸鹽)在酸性環(huán)境中的反應(yīng)形成紅褐色的偶氮色素后儀器通過(guò)雙波長(zhǎng)反射法對(duì)反應(yīng)區(qū)域測(cè)定顏色深淺的反射率來(lái)進(jìn)行量判斷的[6],兩者之間存在一定的交叉反應(yīng)[7]。尿膽紅素的檢測(cè)具有重要的臨床意義,例如Stanford B型主動(dòng)脈夾層術(shù)前腎功能不全時(shí)尿膽紅素會(huì)出現(xiàn)明顯的陽(yáng)性[8]有助于對(duì)手術(shù)的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估。急性大量溶血發(fā)生黃疸時(shí)尿液中的尿膽原增多而尿膽紅素為陰性[9],梗阻性黃疸尿紅素強(qiáng)陽(yáng)性而尿膽原陰性。對(duì)于鑒別診斷黃疸的類型具有重要的意義。尿液膽紅素增多反應(yīng)血液膽紅素增多,對(duì)于2型糖尿病病情的控制具有臨床意義[10]。綜上所述即使尿液中只有輕微的含量臨床上也要判斷為異常,所以對(duì)尿液中對(duì)尿膽紅素的假陽(yáng)性的影響因素的分析變的很重要。尿膽原陽(yáng)性的標(biāo)本在臨床中碰到的概率也很高,尿膽原是膽總管結(jié)石并發(fā)化膿性膽管炎的早期預(yù)警因素[11]但是尿膽原的測(cè)定干擾因素比較大而且正常人尿液中也可以檢測(cè)出微量的尿膽原同時(shí)如果運(yùn)動(dòng)或者飲酒后尿液中也會(huì)出現(xiàn)尿膽原。尿膽原和尿膽紅素同時(shí)陽(yáng)性的標(biāo)本就非常的具有研究意義。筆者通過(guò)收集本院患者和正常人的尿液進(jìn)行分析得出結(jié)論:尿液中的尿膽原處于陰性時(shí),對(duì)尿膽紅素幾乎不會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性干擾。當(dāng)尿液中的尿膽原處于弱陽(yáng)性(+)時(shí),尿膽紅素會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性,但是出現(xiàn)的病例數(shù)量比較少,并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義。但是當(dāng)尿膽原處于強(qiáng)陽(yáng)性(量級(jí)++以上)時(shí),尿膽紅素假陽(yáng)性檢出率明顯提高。因此非常值得臨床檢驗(yàn)工作者注意并且重視。
表2 尿膽原量與尿膽紅素假陽(yáng)性率的關(guān)系