郭軍鵬,李予煊,張兆鵬,孟 超,劉宏巖
(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué),長(zhǎng)春 130117)
人參是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材,在最早的醫(yī)學(xué)巨作《神農(nóng)本草經(jīng)》中居為上品之首,所以素有人參“冠百草”之稱(chēng)。隨著科學(xué)技術(shù)尤其是化學(xué)分析技術(shù)的發(fā)展,其化學(xué)成分逐漸明晰,僅皂苷就有百余種之多[1-2]。藥理活性隨之也非常廣泛,近些年的研究主要集中在抗腫瘤、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、提高機(jī)體免疫功能和抗衰老等方面[3-7]。在消化系統(tǒng)方面研究較少,大多以方劑成分之一如四磨湯、理中湯、四君子湯等形式治療胃腸道疾病[8-10]。本實(shí)驗(yàn)將觀(guān)察人參水提物對(duì)脾虛小鼠胃腸動(dòng)力和胃腸激素的影響,為人參治療消化系統(tǒng)疾病奠定理論基礎(chǔ)。
1.1 動(dòng)物分組及給藥 雄性昆明小鼠40只,隨機(jī)分成空白對(duì)照組、模型組、西沙必利組和人參水提物組,每組10只。除空白對(duì)照組外,其余3組給予大黃水煎劑40 g/(kg·d),連續(xù)7 d,制備脾虛病理模型。西沙必利0.5 mg/(kg·d),人參水提液2.5 g/(kg·d)(相當(dāng)于人用生藥量的10倍),連續(xù)給藥6 d。
1.2 藥物及試劑 大黃水煎液的制備:將大黃以8倍體積的純凈水浸泡1 h,文火煮沸保持15 min。倒出藥汁,再以6倍體積水重復(fù)1次,合并濾液,濃縮至100%,即每1 mL藥汁含生藥l g。人參水提物的制備:按動(dòng)物與人體的體質(zhì)量換算大鼠用藥劑量,8倍體積的純凈水浸泡1 h,水煎30 min。倒出藥汁,再以6倍體積水重復(fù)1次,合并濾液,濃縮至0.25 g生藥/mL。西沙必利:浙江京新藥業(yè)股份有限公司(批號(hào):B1412081)。胃動(dòng)素(MTL)和Ghrelin試劑盒:北京華英生物技術(shù)研究所。
1.3 觀(guān)察指標(biāo)及方法
1.3.1 人參水提物對(duì)脾虛小鼠胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率及小腸推進(jìn)率的影響 末次給藥1 h后,灌胃2%葡聚糖藍(lán)(BD)0.2 mL,12 min后解剖分離全胃腸,剪開(kāi)胃壁將胃內(nèi)殘留物溶于4 mL去離子水中,應(yīng)用分光光度計(jì)測(cè)上清液和2%葡聚糖藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)吸光度(620 nm)。以2%葡聚糖藍(lán)- 2 000的吸光度作為標(biāo)準(zhǔn)值,各給藥組吸光度與標(biāo)準(zhǔn)值的比值(百分比)計(jì)為各組的胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率。
胃內(nèi)色素殘留率=各試驗(yàn)組胃內(nèi)色素殘留物吸光度值/標(biāo)準(zhǔn)值×100%。
在平板上展開(kāi)并平鋪小腸,以幽門(mén)至葡聚糖藍(lán)最前沿的距離為推進(jìn)距離,與幽門(mén)至回盲部長(zhǎng)度之比記為小腸推進(jìn)率[11]。
1.3.2 人參水提物對(duì)脾虛小鼠血清胃動(dòng)素(MTL)和Ghrelin水平的影響 末次給藥后1 h摘眼球取血,離心,取血清,按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清胃動(dòng)素(MTL)和Ghrelin水平。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x± s )表示,用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,單因素方差分析,均采用組間兩兩比較。
2.1 人參水提物對(duì)脾虛小鼠胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率和小腸推進(jìn)率的影響 見(jiàn)表1。
表1 人參水提物對(duì)脾虛小鼠胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率和小腸推進(jìn)率的影響(x± s ,n = 10) %
2.2 人參水提物對(duì)脾虛小鼠血清胃動(dòng)素(MTL)和Ghrelin水平的影響 見(jiàn)表2。
表2 人參水提物對(duì)脾虛小鼠血清胃動(dòng)素(MTL)和Ghrelin水平的影響(x± s ,n = 10)
胃腸道有節(jié)律的運(yùn)動(dòng)是保證消化系統(tǒng)功能的重要環(huán)節(jié)。胃腸道運(yùn)動(dòng)是通過(guò)神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)平滑肌收縮和舒張形成的,其主要形式包括緊張性收縮和移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)等[12-14]。消化系統(tǒng)的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)是通過(guò)胃腸激素實(shí)現(xiàn)的,根據(jù)其功能分為2類(lèi):促胃腸激素和抑胃腸激素[15-17]。Ghrelin是近些年發(fā)現(xiàn)的與胃動(dòng)素(MTL)相似的促胃腸激素。研究發(fā)現(xiàn),其受體主要分布在胃腸和中樞神經(jīng)系統(tǒng),與受體結(jié)合后可以產(chǎn)生包括促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)等廣泛生物效應(yīng)。因?yàn)镚hrelin分泌節(jié)律與移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)Ⅲ相的肌電活動(dòng)一致,所以認(rèn)為Ghrelin通過(guò)促進(jìn)胃腸移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)而發(fā)揮作用[18-20]。
本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),人參水提物能夠降低大黃誘導(dǎo)的脾虛小鼠胃內(nèi)色素相對(duì)殘留率,增加小腸推進(jìn)率,說(shuō)明人參提取物能夠提高脾虛小鼠胃腸動(dòng)力。進(jìn)一步檢測(cè)胃腸激素發(fā)現(xiàn)人參水提物組小鼠血清Ghrelin顯著增加,而胃動(dòng)素(MTL)水平無(wú)明顯變化。
綜上所述,人參水提物能夠通過(guò)調(diào)節(jié)Ghrelin促胃腸道激素水平而改善胃腸動(dòng)力不足,為人參在臨床治療消化系統(tǒng)疾病奠定了理論基礎(chǔ)。