不同廠家瑞格列奈片中左旋異構(gòu)體雜質(zhì)含量檢查

北京市東城區(qū)食品藥品安全監(jiān)控中心（100050）王麗霞

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Waters2695高效液相色譜儀，2487紫外檢測器；賽多利斯BP211D電子天平，賽多利斯CP124S電子天平。

1.2 試藥 消旋瑞格列奈對照品(批號：100863-201101，中國食品藥品檢定研究院，含量：100.0%)；瑞格列奈對照品(批號：100753-201303，中國食品藥品檢定研究院，含量：99.8%)；瑞格列奈片(A廠，規(guī)格1.0mg，批號：*****938B)；瑞格列奈片(A廠，規(guī)格2.0mg，批號：*****144A，批號：*****167A)；瑞格列奈片(B廠，規(guī)格0.5mg，批號：***720，***711，***909)；瑞格列奈片(C廠，規(guī)格1.0mg，批號：***006，***023，***022)；瑞格列奈片(D廠，規(guī)格1mg，批號：***103)；乙腈（色譜純），實驗用水為超純水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：大賽璐α1-酸性糖蛋白手性色譜柱(4.0mm×100mm，5μm)；流動相：磷酸鹽緩沖液（磷酸二氫鉀2.72g，加水800ml使溶解，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至7.0，加水稀釋至1000ml搖勻）為流動相A，乙腈為流動相B；流速1.0mL·min-1；梯度洗脫，洗脫表見附表。檢測波長240nm；柱溫30.0℃；進樣量：20μL。

附圖 系統(tǒng)適用性HPLC譜圖。A消旋瑞格列奈對照品溶液；B瑞格列奈對照品溶液；C瑞格列奈片供試品溶液；D瑞格列奈片對照溶液；E甲醇；F水

附表 洗脫梯度表

2.2 溶液的制備 ①消旋瑞格列奈對照品溶液 精密稱取消旋瑞格列奈對照品約10mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻。②瑞格列奈對照品溶液 精密稱取瑞格列奈對照品約10mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻。③供試品溶液 精密稱取瑞格列奈片細粉適量，置50mL量瓶中，加甲醇15mL使瑞格列奈溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過。④對照溶液 精密量取供試品溶1mL，置100mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。⑤溶劑 分別取甲醇、水。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗 分別取消旋瑞格列奈對照品溶液、瑞格列奈對照品溶液、供試品溶液、對照溶液溶液、溶劑甲醇、溶劑水，以“2.1”色譜條件分析，色譜圖見附圖，瑞格列奈保留時間3.671min，理論板2788，左旋異構(gòu)體保留時間6.139min，理論板6297，瑞格列奈與左旋異構(gòu)體完全分離，系統(tǒng)條件滿足要求。

2.4 精密度實驗 取消旋瑞格列奈對照品溶液，以“2.1”色譜條件，重復(fù)進樣5次，求得瑞格列奈峰面積的RSD分別為0.92%，左旋異構(gòu)體峰面積RSD為1.28%。

2.5 穩(wěn)定性實驗 取消旋瑞格列奈對照品溶液，以“2.1”色譜條件，在0h，1h，2h，4h，6h，20h，24h重復(fù)進樣，測定峰面積，計算瑞格列奈峰面積的RSD分別為1.53%，左旋異構(gòu)體峰面積RSD為1.41%，24h內(nèi)溶液基本穩(wěn)定。

2.6 檢測限 取消旋瑞格列奈對照品溶液逐步稀釋，以“2.1”色譜條件進樣，以左旋異構(gòu)體峰面積信噪比為3/1為條件，測量檢測限，得消旋瑞格列奈進樣濃度0.2μg·mL-1，左旋異構(gòu)體濃度為0.1μg·mL-1。

2.7 樣品中左旋異構(gòu)體檢查 分別對四個廠家9批次瑞格列奈片，以“2.1”色譜條件進樣，結(jié)果均未檢出左旋異構(gòu)體雜質(zhì)。

3 結(jié)果與討論

3.1 本文采用《中國藥典》2015年版方法對4廠家9批次瑞格列奈片中左旋異構(gòu)體雜質(zhì)檢查，均未檢出左旋異構(gòu)體，滿足藥典中左旋異構(gòu)體含量不得高于1.0%的要求。

3.2 該方法流動相采用梯度洗脫方式，達到瑞格列奈及其左旋異構(gòu)體的分離，瑞格列奈與左旋異構(gòu)體保留時間分別在3min與6min左右，在《中國藥典》2015年版洗脫時間10min后，方法設(shè)置時建議繼續(xù)洗脫幾分鐘使管路中流動相的比例切換至流動相A/流動相B為90∶10，保證儀器序列自動進樣時，體系能夠達到平衡。

3.3 本文采用的方法為《中國藥典》2015年版法定方法，經(jīng)過對方法的系統(tǒng)適用性、精密度、穩(wěn)定性方法學(xué)考察，該方法瑞格列奈與左旋異構(gòu)體能夠完全分離，體系相對穩(wěn)定。